發(fā)布時間：2022-05-21 08:40:04
開篇：寫作不僅是一種記錄，更是一種創(chuàng)造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的1篇微生物論文，希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
【摘要】植物體內(nèi)大量分布的微生物對植物產(chǎn)生的影響已成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)，特別是那些有益的影響可對植物的生長及活性成分的形成產(chǎn)生一定的作用。甘草作為一種大宗中藥，其栽培品的質(zhì)量一直是人們所關(guān)心的問題，甘草有益微生物對提高甘草的品質(zhì)有重要作用。該文綜述了甘草有益微生物的研究進(jìn)展，以期對提高栽培甘草的質(zhì)量起到指導(dǎo)意義。
【關(guān)鍵詞】甘草;內(nèi)生菌;根瘤菌;菌根真菌
甘草是豆科甘草屬(Glycyrrhiza)植物，其根及根莖為常用中藥，市場需求量大。近年來，隨著野生甘草資源的急劇減少，且國家明令禁止采挖野生甘草，使甘草供求矛盾日益尖銳。在這種情況下，對甘草資源的保護(hù)性利用及栽培甘草勢在必行。近年來，隨著人工甘草種植面積的逐年加大，提高甘草的質(zhì)量成為亟待解決的一個關(guān)鍵問題。相關(guān)研究表明，植物有益微生物可以產(chǎn)生促植物生長的活性物質(zhì)，提高植物固氮性能，促進(jìn)植物對惡劣環(huán)境的適應(yīng)，加強(qiáng)系統(tǒng)的生態(tài)平衡，保證寄主植物健康生長。因此本文就近年來甘草有益微生物的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期對提高栽培甘草的質(zhì)量有指導(dǎo)意義。
1甘草內(nèi)生菌的研究現(xiàn)狀
內(nèi)生菌是指一生或至少一生中的某個階段能進(jìn)入活體植物組織內(nèi)，并且不引起明顯組織變化的真菌或細(xì)菌［1,2］。1993年，Strobel等［3］從短葉紅豆杉TaxusbrevifoliaNutt的樹皮中分離出二百多種微生物，其中有一株內(nèi)生真菌Taxomycesandreanae能產(chǎn)生紫杉醇，這一研究結(jié)果引起學(xué)者對內(nèi)生菌的廣泛興趣。目前，人們已經(jīng)從長春花、千層塔、銀杏、厚樸等多種植物中分離得到了內(nèi)生菌，并取得了一些成果。
有學(xué)者對甘草內(nèi)生菌也進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)內(nèi)生菌對甘草產(chǎn)生一系列作用。宋素琴等［4］對采自新疆的健康野生脹果甘草不同組織中的內(nèi)生菌進(jìn)行分離，并純化得到149株細(xì)菌和2株真菌，鑒定得出149株細(xì)菌分屬于13個屬，2株真菌分屬于青霉菌屬Penicillium和鐮刀菌屬Fusarium。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)內(nèi)生菌可通過拮抗病原菌促進(jìn)甘草生長。饒小莉等［5］從烏拉爾甘草健康植株的根莖葉中共分離到內(nèi)生細(xì)菌98株，并采用平板對峙方法篩選出6株菌株，其對植物病原菌有明顯體外拮抗活性，鑒定這6株拮抗菌株分屬萎縮芽孢桿菌(Bacillusatrophaeus)、多粘類芽孢桿菌(Paenibacilluspolymyxa)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、Paenibacillusehimensis。龔明福等［6］采用無菌操作技術(shù)從野生健康甘草Glycyrrhizauralensis的根、莖、葉、種子、根瘤等組織中分離出內(nèi)生細(xì)菌（Endophyticbacteria)125株，其中31株對棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporum)、棉花黃萎病菌(Verticilliumdahliae)具有較強(qiáng)的拮抗活性，這31株內(nèi)生細(xì)菌分屬于氣芽孢桿菌屬(Aerobacillussp.)、氣單胞菌屬(Aeromonassp.)、芽孢桿菌屬(Bacillussp.)、黃單孢桿菌屬(Xanthomonassp.)、假單胞桿菌屬(Pseudomonassp.)、土壤桿菌屬(Agrobacteriumsp.)。另有研究發(fā)現(xiàn)，從甘草中分離的有些內(nèi)生菌還可產(chǎn)生活性物質(zhì)。韋革宏等［7］從烏拉爾甘草和光果甘草中共分離得到68株內(nèi)生菌，從中篩選出一個來自烏拉爾甘草的菌株Mesorhizobiumsp.CCNWGX022，從該菌株發(fā)酵液的石油醚提取物中分離得到了十八烷酸內(nèi)酯Rhizobialide，是第一次從內(nèi)生菌中得到此類物質(zhì)。另有學(xué)者研究了內(nèi)生菌在甘草不同部位及不同月份的數(shù)量變化趨勢。林世利等［8］分離出不同月份苦豆子、駱駝刺、苜蓿、鈴鐺刺、甘草不同部位的內(nèi)生細(xì)菌，研究阿拉爾地區(qū)豆科植物內(nèi)生細(xì)菌種群動態(tài)。結(jié)果顯示5月份的苦豆子和甘草植株、8月份的苜蓿植株、9月份的鈴鐺刺和駱駝刺植株的內(nèi)生細(xì)菌的種類最多。內(nèi)生細(xì)菌種類的分布規(guī)律依次為苦豆子中葉＞莖＞根＞種子＞花，苜蓿中根＞葉＞莖＞花＞種子，鈴鐺刺中莖＞葉＞種子＞花＞根，駱駝刺中根＞莖≥葉＞種子＞花，甘草中莖＞根＞葉＞種子＞花。5種豆科植物生長期中總帶菌量平均值在各個月份變化趨勢不同，并且各個月份的帶菌量處于交替變化之中，說明不同月份5種豆科植物內(nèi)生細(xì)菌的種類和數(shù)量不同，同種豆科植物不同組織部位的內(nèi)生細(xì)菌的種類和數(shù)量有差異。
2甘草根瘤菌的研究現(xiàn)狀
根瘤菌是與豆科植物共生，形成根瘤并固定空氣中的氮?dú)夤┲参餇I養(yǎng)的一類桿狀細(xì)菌。這種共生體系具有很強(qiáng)的固氮能力。根瘤菌分快生和慢生兩種類型，為化能異養(yǎng)菌。目前有學(xué)者已經(jīng)從甘草中分離得到根瘤菌并進(jìn)行了一些相關(guān)研究。
目前對甘草根瘤菌的研究多體現(xiàn)在根瘤菌的分類上。楊雪穎等［9］通過對西北干旱半干旱地區(qū)68株甘草根瘤菌的表型多樣性和抗逆性分離研究，發(fā)現(xiàn)1個新類群和1個具有較高抗逆性的菌株。對新類群的中心菌株CCNWGX022和高抗性菌株CCNWGX035進(jìn)行16SrDNA全序列測定及系統(tǒng)進(jìn)化研究。結(jié)果表明，CCNWGX022和CCNWGX035與中慢生根瘤菌屬內(nèi)參比菌株的16SrDNA相似性分別大于96.8％和98.3％，判定它們均屬于中慢生根瘤菌屬。谷峻等［10］采用表型數(shù)值分類、16SrDNAPCR-RFLP分析和BOX-PCR指紋圖譜分析的方法對中國北方地區(qū)的甘草根瘤菌進(jìn)行表型、遺傳多樣性分析。供試菌株在數(shù)值分類聚類分析中約85％的相似水平上產(chǎn)生2個表觀群，有11株菌未與已知參比菌株聚群。16SrDNAPCR-RFLP分析表明，供試的20株菌共產(chǎn)生14種遺傳型，表現(xiàn)出豐富的遺傳多樣性。BOX-PCR指紋圖譜分析進(jìn)一步證明與甘草共生的根瘤菌的基因組也具有多樣性。由此得出結(jié)論：在中國北方地區(qū)與甘草共生的根瘤菌在Sinorhizobium、Rhizobium和Mesorhizobium屬中均有分布。
3甘草菌根真菌的研究現(xiàn)狀
菌根是土壤中某些真菌與植物根的共生體。凡能引起植物形成菌根的真菌稱為菌根真菌，大部分屬擔(dān)子菌亞門，小部分屬子囊菌亞門。菌根真菌與植物之間建立相互有利、互為條件的生理整體，并各有形態(tài)特征，這是真核生物之間實(shí)現(xiàn)共生關(guān)系的典型代表。根據(jù)形態(tài)和解剖學(xué)的特征，又把菌根分為外生菌根和內(nèi)生菌根兩大類。有學(xué)者對甘草菌根真菌進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)菌根真菌可促進(jìn)甘草的生長。饒小莉等［11］分離了甘草的VA菌根，并用三葉草進(jìn)行單孢繁殖，將繁殖后的菌根真菌回接甘草，結(jié)果發(fā)現(xiàn)接種了菌根真菌的甘草植株筆長、根粗、莖葉干重和根干重都有較大程度的提高，均比對照顯著增加，并且不同處理對植株生長影響不同，得出結(jié)論接種VA菌根真菌顯著促進(jìn)了甘草的營養(yǎng)生長。JingnanLiu等［12］用兩種AM菌根真菌Glomusmosseae與Glomusversiforme接種甘草，結(jié)果顯示接種的甘草相對于對照組在生長的早期和晚期有顯著提高，葉攝取磷的量比對照組多，并且根中甘草酸的濃度有所升高，但根部氧化酶活性相對降低了，由此得出結(jié)論接種AM菌根真菌有可能成為提高甘草藥用價值的有效途徑。
4甘草其他微生物學(xué)相關(guān)研究現(xiàn)狀
近年來，對甘草微生物學(xué)轉(zhuǎn)化等方面的研究工作也取得了一定成果。謝毛成［13］利用發(fā)根農(nóng)桿菌的Ri質(zhì)粒，以光果甘草種子胚萌發(fā)形成的實(shí)生苗不同部位為外植體，成功誘導(dǎo)出光果甘草毛狀根，并利用TLDNA中rolC序列中的特異性引物，應(yīng)用PCR技術(shù)對光果甘草毛狀根進(jìn)行了分子水平的鑒定，并利用理化手段對毛狀根轉(zhuǎn)化后產(chǎn)生的冠瘦堿進(jìn)行了薄層定性鑒定，從不同水平上證實(shí)了光果甘草毛狀根核基因組中已整合了外源Ri質(zhì)粒的T-DN段。燕飛等［14］利用發(fā)根農(nóng)桿菌R1601對藥用植物脹果甘草(GlycyrrhizainflatBat)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，誘導(dǎo)其產(chǎn)生發(fā)根。在發(fā)根誘導(dǎo)過程中，分別用不同菌液濃度、不同浸染時間對脹果甘草子葉、胚軸進(jìn)行轉(zhuǎn)化處理，統(tǒng)計、比較各條件下的發(fā)根率，結(jié)果表明，用稀釋2倍的菌液浸染子葉8min時，發(fā)根誘導(dǎo)率最高,為56.49%。何晨等［15］用一株產(chǎn)β-葡糖醛酸酶的菌種HC-12對甘草進(jìn)行液體發(fā)酵轉(zhuǎn)化。通過對菌種復(fù)合誘變以及應(yīng)用系統(tǒng)數(shù)值化及靈敏值系統(tǒng)調(diào)控技術(shù)優(yōu)化了發(fā)酵工藝，把甘草中不足0.1%的甘草次酸的含量提高了20倍以上。經(jīng)過柱層析及HPLC及1HNMR鑒定分離得到了甘草次酸純品，并通過動物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了發(fā)酵甘草于未發(fā)酵的生品對照甘草具有抗炎活性和鎮(zhèn)痛作用顯著性效果。
5小結(jié)
內(nèi)生菌對甘草的有益作用體現(xiàn)在：①內(nèi)生菌有促進(jìn)甘草生長作用，內(nèi)生菌可與病原菌競爭營養(yǎng)或直接產(chǎn)生拮抗物質(zhì)而抑制病原菌，從而促進(jìn)甘草生長。②有些內(nèi)生菌可產(chǎn)生活性物質(zhì)。③內(nèi)生菌在甘草不同部位及不同月份的數(shù)量呈現(xiàn)一定的變化趨勢。另有研究表明，內(nèi)生菌能產(chǎn)生與宿主相同的活性物質(zhì)［3］，王興紅［16］推測內(nèi)生真菌可能與中藥的道地性有密切的關(guān)系。這些成果對于甘草內(nèi)生菌的研究有重要意義。
根瘤菌對甘草的有益作用體現(xiàn)在：根瘤菌能夠通過與甘草共生，引起甘草根部或莖部結(jié)瘤，將空氣中的N2轉(zhuǎn)化為可吸收利用的NH4，從而為甘草提供氮素營養(yǎng)，促進(jìn)其生長。
菌根真菌對甘草的有益作用體現(xiàn)在：甘草和菌根真菌是一種互惠共生的關(guān)系，它們之間可以交換各自所需的物質(zhì)，甘草借助菌根真菌吸收水分、養(yǎng)分和生長促進(jìn)劑，而菌根真菌也從甘草中攝取自身生長所需要的糖分和其它有機(jī)物。菌根真菌是根系的延長和擴(kuò)展，且比根系吸收水分、養(yǎng)分的能力大得多，可促進(jìn)甘草的營養(yǎng)生長，提高甘草的藥用價值。
微生物轉(zhuǎn)化對甘草的作用體現(xiàn)在：對甘草進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化，可提高其有效成分含量，用藥效果可得到提高。
總之，微生物是個潛力巨大、尚待開發(fā)的資源，對甘草相關(guān)微生物進(jìn)行研究有重大意義，有利于提高甘草的質(zhì)量，對于中藥的可持續(xù)發(fā)展也將起到重大作用。
摘 要 獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)通過做好實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和管理，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，改革實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)課考核方式等具體措施，一定能培養(yǎng)學(xué)生分析解決問題的能力、獨(dú)立思維和團(tuán)結(jié)協(xié)作的能力，為以后的科研和工作打下良好的基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞 獸醫(yī)微生物學(xué)；實(shí)驗(yàn)；教學(xué)改革；
獸醫(yī)微生物學(xué)是動物醫(yī)學(xué)臨床獸醫(yī)學(xué)方向和動物防疫檢疫方向的主要專業(yè)基礎(chǔ)課之一，是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科。實(shí)驗(yàn)可以提高學(xué)生的動手操作能力，也可以加深學(xué)生對理論課的理解，加強(qiáng)學(xué)生理論聯(lián)系實(shí)際的能力。同時，它也為專業(yè)課動物傳染病、獸醫(yī)生物制品學(xué)、動物防疫檢疫學(xué)、獸醫(yī)寄生蟲病等學(xué)科打下基礎(chǔ)，從事畜牧獸醫(yī)相關(guān)專業(yè)必須具備獸醫(yī)微生物學(xué)相關(guān)的理論知識和實(shí)踐技能。在執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試中，獸醫(yī)微生物學(xué)所占比例最大，為35%。目前很多學(xué)校獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容多為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，雖然學(xué)生在實(shí)驗(yàn)課上可以掌握微生物學(xué)的常規(guī)基本操作技能，但是在實(shí)踐中遇到具體的問題時卻無從下手。比如：如何從發(fā)病動物體內(nèi)分離到病原菌并進(jìn)行鑒定？如何對畜牧業(yè)相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行微生物的檢測？對簡單的動物生物制品如何制備？為了使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)課上掌握的技能充分地應(yīng)用的生產(chǎn)實(shí)際中去，培養(yǎng)應(yīng)用型人才，進(jìn)行獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革是非常必要的。
1 做好實(shí)驗(yàn)前的充分準(zhǔn)備
在實(shí)驗(yàn)前充分做好準(zhǔn)備，能夠有效提高實(shí)驗(yàn)的效率。實(shí)驗(yàn)員及其他相關(guān)人員應(yīng)該對實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行定期的檢查及維護(hù)。實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)該貼出每種儀器的使用說明和簡單的操作規(guī)程及使用的注意事項(xiàng)，并要求學(xué)生在正式使用儀器之前先熟悉每種儀器的每個按鈕的功能，熟練掌握每種儀器使用的注意事項(xiàng)，正確操作。另外，實(shí)驗(yàn)員在每節(jié)實(shí)驗(yàn)課前都應(yīng)該認(rèn)真準(zhǔn)備該節(jié)課的實(shí)驗(yàn)用品及藥品，不要等學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時經(jīng)常找不到實(shí)驗(yàn)所需物品及藥品。此外，在學(xué)生正式上課之前，教師及實(shí)驗(yàn)教師應(yīng)該提前完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的預(yù)實(shí)驗(yàn)，從而檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)藥品是否可靠、實(shí)驗(yàn)儀器是否正常運(yùn)行，明確實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)中應(yīng)該注意的問題，在給學(xué)生講解時候能夠有的放矢，保證實(shí)驗(yàn)課的正常運(yùn)行。學(xué)生在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時能夠正確分析原因，找出實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的細(xì)節(jié)問題，發(fā)現(xiàn)問題并及時解決。
2 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和管理，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件
1）為了豐富和完整獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容，在教學(xué)中應(yīng)該運(yùn)用現(xiàn)代化的教學(xué)手段如多媒體和錄像等，學(xué)生可直觀地認(rèn)識各種儀器實(shí)物，并利用錄相和幻燈片的視頻播放給學(xué)生演示整個實(shí)驗(yàn)的基本操作過程，同時也能豐富學(xué)生的理論知識，使學(xué)生的知識體系更加完善，從而順利完成實(shí)驗(yàn)。如學(xué)生在制作完培養(yǎng)基的過程后需要及時滅菌，微生物實(shí)驗(yàn)室中一般都只有手提式和立式兩種高壓蒸汽滅菌器。而在實(shí)際工作過程中，很多單位應(yīng)用的是臥式高壓蒸汽滅菌器，這樣就可以通過多媒體和錄像給學(xué)生放映，讓學(xué)生對這樣的高壓蒸汽滅菌器有直觀的印象，豐富學(xué)生的知識面。
2）學(xué)院應(yīng)在原有實(shí)驗(yàn)設(shè)施基礎(chǔ)上，增加實(shí)驗(yàn)教學(xué)儀器的投入，如建立獨(dú)立的顯微鏡實(shí)驗(yàn)室，增加顯微鏡的數(shù)量，提高顯微鏡的質(zhì)量。增加PCR儀等分子生物學(xué)儀器、細(xì)菌自動化檢測分析儀、電泳儀、凝膠成像系統(tǒng)、蛋白層析及純化裝置等先進(jìn)的儀器和設(shè)備，以滿足快速發(fā)展的微生物分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方面的需要。
3）制定完善的學(xué)生實(shí)驗(yàn)室守則和實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)章制度， 實(shí)驗(yàn)室工作人員以身作則，認(rèn)真履行，給學(xué)生樹立良好的榜樣。重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)室清潔以及無菌操作技術(shù)在獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的重要作用，給學(xué)生制定上實(shí)驗(yàn)課的課堂紀(jì)律并和期末成績相結(jié)合，提高實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，規(guī)范學(xué)生的操作技能并培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的工作態(tài)度。
3 實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的改革
1）根據(jù)動物醫(yī)學(xué)培養(yǎng)方案，結(jié)合獸醫(yī)微生物學(xué)課程本身的特點(diǎn)，及該門課程在生產(chǎn)和科研中的重要性，對獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行合理的改革，主要是去掉一部分驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，增加綜合性、設(shè)計性實(shí)驗(yàn)。按照臨床上病原菌的檢驗(yàn)過程，開展設(shè)計性實(shí)驗(yàn)，讓學(xué)生自己設(shè)計實(shí)驗(yàn)思路，充分調(diào)動學(xué)生的主觀能動性，把實(shí)驗(yàn)室的基本操作和生產(chǎn)實(shí)際緊密結(jié)合起來，增加學(xué)生對本門實(shí)驗(yàn)課的興趣。讓學(xué)生充分認(rèn)識到獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)并不是孤立的，而是一個連續(xù)不斷的整體，每個驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)連續(xù)起來就可以解決生產(chǎn)實(shí)踐中的實(shí)際問題，為學(xué)生以后從事臨床生產(chǎn)實(shí)踐工作打下良好的基礎(chǔ)。
2）獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)內(nèi)容較多，但是受學(xué)時所限，課堂只能完成少部分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。尤其對于實(shí)驗(yàn)周期較長的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，不能在課堂上開展。針對上述矛盾，學(xué)?？梢赃M(jìn)行實(shí)驗(yàn)室開放，讓學(xué)生利用晚自習(xí)和假期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。這樣既可以培養(yǎng)學(xué)生參與科研的意識，也為學(xué)生提供了自由發(fā)揮的空間，學(xué)生可以將所學(xué)知識充分的發(fā)揮，同時也可以提高學(xué)生動手操作能力和實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力。有了學(xué)生的參與，減輕了承擔(dān)科研工作教師的負(fù)擔(dān)并培養(yǎng)了科研助手，使學(xué)生可以早日承擔(dān)科研工作，為以后的繼續(xù)學(xué)習(xí)和工作打下良好的基礎(chǔ)。
4 實(shí)驗(yàn)考核方式的改革
課程考核是檢驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量與教學(xué)效果的重要環(huán)節(jié)，是獲取教學(xué)反饋信息和評定學(xué)生成績的重要手段和方法。通過考核，可以使學(xué)生的知識轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€完整的知識體系，加深學(xué)生對課程內(nèi)容的理解和掌握。然而，現(xiàn)行的獸醫(yī)微生物學(xué)的課程考核仍普遍采用傳統(tǒng)的考核方式，這在很大程度上阻礙了學(xué)生個性的發(fā)揮以及創(chuàng)新能力和思維能力的培養(yǎng)。尤其是很多學(xué)校尚未進(jìn)行實(shí)驗(yàn)課程考核，這樣不利于學(xué)生對實(shí)踐技能的充分掌握。為此構(gòu)建新的考核體系尤其是增加實(shí)踐考核非常重要。
獸醫(yī)微生物學(xué)考試改革本著從課程的自身特點(diǎn)和培養(yǎng)應(yīng)用型、實(shí)踐型人才的實(shí)際需要出發(fā)，有利于提高課程的教學(xué)質(zhì)量，有利于促進(jìn)學(xué)生自主學(xué)習(xí)，有利于形成良好的學(xué)風(fēng)考風(fēng)，有利于培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力，有利于促進(jìn)全體學(xué)生全面發(fā)展和個性發(fā)展。
制定實(shí)踐考核的具體方法：分值100分，占期末總成績的10%，考核學(xué)生實(shí)驗(yàn)/實(shí)踐的出勤、實(shí)驗(yàn)操作技能、實(shí)驗(yàn)報告書寫、學(xué)生團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識。其中，學(xué)生實(shí)驗(yàn)課出勤，占實(shí)驗(yàn)總成績的10%；操作技能、學(xué)生團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識，占實(shí)驗(yàn)總成績的10%；實(shí)驗(yàn)報告書寫，占實(shí)驗(yàn)總成績的40%；在實(shí)驗(yàn)課結(jié)束后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)測試，占實(shí)驗(yàn)總成績的40%。
獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)通過做好實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和管理，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容改革和實(shí)驗(yàn)課考核方式改革等具體措施，一定能培養(yǎng)學(xué)生分析解決問題的能力、獨(dú)立思維和團(tuán)結(jié)協(xié)作的能力，為以后的科研和工作打下良好的基礎(chǔ)。
摘 要 為增強(qiáng)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果，河南護(hù)理職業(yè)學(xué)院從實(shí)驗(yàn)教學(xué)觀念、實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系和實(shí)驗(yàn)考核辦法等方面進(jìn)行一些改革探索。通過改革培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識，提高學(xué)生分析和解決問題的綜合能力，有效提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量。
關(guān)鍵詞 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)；教學(xué)方法
培養(yǎng)創(chuàng)新型人才是高等教育的重要任務(wù)，因此，不斷提高學(xué)生的實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力，已成為各高校實(shí)驗(yàn)教學(xué)環(huán)節(jié)的努力方向。河南護(hù)理職業(yè)學(xué)院醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)課教學(xué)中進(jìn)行了一些改革嘗試，以提高教學(xué)質(zhì)量。筆者在此談些粗淺體會。
1 改革實(shí)驗(yàn)教學(xué)觀念
1.1 引導(dǎo)學(xué)生主動預(yù)習(xí)，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)主動性
提前布置實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，要求學(xué)生主動預(yù)習(xí)并且書寫預(yù)習(xí)報告，使其對實(shí)驗(yàn)原理有一個清晰的認(rèn)識，并且明確實(shí)驗(yàn)操作程序。在實(shí)驗(yàn)課開始前，教師要針對本次實(shí)驗(yàn)的相關(guān)問題進(jìn)行提問，這樣一方面可以檢查學(xué)生的預(yù)習(xí)質(zhì)量作為期末考核的一項(xiàng)依據(jù)，另一方面可以進(jìn)一步強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)及其關(guān)鍵步驟。通過要求書寫預(yù)習(xí)報告的方式，不僅培養(yǎng)了學(xué)生良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，在很大程度上避免了學(xué)生稀里糊涂地動手實(shí)驗(yàn)以至于實(shí)驗(yàn)做完后還不知道自己為什么要這樣做的現(xiàn)象，而且也減少了實(shí)驗(yàn)失敗導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)材料消耗，大大提高了實(shí)驗(yàn)資源的利用率。
1.2 增加學(xué)生動手、動腦機(jī)會，引導(dǎo)學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新
傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)都是實(shí)驗(yàn)員提前準(zhǔn)備好所需材料，實(shí)驗(yàn)時也是教師演示——學(xué)生模仿的模式，學(xué)生只需被動地按規(guī)定的步驟機(jī)械操作。這種教學(xué)模式存在明顯弊端：學(xué)生缺乏主動思考，實(shí)驗(yàn)性質(zhì)偏重于驗(yàn)證理論，忽視思維能力的培養(yǎng)[1]。
為此，轉(zhuǎn)變教學(xué)觀念，盡量增加學(xué)生動腦、動手的機(jī)會。首先，讓學(xué)生以小組形式參與實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作，比如實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備等，這樣無形中更進(jìn)一步促使學(xué)生提前預(yù)習(xí)并主動思考與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題，培養(yǎng)了學(xué)生的實(shí)踐動手能力；其次，在開展實(shí)驗(yàn)時，也是首先組織小組討論，由學(xué)生小組自行設(shè)計實(shí)驗(yàn)方案，激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新思維和積極性，然后在教師的指導(dǎo)下完成實(shí)驗(yàn)。
比如，在進(jìn)行細(xì)菌的分布及外界因素對細(xì)菌的影響這一實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目時，通過讓學(xué)生自己準(zhǔn)備、自主設(shè)計的授課方式，學(xué)生不但掌握了實(shí)驗(yàn)操作時須注意的各種事項(xiàng)，培養(yǎng)了其發(fā)現(xiàn)問題和解決問題的能力，還進(jìn)一步加深了他們的無菌操作意識。此外，不少學(xué)生反應(yīng)以這種方式上實(shí)驗(yàn)課，更能激發(fā)他們的“創(chuàng)作激情”。
2 改革實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系
2.1 調(diào)整實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容，引入設(shè)計性實(shí)驗(yàn)和綜合性實(shí)驗(yàn)，提高學(xué)生綜合素質(zhì)
目前開設(shè)的實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容多為演示性和驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，不利于學(xué)生創(chuàng)新能力和實(shí)踐能力的培養(yǎng)。鑒于此，在完成基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技能訓(xùn)練的前提下，逐步引入設(shè)計性實(shí)驗(yàn)和綜合性實(shí)驗(yàn)，以提高學(xué)生的創(chuàng)新意識和分析、解決問題的綜合實(shí)驗(yàn)素質(zhì)。如增加尿液標(biāo)本、血液標(biāo)本、痰液標(biāo)本和膿液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查等實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，通過臨床模擬，要求學(xué)生從標(biāo)本采集、培養(yǎng)基配制、微生物分離培養(yǎng)，到對所分離到的微生物進(jìn)行形態(tài)特征、生理生化、血清學(xué)及毒力等方面的鑒定，均以小組為單位協(xié)作完成。這樣既使學(xué)生掌握了基本的實(shí)驗(yàn)操作技能，而且培養(yǎng)了他們的實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力，又由于與臨床工作聯(lián)系緊密，進(jìn)一步提高了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。調(diào)查結(jié)果顯示，學(xué)生普遍認(rèn)為開設(shè)設(shè)計性實(shí)驗(yàn)是非常必要的，他們認(rèn)為設(shè)計性實(shí)驗(yàn)雖然做起來困難大，但能極大地激發(fā)他們的求知欲，而且完成實(shí)驗(yàn)后有強(qiáng)烈的成就感，是科研工作的初步嘗試。
2.2 關(guān)注前沿、聯(lián)系臨床，更新實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
針對很多學(xué)生提出所學(xué)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容到臨床檢驗(yàn)?zāi)芊裼蒙弦约皩?shí)驗(yàn)室條件是否能緊跟科技發(fā)展的問題，注重更新實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，及時補(bǔ)充專業(yè)相關(guān)領(lǐng)域的新技術(shù)、新方法，并且定期組織學(xué)生到附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科進(jìn)行學(xué)習(xí)。由臨床檢驗(yàn)人員從標(biāo)本的采集分離到最后出結(jié)果，對各個步驟進(jìn)行詳細(xì)講解，這樣，學(xué)生不但熟悉了常用檢驗(yàn)儀器的使用方法，而且能學(xué)到很多新技術(shù)、新方法，極大地縮短了今后進(jìn)入臨床工作的適應(yīng)期。
3 改革實(shí)驗(yàn)教學(xué)方式
3.1 利用先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)手段，提高實(shí)驗(yàn)資源利用率
目前，運(yùn)用多媒體技術(shù)輔助教學(xué)的方法在理論課上已被廣泛采用，而實(shí)驗(yàn)課上的應(yīng)用卻甚少。針對這一現(xiàn)象，學(xué)校微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的教師將本門實(shí)驗(yàn)課程的基本操作方法等內(nèi)容制作成PPT或Flash課件，化復(fù)雜為簡明＼變抽象為具體，直觀、生動地展示給學(xué)生。這樣不但有利于學(xué)生理解，而且極大地彌補(bǔ)了由于學(xué)生層層包圍而難以看清教師示范細(xì)節(jié)等缺點(diǎn)，顯示出傳統(tǒng)教學(xué)無法比擬的優(yōu)點(diǎn)。
此外，增設(shè)1臺數(shù)碼顯微鏡，可對形態(tài)典型、染色效果較好的細(xì)菌涂片等標(biāo)本進(jìn)行數(shù)碼拍照并保存在電腦里。此后，利用計算機(jī)輸出系統(tǒng)將典型涂片投影到大屏幕上，直接進(jìn)行動態(tài)講解。這樣可以指導(dǎo)全體學(xué)生準(zhǔn)確觀察，極大地提高了實(shí)驗(yàn)資源的利用率和學(xué)生的實(shí)驗(yàn)觀察效率，并且更進(jìn)一步地促進(jìn)了學(xué)生實(shí)驗(yàn)觀察能力的提高。
3.2 改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室管理方式
實(shí)驗(yàn)教學(xué)方式采取集中教學(xué)和開放式教學(xué)相結(jié)合的方式。基礎(chǔ)型實(shí)驗(yàn)主要采取統(tǒng)一集中教學(xué)的方式，要求全體學(xué)生掌握基本實(shí)驗(yàn)技能。對于綜合性和研究創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)，則主要采取開放式教學(xué)，周一到周五實(shí)驗(yàn)室全時段開放，周六和周日可以預(yù)約開放，并由實(shí)驗(yàn)教師管理和指導(dǎo)。學(xué)生自行安排實(shí)驗(yàn)時間，自主設(shè)計實(shí)驗(yàn)方案，實(shí)驗(yàn)教師僅僅起輔助作用，負(fù)責(zé)提供實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)室安全管理工作。這樣的實(shí)驗(yàn)室管理方式不僅使全體學(xué)生掌握了必備的實(shí)驗(yàn)技能，而且分層次培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)新能力，有利于學(xué)生進(jìn)行初步的科研嘗試。
3.3 聽取學(xué)生意見，加強(qiáng)與學(xué)生的交流和溝通
堅(jiān)持以學(xué)生為中心，從培養(yǎng)學(xué)生綜合素質(zhì)出發(fā)，進(jìn)行醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)。日常教學(xué)中注重通過各種方式和學(xué)生溝通交流，聽取學(xué)生建議。并且專門設(shè)置實(shí)驗(yàn)開設(shè)項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)教學(xué)方式和實(shí)驗(yàn)室管理意見箱，建議每位學(xué)生交一份建議或意見的書面稿。雖然有些學(xué)生的建議由于各種條件限制，無法立即解決，但諸如實(shí)驗(yàn)的安排、學(xué)生輪流擔(dān)任一日實(shí)驗(yàn)管理老師等意見，則被欣然采納。本著以學(xué)生為中心的原則，以促進(jìn)學(xué)生綜合素質(zhì)發(fā)展和創(chuàng)新教育為目的，實(shí)驗(yàn)室的此項(xiàng)改革獲得良好的效果。
4 改革實(shí)驗(yàn)考核辦法
為了更加客觀、公正地反映學(xué)生的實(shí)驗(yàn)素養(yǎng)，摒棄以往期末考試之前僅通過一項(xiàng)操作考試來記分的方法，而是采用分項(xiàng)記分的考核方式[2]。
1）實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)成績（10%）：檢查預(yù)習(xí)報告，考核其對實(shí)驗(yàn)原理的理解和對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的熟悉情況。
2）實(shí)驗(yàn)操作成績（30%）：考核學(xué)生操作的規(guī)范程度。
3）實(shí)驗(yàn)報告成績（30%）：主要考核學(xué)生是否認(rèn)真記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，能否認(rèn)真分析實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的問題并發(fā)表自己的看法。
4）實(shí)驗(yàn)平時表現(xiàn)（10%）：主要通過觀察日常實(shí)驗(yàn)，考核學(xué)生是否養(yǎng)成了良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。
5）期末成績（20%）：不是考查對實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上操作步驟的記憶，而是通過要求學(xué)生自行設(shè)計并操作實(shí)驗(yàn)，綜合考查學(xué)生的實(shí)踐能力。
這種考核方式不但檢驗(yàn)了學(xué)生實(shí)驗(yàn)方法和技能的掌握情況，同時使學(xué)生獨(dú)立分析問題和解決問題的能力明顯增強(qiáng)。
以上是河南護(hù)理職業(yè)學(xué)院在醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革上做出的一些積極探索與嘗試，從學(xué)生反饋的意見來看，這些改革增強(qiáng)了他們的實(shí)驗(yàn)技能，激發(fā)了他們的學(xué)習(xí)主動性和創(chuàng)新意識。筆者希望這些粗淺體會對同行有借鑒價值。
摘 要 獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)是動物醫(yī)學(xué)專業(yè)的專業(yè)基礎(chǔ)課，在教學(xué)過程中適合應(yīng)用PBL教學(xué)模式。PBL教學(xué)模式的實(shí)施分為知識講授、學(xué)生分組、內(nèi)容的選擇和問題的設(shè)計、問題解決、課堂發(fā)言，教師總結(jié)、問題解決后的反思幾個環(huán)節(jié)。采用PBL教學(xué)模式，能夠調(diào)動學(xué)生的主觀能動性，培養(yǎng)學(xué)生語言表達(dá)能力、協(xié)調(diào)能力和分析解決問題的能力。
關(guān)鍵詞 獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)；PBL；教學(xué)模式
獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)是動物醫(yī)學(xué)專業(yè)的一門必修的專業(yè)基礎(chǔ)課程，在動物醫(yī)學(xué)教育中占有非常重要的地位。但是由于一直以來，各個學(xué)校都采用傳統(tǒng)的教學(xué)模式，授課教師一般都是單純地依靠教材來講解獸醫(yī)微生物學(xué)有關(guān)知識。由于獸醫(yī)微生物學(xué)理論知識比較繁雜，各種微生物的生物學(xué)特性又存在其相似性，某些知識理論和邏輯性強(qiáng)，抽象難懂，學(xué)生感到難記憶并且容易記憶混亂，有些內(nèi)容又會覺得枯燥乏味，這些都會直接影響到教學(xué)質(zhì)量和學(xué)習(xí)效果。而獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)作為動物醫(yī)學(xué)專業(yè)的一門主要專業(yè)基礎(chǔ)課，是專業(yè)課如獸醫(yī)傳染病、獸醫(yī)生物制品學(xué)、獸醫(yī)寄生蟲等的基礎(chǔ)。為了使學(xué)生更好地掌握獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)相關(guān)知識，采用合適的教學(xué)方法非常重要。PBL（Problem Basic Learning）教學(xué)模式非常適用于獸醫(yī)微生物學(xué)的教學(xué)。
1 PBL教學(xué)模式
PBL教學(xué)模式是基于問題式學(xué)習(xí)，與傳統(tǒng)的教學(xué)模式有很大的區(qū)別。這種模式主要以問題為導(dǎo)向，學(xué)生為這種教學(xué)模式下的主體，主要以討論的形式完成教學(xué)，更具有系統(tǒng)性、綜合性和靈活性。PBL教學(xué)模式是醫(yī)學(xué)院校近年來廣泛采用的一種教學(xué)方法，最初誕生于美國20世紀(jì)60年代。在20世紀(jì)末期，中國大陸地區(qū)也開始采用這樣教學(xué)模式。據(jù)統(tǒng)計，全球大約有1700所院校已經(jīng)開始采用PBL教學(xué)模式，而且還有更多的院校正在積極探索在課程中采用這種教學(xué)模式。
PBL教學(xué)模式具有自主性、探究性、開放性、系統(tǒng)性、全員性、交互性等特點(diǎn)。實(shí)踐證明，與傳統(tǒng)教學(xué)相比，PBL教學(xué)模式具有如下優(yōu)點(diǎn)：能夠調(diào)動學(xué)生的主觀能動性，自我學(xué)習(xí)知識；能夠提高學(xué)生的語言表達(dá)能力，培養(yǎng)學(xué)生處理各種人際關(guān)系的能力及協(xié)調(diào)能力；能夠培養(yǎng)學(xué)生綜合分析問題和解決問題的能力以及團(tuán)結(jié)協(xié)作的能力；能夠使學(xué)生積極主動參與到教學(xué)中來，調(diào)動學(xué)生的積極性，活躍課堂氣氛。
2 PBL 教學(xué)模式的應(yīng)用與實(shí)施
根據(jù)獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)課程自身的特點(diǎn)，結(jié)合動物醫(yī)學(xué)專業(yè)的發(fā)展?fàn)顩r，PBL教學(xué)方法在獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)課程上的應(yīng)用大致可以分為幾個環(huán)節(jié)，這些環(huán)節(jié)自成體系。
2.1 知識的講授
在學(xué)生進(jìn)行分組討論之前，先介紹解決問題的有關(guān)知識點(diǎn)，尤其對于本學(xué)科發(fā)展前沿的問題，需要新觀點(diǎn)、新理論同時結(jié)合傳統(tǒng)的知識體系才能解決實(shí)際問題，進(jìn)而培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力和綜合分析解決問題的能力。
2.2 學(xué)生分組
將全班學(xué)生以5～7人分成若干小組進(jìn)行討論，每組安排一名組長，學(xué)生各抒己見，然后把該組的答案統(tǒng)一到組長，由組長把該組的答案對教師進(jìn)行匯報，營造一個輕松、和諧的討論氛圍。
2.3 內(nèi)容的選擇和問題的設(shè)計
成功源于良好的開端。課堂上好的導(dǎo)入方法，能夠集中學(xué)生的注意力，激發(fā)學(xué)生的好奇心和興趣，使學(xué)生主動參與到課堂中來。因此，教師在講授新課的過程中，首先要設(shè)置一個與本節(jié)課內(nèi)容相關(guān)的問題，讓學(xué)生思考。問題可以留在上一節(jié)課結(jié)束的時候，讓學(xué)生下課在一起討論，查閱相關(guān)資料，找到與問題相關(guān)的答案。這樣既調(diào)動了學(xué)生主動學(xué)習(xí)的興趣，又對新課的內(nèi)容起到預(yù)習(xí)的作用，教師講解起來讓學(xué)生更容易理解。也可以在上課剛開始的時候，設(shè)置一個與本節(jié)課內(nèi)容相關(guān)的問題，集中學(xué)生的注意力，一起思考討論，活躍課堂氣氛。但是問題的設(shè)置一方面要考慮到與所講內(nèi)容的相關(guān)性，另一方面要注意問題的難易程度。問題的設(shè)置不能太難，太難了學(xué)生找了很多相關(guān)資料都找不到答案，就會有挫敗感；問題設(shè)置太簡單，學(xué)生很容易找到答案，也會失去興趣。
例如，在講述免疫細(xì)胞這節(jié)課的內(nèi)容時，可以設(shè)置這樣一個問題：老年動物和青年動物哪個更容易患癌癥？為什么？動物體的免疫系統(tǒng)是如何對抗癌細(xì)胞的？因?yàn)閷W(xué)生已經(jīng)初步有了免疫學(xué)知識做基礎(chǔ)，很容易回答老年動物比青年動物容易患癌癥，主要是老年動物的免疫器官功能已經(jīng)退化，不能及時行使免疫監(jiān)視功能消滅癌細(xì)胞，所以老年動物比青年動物容易患癌癥。那么，青年動物的免疫系統(tǒng)又是如何應(yīng)對癌細(xì)胞的呢？其中一部分答案就在本節(jié)課所要講述的內(nèi)容當(dāng)中——部分免疫細(xì)胞發(fā)揮的功能，最終將癌細(xì)胞殺滅。在正式開始講述前，教師可以用一個圖片或者動畫的形式闡述機(jī)體內(nèi)的幾種主要免疫細(xì)胞是如何完成對癌細(xì)胞的殺滅過程的，如NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞可以通過ADCC作用殺滅癌細(xì)胞，T細(xì)胞可以通過釋放穿孔素直接殺滅癌細(xì)胞，等等，引起學(xué)生對本節(jié)課的興趣。教師也能引導(dǎo)學(xué)生從免疫學(xué)角度多方面分析機(jī)體對抗癌細(xì)胞的主要機(jī)制，從而挖掘?qū)W生的潛能和創(chuàng)新能力。
2.4 問題解決
學(xué)生在對教師提出的問題進(jìn)行討論的時候，可以多種方式進(jìn)行討論，提出多種可供選擇的方案。在PBL教學(xué)模式中，學(xué)生要討論的是如何獲得資源以及如何利用所獲得的資源解決問題。這種模式有利于培養(yǎng)自我學(xué)習(xí)意識以及調(diào)動主觀能動性，同時也有利于培養(yǎng)適應(yīng)社會環(huán)境的能力。
2.5 課堂發(fā)言，教師總結(jié)
課堂發(fā)言階段是對學(xué)生PBL教學(xué)模式效果檢驗(yàn)的一個重要環(huán)節(jié)，學(xué)生可以利用這個環(huán)節(jié)充分展示自我。通常學(xué)生在課前進(jìn)行充分討論之后，都會形成清晰的思路和觀點(diǎn)。每個討論小組選擇一種能夠最佳解決問題的方案進(jìn)行匯報。每個小組由組長發(fā)言，代表小組來闡述本小組的觀點(diǎn)和見解，小組的其他成員也可以進(jìn)行適當(dāng)補(bǔ)充。發(fā)言可以采取口頭表達(dá)、辨析、板書、幻燈片等不同形式來進(jìn)行。由于不同小組所獲得信息來源不同，所以對于同樣一個問題，也會有不同的見解，也可能是每個小組看問題的角度不同而產(chǎn)生的不同答案。這種匯報形式可以鍛煉學(xué)生的表達(dá)能力、現(xiàn)場應(yīng)變能力和總結(jié)能力。教師在聽取了不同小組的匯報后，對問題進(jìn)行歸納總結(jié)。這種集思廣益的形式同時也能彌補(bǔ)教師的某些思考缺失。因此，PBL教學(xué)模式無疑對教師提出更高的要求，要求教師在專業(yè)知識與技能的掌握上既要有深度，又要有廣度。要不斷探索本專業(yè)領(lǐng)域的前沿知識，提高駕馭課堂的能力，解決不同的學(xué)生對問題理解的偏頗，對其進(jìn)行正確的引導(dǎo)和啟迪。
2.6 問題解決后的反思
在學(xué)生進(jìn)行匯報和教師及時總結(jié)后，學(xué)生應(yīng)該對上述問題做出反思。這對學(xué)生的創(chuàng)造性思維和自我反思能力都是一種很好的鍛煉。
在近期的食品安全監(jiān)管工作中，北京市食品安全監(jiān)管部門抽檢出5種不合格食品，并在流通領(lǐng)域采取停止銷售措施。目前正值春夏交替之季，氣溫在逐步升高，各類病原微生物生長繁殖加快，政府衛(wèi)生部門因此對食品的微生物檢測高度重視。
中國食品受食源性致病菌污染已經(jīng)十分嚴(yán)重，生物性危害往往通過食源性致病菌對人體造成傷害甚至導(dǎo)致死亡。近年來隨著食品微生物事件頻繁爆發(fā)，這問題已經(jīng)引起政府和消費(fèi)者的高度重視。食品企業(yè)一旦出現(xiàn)微生物污染事件，會嚴(yán)重影響食品企業(yè)的形象和行業(yè)地位，甚至導(dǎo)致企業(yè)信譽(yù)的全面破產(chǎn)，因此微生物檢測技術(shù)理應(yīng)受到企業(yè)的高度重視。
本刊記者特別采訪了諾安檢測寧波實(shí)驗(yàn)室經(jīng)理毛潔紅女士，探討食品微生物檢測技術(shù)的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢。
記者：日常生活中致病微生物主要來源有哪些？總體上看，來自微生物的食品安全事件呈現(xiàn)出怎樣的特點(diǎn)？
毛潔紅：消費(fèi)者最可能遇到的致病性微生物主要來源于生食的蔬菜、鮮榨果汁、冷盤、熟菜、生食或未煮透的海鮮，以及冰箱里儲存過久的乳、肉、糕點(diǎn)等食品。
一直以來，食源性疾病中由微生物導(dǎo)致的比例占80%。每年歐美地區(qū)爆發(fā)上千萬由微生物引發(fā)的食源性疾病事件，所占人口比例高達(dá)30%。在中國，據(jù)中國疾控中心的數(shù)據(jù)顯示，每年有幾萬起的食源性疾病事件。近年來由于中國環(huán)境污染，濫施農(nóng)藥、激素、抗生素等化學(xué)物質(zhì)，導(dǎo)致食源性疾病事件數(shù)量急劇上升，使得由微生物引發(fā)的食源性疾病的比例有所下降，但依然保持在50%以上。
記者：在食品工業(yè)中如何控制微生物的含量？目前有哪些技術(shù)手段？
毛潔紅：在食品工業(yè)中控制微生物最常用的手段是采用高溫處理，比如餅干糕點(diǎn)的高溫烘焙、飲料的超高溫瞬時滅菌、巴氏滅菌、罐頭食品的高壓高溫滅菌等等。餐飲店和家庭制作食品大都也離不開蒸煮、煎炒的熱處理過程。
其他方法包括采用高鹽高糖腌制，降低食品中的水活度，比如蜜餞制品：烘干晾曬去除食品中的水分，比如干菜，魚干制品等等。這些是人類使用歷史最悠久，最安全的控制食品中微生物含量的方法。
隨著科技的發(fā)展，現(xiàn)在有許多新的滅菌工藝產(chǎn)生。比如輻照，利用放射性α、γ射線對食品進(jìn)行照射處理后能立即殺滅食品中的微生物和病毒，殺菌效果非常好。但其安全性仍然有待考量。其他包括超高壓滅菌、臭氧消毒、添加安全的化學(xué)防腐劑等方法來控制食品中微生物數(shù)量處于個安全的限度水平。
記者：食品中微生物檢測有何意義？衛(wèi)生部修訂的新標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容有何變化，存在什么問題？
毛潔紅：通過對食品中微生物進(jìn)行檢測，可以非常準(zhǔn)確地告知公眾食品的衛(wèi)生安全狀況，給生產(chǎn)企業(yè)以明確的指導(dǎo)，規(guī)范企業(yè)生產(chǎn)出衛(wèi)生合格的產(chǎn)品，確保消費(fèi)者的健康。
日前衛(wèi)生部對食品微生物的一些檢測方法和一些產(chǎn)品的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)都進(jìn)行了修訂。從檢測方法的修訂看，擴(kuò)充了更多的檢測方法，同時一些快速檢測方法的采納，使得更多的檢測項(xiàng)目和方法與國際ISO標(biāo)準(zhǔn)更為接近。一些產(chǎn)品的微生物標(biāo)準(zhǔn)也進(jìn)行了調(diào)整，比如目前爭議很大的生奶菌落總數(shù)從之前的50萬改為現(xiàn)在的200萬：冷凍食品中金黃色葡萄球菌從之前的不得檢出改為可以允許10個。這些調(diào)整我個人認(rèn)為都是合理的，更加符合實(shí)際生產(chǎn)情況。
目前我國食品微生物標(biāo)準(zhǔn)以及其他一些產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)制定存在的問題是過細(xì)，有一些微生物標(biāo)準(zhǔn)過于嚴(yán)格，甚至超過歐美國家，幾乎每種產(chǎn)品都有一套微生物指標(biāo)。這樣就會造成目前有些微生物指標(biāo)與實(shí)際生產(chǎn)情況不相符，過分脫離實(shí)際：有些產(chǎn)品微生物指標(biāo)相互矛盾，比如最近爭議的飲用水指標(biāo)；檢測方法更新了但衛(wèi)生微生物指標(biāo)未更新，使得新檢測方法無法執(zhí)行等狀況出現(xiàn)。
建議可以參照歐洲國家只對大類產(chǎn)品制定微生物限度的管理辦法，進(jìn)行宏觀管理，可以達(dá)到事半功倍的效果。食品中的微生物指標(biāo)畢竟不像化學(xué)指標(biāo)那樣精確。
記者：食品中微生物檢測的主要方法有哪些？呈現(xiàn)出怎樣的發(fā)展趨勢？
毛潔紅：檢測方法分為傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)方法和快速的檢測方法。傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法結(jié)果準(zhǔn)確，但耗時比較長：快速的方法結(jié)果存在一定的假陽性率，但速度快。所以推薦企業(yè)可以更多地對其原料和生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)采用快速檢測方法，從時間上滿足企業(yè)生產(chǎn)的需要。
作為第三方檢測機(jī)構(gòu)和政府監(jiān)管部門，本著對企業(yè)和消費(fèi)者負(fù)責(zé)的態(tài)度，特別是對企業(yè)送檢的最終產(chǎn)品我們都采用傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法，給客戶最準(zhǔn)確的結(jié)果。除非客戶因?yàn)闀r間需要，同意采用快速檢測的方法。目前我實(shí)驗(yàn)室采用的快速檢測方法是利用DNA擴(kuò)增的手段對致病菌的特征基因片段進(jìn)行檢測，能夠在約4個小時之內(nèi)找到食品中的致病菌。
近年來由于食品安全事件的頻發(fā)，要求檢測企業(yè)能夠快速而準(zhǔn)確的給出結(jié)果。所以，發(fā)展趨勢是快速方法與傳統(tǒng)方法并進(jìn)的原則。快速檢測方法作為種初篩手段是非常有效的。
記者：在食品的生產(chǎn)與流通領(lǐng)域中，微生物檢測技術(shù)有何具體應(yīng)用和整體解決方案？
毛潔紅：食品生產(chǎn)企業(yè)要確保生產(chǎn)出品質(zhì)優(yōu)良，衛(wèi)生可口的食品，僅僅靠最終的殺菌工藝來控制食品中的微生物是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，需要全面的控制方案，就好比我們自己家庭的廚房，要烹制出鍋美味安全的食物，僅僅靠有位好廚師還是不夠的。巧婦難為無米之炊，首先需要有新鮮的食材原料和配料，其次需要對原料進(jìn)行恰當(dāng)?shù)那逑磁c處理，有設(shè)施齊全的炊具容器和衛(wèi)生的環(huán)境條件，配上優(yōu)秀的廚師，這樣才能烹制出美味安全衛(wèi)生的食物。同樣，一家食品企業(yè)生產(chǎn)的過程也與我們家庭廚房烹制食物的流程相類似，只是其場地規(guī)模，人員數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)比家庭廚房大得多。作為一家正規(guī)的生產(chǎn)企業(yè)，都會制定套完整的從基地一原料生產(chǎn)-包裝-運(yùn)輸-儲存-銷售的食品鏈，包括設(shè)備、人員、環(huán)境的衛(wèi)生及其質(zhì)量控制，我們諾安檢測服務(wù)的內(nèi)容和目標(biāo)就是在整個生產(chǎn)食品鏈中幫助我們的食品生產(chǎn)企業(yè)把控質(zhì)量。從微生物方面看，我們目前的服務(wù)項(xiàng)目包括以下幾項(xiàng)，這些服務(wù)項(xiàng)目也貫穿于整個食品生產(chǎn)鏈。
（1）原料檢查：收集建立原料初始狀態(tài)的微生物狀況：
（2）生產(chǎn)中滅菌工藝驗(yàn)證，幫助企業(yè)選擇最佳滅菌工藝：
（3）生產(chǎn)車間、人員、設(shè)備、倉庫環(huán)境微生物控制：
（4）產(chǎn)品檢查，控制：
（5）產(chǎn)品保質(zhì)期驗(yàn)證：
（6）模擬運(yùn)輸，銷售過程中微生物的變化，進(jìn)行產(chǎn)品風(fēng)險評估。
摘 要： 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是生物工程、生物技術(shù)和制藥工程等專業(yè)的專業(yè)基礎(chǔ)課程。作者針對微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的特點(diǎn)并結(jié)合三本院校學(xué)生學(xué)習(xí)特點(diǎn)，通過對微生物學(xué)教學(xué)手段、教學(xué)模式等的思考，闡述在微生物學(xué)課程教學(xué)實(shí)踐中的體會。
關(guān)鍵詞： 三本院校 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 多媒體教學(xué) 設(shè)計性實(shí)驗(yàn)
“微生物學(xué)”是生命科學(xué)的重要組成部分，是高等院校生命科學(xué)類各專業(yè)的一門重要專業(yè)基礎(chǔ)課。生物科學(xué)、生物技術(shù)、制藥工程專業(yè)要用到微生物學(xué)，生物工程專業(yè)更離不開微生物學(xué)[1]。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是與微生物學(xué)理論教學(xué)相配套的實(shí)驗(yàn)教學(xué)，是一門實(shí)踐性和應(yīng)用性很強(qiáng)的學(xué)科。開展微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的，是訓(xùn)練學(xué)生掌握微生物學(xué)最基本的操作技能，加深理解微生物學(xué)理論知識，使學(xué)生能夠?qū)⒗碚撝R轉(zhuǎn)化為實(shí)踐，培養(yǎng)學(xué)生觀察、思考、分析和解決問題的能力[2]。下面我結(jié)合近幾年微生物學(xué)理論和實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)踐，談?wù)剬ξ⑸飳W(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的思考。
一、適當(dāng)增加實(shí)驗(yàn)教學(xué)學(xué)時
微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是與微生物學(xué)理論相配套的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課。長期以來一直被認(rèn)為是附屬于理論課，實(shí)驗(yàn)課學(xué)時不多。一般的院校，微生物學(xué)理論教學(xué)大多在54～72學(xué)時，而實(shí)驗(yàn)教學(xué)則多數(shù)在28～36學(xué)時。這種課程設(shè)置暴露出在教學(xué)中存在的一些普遍問題，如學(xué)生對實(shí)驗(yàn)課重要性認(rèn)識不足，動手能力差，綜合素質(zhì)較低。而對于三本院校的學(xué)生，這方面的問題更普遍也更嚴(yán)重。相對于重點(diǎn)高校，三本院校學(xué)生的基礎(chǔ)較差，學(xué)習(xí)積極性和主動性不高，而微生物學(xué)理論教學(xué)中涉及的內(nèi)容較多。以趙斌等主編的《微生物學(xué)》為例，除緒論外全書有十章內(nèi)容，分別為有原核微生物、真核微生物和病毒等[1]。盡管在理論教學(xué)中結(jié)合學(xué)生特點(diǎn)刪減了部分章節(jié)的講授，如侵染與免疫，但學(xué)生普遍反映課程知識點(diǎn)太多、不好記。相比而言，學(xué)生對實(shí)驗(yàn)課的興趣較濃，對實(shí)驗(yàn)課講授的知識掌握得較好。但是微生物學(xué)要求學(xué)生掌握的技術(shù)較多，有顯微鏡技術(shù)、滅菌技術(shù)、分離純化技術(shù)等，有限的學(xué)時導(dǎo)致針對每一項(xiàng)具體的基本技能最多只能開設(shè)一次實(shí)驗(yàn)，甚至把幾項(xiàng)技能綜合于一次實(shí)驗(yàn)中。老師在具體示范后學(xué)生當(dāng)場基本都能掌握實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)。但當(dāng)再次涉及相關(guān)操作時，學(xué)生就會犯很多錯誤。如，無菌操作存在于多個實(shí)驗(yàn)中，筆者在教學(xué)過程中發(fā)現(xiàn)在第一次教學(xué)生革蘭氏染色的無菌操作要求后，多數(shù)學(xué)生在芽孢染色中仍然需要老師先做具體示范才能規(guī)范操作。學(xué)生普遍反映革蘭氏染色當(dāng)中涉及的操作較多，有灼燒接種環(huán)、無菌取樣、固定、染色等，針對這樣的問題，可以先開設(shè)無菌操作技術(shù)或單染色法。學(xué)生接受能力有限及學(xué)生學(xué)習(xí)基礎(chǔ)較差等特點(diǎn)提示有必要對微生物實(shí)驗(yàn)課給予重新認(rèn)識，提高微生物實(shí)驗(yàn)課的地位，并對該課程及其教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行重新設(shè)置，改變微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的從屬地位。
二、合理運(yùn)用多媒體教學(xué)
傳統(tǒng)的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)手段通常是板書加上老師的講解，老師講授吃力，且僅通過語言表述，學(xué)生學(xué)習(xí)興趣不大，很容易造成注意力不集中，同時老師需要在板書上花費(fèi)大量的時間，導(dǎo)致能夠講授的知識有限且學(xué)生實(shí)踐的時間較少，最終導(dǎo)致教學(xué)效果不易。與傳統(tǒng)教學(xué)相比，多媒體技術(shù)借助圖片、動畫和錄像等傳遞信息，使得講授的知識具體形象，將一些通過傳統(tǒng)教學(xué)手段很難表達(dá)的教學(xué)內(nèi)容生動地展現(xiàn)給了學(xué)生。同時由于老師提前制作教學(xué)課件，將大量知識信息集中整理，突出重點(diǎn)，傳遞信息量較大，便于學(xué)生掌握及理解，解決了教學(xué)內(nèi)容多而學(xué)時相對較少的困難[3]。具體來看，如講吲哚實(shí)驗(yàn)時，學(xué)生對于實(shí)驗(yàn)原理不易理解，而在這時候通過多媒體給學(xué)生展示吲哚實(shí)驗(yàn)陽性的照片，學(xué)生對玫瑰吲哚有了直觀形象的認(rèn)識，還可以通過圖片引出諸如“玫瑰吲哚為什么會集中在試管的頂部？”這樣的問題，引導(dǎo)學(xué)生課后預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)后續(xù)的操作。再比如在血球計數(shù)板構(gòu)造的講解時，老師可以將計數(shù)室先找到，通過連接在顯微鏡上的攝像頭轉(zhuǎn)到投影屏幕上給學(xué)生看。這樣更易于學(xué)生理解，且更容易在計數(shù)時找到相應(yīng)區(qū)域，既強(qiáng)化教學(xué)效果，又節(jié)約老師指導(dǎo)學(xué)生的時間。
三、嘗試開展設(shè)計性實(shí)驗(yàn)
傳統(tǒng)開展的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是以教師為主導(dǎo)，以基礎(chǔ)性和驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)為主的教學(xué)模式。學(xué)生只是跟著老師的指導(dǎo)和板書完成實(shí)驗(yàn)，沒有參與到實(shí)驗(yàn)的設(shè)計中。特別是對于部分三本院校的學(xué)生，實(shí)驗(yàn)課只是簡單地按照老師的步驟要求做，對實(shí)驗(yàn)原理和實(shí)驗(yàn)步驟沒有進(jìn)行過多的思考，導(dǎo)致學(xué)生的創(chuàng)造性思維得不到培養(yǎng)，學(xué)生解決問題的能力得不到有效提高。而通過設(shè)計性實(shí)驗(yàn)，學(xué)生成了學(xué)習(xí)的主體，教師只是從旁指導(dǎo)，這種學(xué)習(xí)過程有利于培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考、發(fā)現(xiàn)問題的能力和創(chuàng)新思維[4]。因?yàn)槭艿綄?shí)驗(yàn)室條件、課程學(xué)時和學(xué)生人數(shù)等的影響，我們僅在個別學(xué)期針對部分專業(yè)開展過綜合性實(shí)驗(yàn)，如土壤中真菌的分離、純化、鑒定，雖然該實(shí)驗(yàn)的設(shè)計性不是很強(qiáng)，但學(xué)生普遍反映通過該實(shí)驗(yàn)的操作既加深了對理論課堂中關(guān)于微生物的形態(tài)、微生物的營養(yǎng)、微生物生長及生態(tài)中相關(guān)的知識的理解，又鞏固了多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)技能，他們普遍希望能多開展這類實(shí)驗(yàn)。為此，今后可以嘗試更多地開展綜合性和設(shè)計性實(shí)驗(yàn)，如以分離產(chǎn)淀粉酶的枯草芽孢桿菌為例，讓學(xué)生分組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計，并在課堂上以討論的方式選出一個最佳方案。讓學(xué)生自己準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)試劑及器材，實(shí)驗(yàn)完成后可對實(shí)驗(yàn)過程中及實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析討論。這樣，既能夠更好地激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，又能使他們在查閱資料、設(shè)計方案的過程中對以往知識進(jìn)行復(fù)習(xí)和鞏固，也培養(yǎng)了學(xué)生的團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識，鍛煉了學(xué)生各方面的能力。
總的來說，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的專業(yè)基礎(chǔ)課程。該課程既是對微生物學(xué)理論知識的驗(yàn)證和鞏固，更是獲得新理論、新知識的有效手段。因此，在實(shí)際實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作中，在教學(xué)單位提供現(xiàn)代化教學(xué)儀器的設(shè)備的同時，合理的教學(xué)大綱的制定，以及指導(dǎo)教師自身綜合素質(zhì)的提高對于優(yōu)化微生物學(xué)教學(xué)效果都至關(guān)重要。
摘要：為了示范推廣有機(jī)肥快速發(fā)酵技術(shù)，進(jìn)行了微生物菌劑對有機(jī)肥的發(fā)酵作用試驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)2個處理，5次重復(fù)，隨機(jī)排列。結(jié)果表明，應(yīng)用微生物菌劑可縮短堆肥發(fā)酵時間，提高有機(jī)肥養(yǎng)分含量。
關(guān)鍵詞：微生物菌劑；有機(jī)肥；效果；發(fā)酵
微生物菌劑是指一類含有活性微生物的特定制品。微生物菌劑不像一般的肥料那樣直接為植物提供養(yǎng)料物質(zhì)，而是以微生物生命活動的過程和產(chǎn)物來改善作物營養(yǎng)條件，發(fā)揮土壤潛在肥力，刺激作物生長發(fā)育，抵抗病菌危害，從而提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)。有機(jī)肥料富含有機(jī)物質(zhì)和作物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)，不僅能提供作物生長所需養(yǎng)分，改良土壤，還可以改善作物品質(zhì)，提高作物產(chǎn)量，促進(jìn)作物高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)，保持土壤肥力，同時可提高肥料利用率，降低生產(chǎn)成本。充分合理利用有機(jī)肥料能增加作物產(chǎn)量、培肥地力、改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)、提高土壤養(yǎng)分的有效性。有機(jī)肥施用前必須經(jīng)過充分的發(fā)酵腐熟，微生物菌劑能快速分解有機(jī)質(zhì)，具有添加量少、強(qiáng)力降解蛋白質(zhì)、發(fā)酵時間短、成本低、發(fā)酵溫度不受限等優(yōu)點(diǎn)，能有效殺死發(fā)酵物中的有害病菌、蟲卵、草籽，并降解抗生素殘留等。為此，筆者研究了微生物菌劑在雞糞發(fā)酵過程中的使用方法，并驗(yàn)證其施用效果，為示范推廣農(nóng)家有機(jī)肥快速發(fā)酵技術(shù)提供參考。
1 材料和方法
1.1 試驗(yàn)材料
液體酵素菌含有有效活菌數(shù)2.0億cfu/g，由承德磐豐酵素菌有限公司提供。
雞糞來自于當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖戶。
試驗(yàn)于2009年7月在河北省承德市平泉縣土肥站試驗(yàn)田進(jìn)行。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計
試驗(yàn)設(shè)2個處理，5次重復(fù)。處理1為雞糞常規(guī)發(fā)酵，處理2為雞糞+液體酵素菌發(fā)酵。
1.2.2 堆肥處理方法
將10 m3的雞糞平均分成10份，其中5份用作常規(guī)發(fā)酵，5份加入液體酵素菌后發(fā)酵。
將雞糞在水泥地上均勻鋪開，取液體酵素菌100 kg，用自來水稀釋100倍，放置24 h后攪拌均勻，然后均勻噴灑在雞糞上，用鐵鍬攪拌，按由少到多的原則，即先將菌種稀釋液倒入少量發(fā)酵原料中攪拌均勻，直到?jīng)]有團(tuán)塊，然后再將攪拌好的少量發(fā)酵原料倒入剩余發(fā)酵原料中攪拌均勻，直到?jīng)]有團(tuán)塊。將混合后的發(fā)酵原料裝入水泥發(fā)酵池中，裝滿壓實(shí)，排去空氣后用塑料薄膜密封，發(fā)酵溫度保持25～35 ℃。發(fā)酵到?jīng)]有臭味而含有酒精味時，停止發(fā)酵，記錄時間。
1.2.3 堆肥檢測方法
將處理1（常規(guī)發(fā)酵）和處理2（酵素菌發(fā)酵）的雞糞分別粉碎后過0.5 mm篩，取約0.5 kg，放入樣品袋貼好標(biāo)簽，以備化驗(yàn)。按照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY 525-2012《有機(jī)肥料》化驗(yàn)雞糞中的有機(jī)質(zhì)、全氮、有效磷、速效鉀等養(yǎng)分含量。
2 結(jié)果與分析
2.1 發(fā)酵時間比較
試驗(yàn)結(jié)果表明，利用液體酵素菌發(fā)酵處理的發(fā)酵過程明顯縮短。常規(guī)堆肥發(fā)酵需要7 d時間，而使用微生物菌劑酵素菌發(fā)酵只需要5 d。
2.2 有機(jī)肥營養(yǎng)成分比較
利用液體酵素菌處理的雞糞養(yǎng)分含量顯著增加，養(yǎng)分化驗(yàn)結(jié)果見表1。結(jié)果表明：酵素菌發(fā)酵雞糞中的有機(jī)質(zhì)平均含量為394.56 g/kg，比常規(guī)發(fā)酵減少了44.39 g/kg，降幅為10.11%。雞糞中的有機(jī)質(zhì)含量顯著降低，說明發(fā)酵過程中消耗了有機(jī)質(zhì)，原因是酵素菌為化能異養(yǎng)菌，在發(fā)酵過程中發(fā)酵菌將消耗的有機(jī)質(zhì)轉(zhuǎn)化成了自身能量。酵素菌處理的雞糞全氮含量為12.89 g/kg，較常規(guī)發(fā)酵的雞糞（全氮含量為11.15 g/kg）增加15.61%，說明添加發(fā)酵菌后，在微生物菌劑的作用下，將雞糞中的大分子難溶態(tài)氮轉(zhuǎn)化成小分子態(tài)氮，從而提高了氮素含量。酵素菌處理的雞糞有效磷平均含量為258.77 mg/kg，比常規(guī)處理（218.10 mg/kg）增加18.65%，說明使用酵素菌處理使雞糞中磷素解離出來，有效磷的含量進(jìn)一步提高。酵素菌處理的雞糞速效鉀平均含量增加明顯，較常規(guī)處理增加38.25%。說明雞糞經(jīng)酵素菌發(fā)酵后，通過各種酶的作用將雞糞中含有鉀離子的粗纖維轉(zhuǎn)化成速效鉀，促使鉀含量顯著增加。
另外，利用液體酵素菌發(fā)酵還可有效去除臭味。在應(yīng)用酵素菌對雞糞發(fā)酵過程中，有效去除雞糞發(fā)酵過程中的惡臭氣體，減少了環(huán)境污染。
3 結(jié)論
使用微生物菌劑酵素菌對雞糞進(jìn)行發(fā)酵處理，既達(dá)到了高溫堆肥的目的，又縮短了堆肥腐熟時間，加快了雞糞的無害化處理過程，消滅了病原微生物，并且能夠提高雞糞的主要養(yǎng)分含量，全氮平均含量較常規(guī)對照增加15.61%，有效磷增加18.65%，速效鉀增加38.25%。酵素菌在發(fā)酵過程消耗有機(jī)質(zhì)，將難溶態(tài)的N、P、K解離出來，從而較常規(guī)發(fā)酵的雞糞更加優(yōu)質(zhì)。同時還有利于消除致臭物質(zhì)，減少對環(huán)境的污染。
使達(dá)利”牌復(fù)合微生物肥是根據(jù)微生態(tài)學(xué)和植物營養(yǎng)學(xué)的理論，按照平衡施肥技術(shù)和肥料配方技術(shù)的要求，利用生物工程技術(shù)以農(nóng)業(yè)廢棄物為主要原料，對傳統(tǒng)化學(xué)肥料進(jìn)行改性深加工后形成的新一代高科技綠色環(huán)保肥料?！皬?fù)合微生物肥”具有改良土壤、促進(jìn)農(nóng)作物生長、提高農(nóng)作物產(chǎn)量、改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)、減少環(huán)境污染和大幅度降低農(nóng)產(chǎn)品有害物質(zhì)殘留等作用，為了驗(yàn)證其在玉米生產(chǎn)中的作用，今年我們承擔(dān)了黑龍江省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣站的試驗(yàn)任務(wù)，在雙城市雙城鎮(zhèn)長勇村農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心試驗(yàn)地進(jìn)行了試驗(yàn)研究，處理畝產(chǎn)706.1公斤，比對照每畝656.4公斤，增產(chǎn)49.7公斤，增幅7.57%?，F(xiàn)將試驗(yàn)情況詳細(xì)總結(jié)如下：
一、試驗(yàn)材料與方法
（一）、試驗(yàn)材料：
1、供試材料：“復(fù)合微生物肥”由“使達(dá)利”肥料有限公司生產(chǎn)提供，黑龍江省農(nóng)科院提供技術(shù)支持。
2、供試作物：玉米
（二）、試驗(yàn)方法
試驗(yàn)采用大區(qū)對比法，不設(shè)重復(fù)，設(shè)1個處理，處理面積667m2。
處理：25%復(fù)合微生物肥畝用量40公斤。
對照：45%魯西復(fù)合肥畝用量25公斤。
（三）試驗(yàn)地點(diǎn)：雙城市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心試驗(yàn)地
二、試驗(yàn)記錄與調(diào)查
1、地塊基本情況調(diào)查
2、物候期調(diào)查：
3、田間調(diào)查及考種分析：
4、產(chǎn)量結(jié)果調(diào)查：
三、試驗(yàn)總結(jié)分析
通過一年的肥料對比試驗(yàn)，“使達(dá)利”牌復(fù)合微生物肥表現(xiàn)較好，體現(xiàn)以下四個方面：一是物候期較有改觀，拔節(jié)、抽雄、吐絲提前，1天，成熟提前2天；二是抽雄期玉米長勢好于對照，株高增加4厘米、莖增粗0.1厘米、葉寬多0.5厘米，平方米葉面積增加0.13511，氣生根增多了0.5輪、增加了5條。三是構(gòu)成產(chǎn)量的因子有一定的提升，平均穗長增加0.5厘米、穗粒數(shù)增多6粒、百粒重提升2.1克、籽粒含水量降低9.7個百分點(diǎn)、單產(chǎn)提高49.7公斤，增產(chǎn)幅度7.57%。四是每畝產(chǎn)值增加99.40元，扣除增加的成本37.25元，每畝純增效益62.15元。
四、結(jié)論
經(jīng)過一年的實(shí)踐，“使達(dá)利”牌復(fù)合微生物肥，對改良土壤、促進(jìn)農(nóng)作物生長、提高農(nóng)作物產(chǎn)量、發(fā)揮了作用，初見效果，主要表現(xiàn)第一、使用“使達(dá)利”牌復(fù)合微生物肥，對玉米的物候期有了改善，均比對照提前1—2天，較有變化；第二、在玉米抽雄期植株增高4厘米以上、莖粗增加、葉片增寬、葉面積指數(shù)提高，地下部根系發(fā)達(dá)，地上地下長勢均好與對照；第三、構(gòu)成產(chǎn)量的因子有較明顯的提升，平均穗長增加0.5厘米、穗粒數(shù)增多6粒、百粒重提升2.1克、籽粒含水量降低9.7個百分點(diǎn)、單產(chǎn)提高49.7公斤，增產(chǎn)幅度7.57%。四、 效益較理想，即每畝純增效益62.15元。通過上述數(shù)字反映，“使達(dá)利”牌復(fù)合微生物肥對玉米生長發(fā)育有一定的改善，產(chǎn)量效益也有所提升，希望生產(chǎn)廠家能夠根據(jù)微生態(tài)學(xué)和植物營養(yǎng)學(xué)的理論，進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量升華，按照平衡施肥技術(shù)和肥料配方技術(shù)的要求，利用生物工程技術(shù)以農(nóng)業(yè)廢棄物為主要原料，真正做到對傳統(tǒng)化學(xué)肥料進(jìn)行改性深加工，最后形成新一代高科技綠色環(huán)保肥料，即“使達(dá)利”牌復(fù)合微生物肥，應(yīng)用于龍江大地，建議明年增加試驗(yàn)點(diǎn)次，擴(kuò)大示范面積，為今后大面積推廣應(yīng)用“使達(dá)利”牌復(fù)合微生物肥提供科學(xué)依據(jù)，為實(shí)現(xiàn)糧食增產(chǎn)，農(nóng)民增收，振興農(nóng)村經(jīng)濟(jì)，造福龍江百姓做出應(yīng)有的貢獻(xiàn)。
（作者單位：150100黑龍江省雙城市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心）
摘要：本文探討了基層實(shí)驗(yàn)室進(jìn)修人員、實(shí)習(xí)學(xué)生的帶教方法，對多年的帶教經(jīng)驗(yàn)、心得、體會進(jìn)行回顧和總結(jié)。帶教老師應(yīng)具備“責(zé)任心”、“耐心”、“匠心”以及“誠意”和“善意”，同時還應(yīng)結(jié)合其他具體方式，才能較快較好地讓學(xué)生掌握到知識。帶教工作是一門科學(xué)，作為帶教老師應(yīng)不斷學(xué)習(xí)和總結(jié)，探索出更科學(xué)有效的教學(xué)方法，從而做好帶教工作。
關(guān)鍵詞：帶教方法；基層微生物實(shí)驗(yàn)室；進(jìn)修；實(shí)習(xí)
實(shí)習(xí)或者進(jìn)修，對于畢業(yè)生或者資歷尚淺的專業(yè)技術(shù)人員來說都是一種非常重要的人生經(jīng)歷，它是理論應(yīng)用于實(shí)際工作的首次嘗試，是學(xué)生接觸社會的初步體驗(yàn)，也是技術(shù)人員增長見識、提高技能的重要手段。本人從事微生物檢驗(yàn)工作已有十多年，每年都有不少檢驗(yàn)專業(yè)的學(xué)生或者其他單位的技術(shù)人員前來實(shí)習(xí)、進(jìn)修，在多年的帶教工作中，總結(jié)了一些方法，積累了一些經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)提出來與同行們一同探討，相互學(xué)習(xí)，共同進(jìn)步。
一、面對實(shí)習(xí)、進(jìn)修人員，帶教老師應(yīng)該具備“三心兩意”
1.作為帶教的老師，我們對學(xué)生應(yīng)該要有較強(qiáng)的“責(zé)任心”。學(xué)校將學(xué)生交給我們，就是讓我們能把更多有用的知識、技能傳授給學(xué)生，好讓他們畢業(yè)后能更快、更好地適應(yīng)各自的工作崗位，因此，我們要對他們認(rèn)真負(fù)責(zé)。
2.帶教老師要有“耐心”。書本上的理論知識與實(shí)際工作往往有一定差距，學(xué)生對實(shí)際操作的原理與要點(diǎn)往往是一知半解，帶教的老師通常要反復(fù)解釋，他們才能理解，所以耐心講解是必不可少的。
3.我們還需要有“匠心”。微生物檢驗(yàn)是一門技術(shù)性很強(qiáng)的工作，帶教工作也需要講究方法和技巧，學(xué)生才容易理解和掌握。具體方法在下面作詳細(xì)介紹。
4.帶教老師面對學(xué)生還應(yīng)該有“誠意”和“善意”。我們指導(dǎo)學(xué)生，其實(shí)也是一種相互溝通、互相學(xué)習(xí)、互為促進(jìn)、共同提高的過程。我們教會他們某些專業(yè)上的技能，而他們會給我們傳遞許多有用的信息；同時在教學(xué)過程中，學(xué)生會促使我們不斷學(xué)習(xí)，提高自身專業(yè)技術(shù)水平，以滿足帶教工作的需要。因此，帶教老師對學(xué)生應(yīng)當(dāng)是以誠相待，傾囊相授。而對于學(xué)習(xí)過程中學(xué)生可能出現(xiàn)的厭學(xué)或過失，我們則應(yīng)提出善意的批評，循循善誘，而不應(yīng)對其枉加指責(zé)，避免他們對學(xué)習(xí)失去興趣。
二、帶教微生物檢驗(yàn)的常用方法
1.提問式教學(xué)。學(xué)生對書本上的知識理解并不深刻，而且往往不知道哪些是重點(diǎn)。因此，我們在帶教過程中可以提出一些問題，如“志賀氏菌的增菌液是什么”、“沙門氏菌的抗原分哪幾種”、“傷寒沙門氏菌Vi抗原為什么會阻礙O凝集”、“大腸菌群的定義和衛(wèi)生學(xué)意義是什么”等等。當(dāng)他們答不出來時，我們會讓他們?nèi)ゲ闀?，查不到時我們才給他們解答。這樣做不但可以引起學(xué)生們的興趣，同時讓他們知道看書時哪些知識點(diǎn)是重點(diǎn)，必須掌握。通過自己查書和老師解答，會給他們留下較深刻的印象，掌握得也較為牢固。
不同的教學(xué)方法是以不同的學(xué)習(xí)理論、教學(xué)理論為基礎(chǔ)的，教師應(yīng)注意學(xué)習(xí)有關(guān)理論，特別是現(xiàn)代學(xué)習(xí)理論，它是教學(xué)方法設(shè)計的重要的理論基礎(chǔ)。
根據(jù)教學(xué)目標(biāo)和教學(xué)內(nèi)容，有側(cè)重地滲透一種或幾種科學(xué)方法教學(xué)，如實(shí)驗(yàn)、觀察、測量、比較、分類、歸納、演繹、類比及模型方法等。可以通過生物科學(xué)史教學(xué)，介紹科學(xué)家發(fā)現(xiàn)問題的方法和思維過程，如光合作用的系列經(jīng)典實(shí)驗(yàn)及研究方法，或創(chuàng)設(shè)學(xué)習(xí)情景，如科學(xué)家發(fā)現(xiàn)問題的過程，讓學(xué)生體會、模仿。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是實(shí)施科學(xué)方法教育的重要途徑。生物學(xué)是一門實(shí)驗(yàn)性科學(xué)，每個生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中都蘊(yùn)含著科學(xué)方法與科學(xué)思想。因此，在生物科學(xué)教育中，重視實(shí)驗(yàn)教學(xué)，不僅進(jìn)行操作技能的訓(xùn)練，如顯微鏡的使用、裝片的制作、標(biāo)本的采集制作等，更重要的是讓學(xué)生掌握通過觀察、發(fā)現(xiàn)并提出問題—作出假設(shè)—制訂實(shí)驗(yàn)計劃—實(shí)施計劃—得出結(jié)論—表達(dá)、交流等一系列科學(xué)研究的程序，提高學(xué)生科學(xué)工作的過程技能。圍繞重要概念這一教學(xué)目標(biāo)、教學(xué)重點(diǎn)，采用有效講授、演示、資料的分析、小組討論、探究活動、動手實(shí)驗(yàn)等多種教學(xué)形式與學(xué)習(xí)活動，幫助學(xué)生通過必要的生物學(xué)事實(shí)構(gòu)建概念、理解概念、應(yīng)用概念，進(jìn)而形成知識體系，為學(xué)生能夠在新情境下解決相關(guān)問題奠定基礎(chǔ)。這樣的教學(xué)才能避免學(xué)生死記硬背生物學(xué)事實(shí)，體現(xiàn)生物學(xué)科的科學(xué)課程性質(zhì)。
2.專題性、針對性講解。除了在日常工作中帶教學(xué)生，如果有時間的話，我們還會給學(xué)生作一些簡短、新穎的專題講座。如“食物中毒的檢驗(yàn)程序”、“不同細(xì)菌分離鑒定所需要的各種培養(yǎng)基”、“NDM-1泛耐藥菌的抗藥機(jī)理及流行狀況”、“分子生物學(xué)檢測方法”等。這樣做大大開拓了學(xué)生們的視野，增長了他們的見識。
3.多觀察，及時發(fā)現(xiàn)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作中的不足或失誤。在帶教進(jìn)程中，我們會經(jīng)常留意學(xué)生們的操作是否正確，發(fā)現(xiàn)不正確的，則即時給予糾正。例如，我們有時會發(fā)現(xiàn)學(xué)生用接種針挑取細(xì)菌接種液體培養(yǎng)基時，他們會將接種針在培養(yǎng)基中直接大力地攪拌。這時，我們會給他們指出：這樣做是不符合生物安全要求的，在液體培養(yǎng)基中大力地攪拌很容易產(chǎn)生氣溶膠，如果所接種的是呼吸道的致病菌，則存在呼吸道感染的危險。同時，我們會教他們正確的接種方法。
4.常用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行示教。形態(tài)鑒別對微生物學(xué)檢驗(yàn)是非常重要的。通過觀察平板上細(xì)菌的菌落形態(tài)，來初步推測它是什么菌，對細(xì)菌的鑒定是最基本最、重要的手段，但也是最難掌握的。我們常對學(xué)生說，只有對各種致病菌的菌落形態(tài)了如指掌，你才能做到當(dāng)眾多雜菌同時存在時還能準(zhǔn)確地找到它。因此，我們經(jīng)常會將手頭各種標(biāo)準(zhǔn)菌株劃線分離接種在各種瓊脂平板上，讓學(xué)生們掌握它們的形態(tài)。
5.進(jìn)行質(zhì)控考核。用未知菌種對學(xué)生們進(jìn)行質(zhì)控考核，對提高他們的檢測水平有重要的意義。通過質(zhì)控考核，能讓學(xué)生們初步掌握某種細(xì)菌的檢定程序，并且在在鑒定過程中會遇到很多問題他們會想辦法去解決，去翻書查資料，從而學(xué)會很多技巧和知識；而當(dāng)準(zhǔn)確鑒定出某種細(xì)菌后，他們會有成就感，也大大增強(qiáng)了他們的自信心和對檢測工作的興趣，對今后的學(xué)習(xí)也更有熱情了。
三、帶教過程中應(yīng)注意的的問題
1.帶教老師應(yīng)該有扎實(shí)的專業(yè)知識和技能。作為帶教的老師，自己應(yīng)當(dāng)盡可能精通本專業(yè)的相關(guān)知識和業(yè)務(wù)，只有這樣才能指導(dǎo)好學(xué)生。在教學(xué)過程中，學(xué)生常常會問一些看似簡單卻不好回答的問題，如果平時沒有關(guān)注，是很難作答的。例如有學(xué)生會問，沙門氏菌在接種改良克氏雙糖鐵瓊脂時，為什么底層變黃并有黑色沉淀生成，而斜面則變紅且沒有黑色沉淀生成？對這個問題，如果你不熟悉改良克氏雙糖鐵瓊脂的成分和原理，是根本答不上來的。
2.給學(xué)生做質(zhì)控考核前最好自已先做一遍，做到心中有底。如果要給學(xué)生做未知菌的質(zhì)控考核，事先最好把菌株做一下，看看菌種的各項(xiàng)生物性狀有沒有發(fā)生改變。因?yàn)榫N傳代超過五代后，它的菌落形態(tài)、凝集效果等有可能會發(fā)生改變。要是拿這樣的菌株給學(xué)生做質(zhì)控考核，效果就不太理想了。
以上是本人多年實(shí)驗(yàn)室?guī)Ы坦ぷ鞯囊稽c(diǎn)心得體會。帶教工作其實(shí)是一門科學(xué)，本人還將在今后的帶教工作不斷學(xué)習(xí)和總結(jié)，希望能探索出一些更科學(xué)有效的教學(xué)方法，使學(xué)員們能更快、更好地掌握微生物檢驗(yàn)的知識和技能。
微生物源農(nóng)藥的研究發(fā)展迅速，它已成為重要的殺蟲劑，而B.t和阿維菌素是當(dāng)今防治技術(shù)中應(yīng)用最廣的兩種微生物源藥劑，它們的殺蟲機(jī)理都是使害蟲生病死亡。盡管其應(yīng)用效果受環(huán)境影響大，防治暴發(fā)性害蟲差，但因其生物活性高，不容易產(chǎn)生抗藥性，選擇性強(qiáng)，不傷害天敵、對人畜毒性低，無殘留，不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)，越來越受到綠色生產(chǎn)基地首選的無公害農(nóng)藥。
1 B.t殺蟲劑
1.1性能與特點(diǎn)
B.t是蘇云金芽孢桿菌的簡稱，又名殺螟桿菌、青蟲菌、7216、82162等，是一種細(xì)菌性微生物殺蟲劑。殺蟲有效成分是由產(chǎn)晶體芽孢產(chǎn)生的3種毒素，對害蟲僅有胃毒作用。害蟲食入藥劑后，在中腸內(nèi)，使腸道在幾分鐘內(nèi)麻痹，停止取食；并破壞腸道內(nèi)膜，進(jìn)入血淋巴，使害蟲饑餓和出現(xiàn)敗血癥而死亡。藥效較緩慢，一般害蟲取食后1至2天才見效，殘效期10天左右。
1.2劑型
有100億活芽孢懸浮劑；100億活芽孢可濕性粉劑。
1.3防治對象和使用方法
主要用于防治特定的鱗翅目幼蟲及某些地下害蟲?？捎脕矸乐纬唧丁⒋潭辍⒁苟?、天蛾、毛蟲類等，但對毒蛾、燈蛾效果差。在低齡幼蟲期使用，治蟲保葉效果較好，使用濃度為1500-2000倍液均勻噴霧。
1.4注意事項(xiàng)
1.4.1 B.t可濕性粉劑殺蟲見效速度較慢，用藥時間應(yīng)比化學(xué)農(nóng)藥提前2至3天。它本身是一種細(xì)菌，所以不能和內(nèi)吸殺蟲劑或殺菌劑混用，但可和低濃度擬除蟲菊酯類農(nóng)藥混用，可提高防效。在菌液中加入0.1%洗衣粉，能增加其粘著力。
1.4.2本藥劑對蚜蟲、螨類等刺吸式口器害蟲無效。藥液要現(xiàn)配現(xiàn)用，以免失效。
1.4.3本藥劑對家蠶、蓖麻蠶毒性大，不可在桑園及養(yǎng)蠶場所使用，嚴(yán)防污染蠶食和蠶具。
1.4.4 B.t藥劑在氣溫較高（20℃以上）時使用效果好，常在6-9月份使用。溫度低到一定程度，會使該藥完全失去殺蟲效果。在25℃～30℃時使用，其防效比10℃-15℃時高出1-2倍。因此，溫度低于20℃時最好不要使用。
1.4.5環(huán)境濕度越大，其防效發(fā)揮得好。盡管濕度上升易引起病害，但粉狀B.t中只有在高濕的條件下才能發(fā)揮藥效。因此，噴灑粉劑農(nóng)藥宜在早晚有露水時進(jìn)行，以利于菌劑粘附在莖葉上，并促進(jìn)芽孢繁殖，增加與害蟲接觸的機(jī)會。
1.4.6強(qiáng)烈陽光中紫外線對細(xì)菌芽孢有破壞作用，中到大雨會沖刷噴灑在植株莖葉上的藥液，降低防治效果。如果在噴藥后下毛毛雨，有增加防治效果作用。為保證藥效，使用時一定要注意天氣預(yù)報，保證施藥后1-2天內(nèi)無中到大雨。因此，應(yīng)選擇晴天傍晚、陰天或微雨天施藥。噴藥后如遇大雨，則需補(bǔ)噴。使用時最好是在陰天或晴天下午4時以后。
2阿維菌素殺蟲劑
2.1性能與特點(diǎn)
阿維菌素又叫齊螨素、愛福丁、阿巴丁、阿佛米丁、阿佛曼菌素等，是由阿佛曼鏈霉菌經(jīng)液體發(fā)酵、提取等工藝生產(chǎn)的抗生素類殺蟲殺螨劑。
2.1.1高效、廣譜，一次用藥可防治多種害蟲。
能防治鱗翅目、雙翅目、同翅目、鞘翅目等，殺蟲譜有84種，我國多用來防治蟲體小、世代多、易出現(xiàn)抗藥性的害蟲如梨木虱、棉蚜等，潛葉性的害蟲如美洲斑潛蠅等，害螨如二斑葉螨、茶橙葉螨、山楂葉螨和寄主廣、食性雜的害蟲如小菜蛾等。
2.1.2殺蟲機(jī)制獨(dú)特，持效期長。
阿維菌素是一種神經(jīng)毒劑，干擾昆蟲體內(nèi)神經(jīng)末梢的信息傳遞，致使神經(jīng)膜處于抑制狀態(tài)，從而阻斷神經(jīng)未梢與肌肉的聯(lián)系，使昆蟲麻痹、拒食、死亡。阿維菌素在噴施后能滲入作物葉片組織中，表皮薄壁細(xì)胞內(nèi)形成藥囊，長期貯存，所以，阿維菌素有較好的持效期。
2.1.3害蟲不產(chǎn)生抗藥性，與其他殺蟲劑之間不產(chǎn)生交互抗藥性，對抗藥性害蟲有特效。
因?yàn)榘⒕S菌素是大分子化合物，害蟲不易產(chǎn)生抗藥性；它的殺蟲原理特殊，與其它農(nóng)藥無交互抗性，即使對有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲菊酯殺劑產(chǎn)生抗藥性的害螨、潛葉蠅、潛葉蛾以及其他鉆蛀性害蟲或刺吸式害蟲等常規(guī)藥劑難以防治的害蟲仍具有高效。
2.1.4對天敵和環(huán)境安全。
因施藥后，未滲入植物體內(nèi)的而停留在植物體表面的藥劑可很快分解，對天敵損傷很少。阿維菌素在土壤和水中易降解，并在土壤中被土壤吸附，不會淋溶，無殘留，不會污染環(huán)境；在生物體內(nèi)也無積累和持久性殘留，所以阿維菌素屬于無公害農(nóng)藥。此外，阿維菌素還可以通過土壤微生物分解成具有更高活性的衍生物，還可對植物線蟲產(chǎn)生殺蟲作用。
2.2劑型
現(xiàn)在常用的劑型有1.8%乳油，此外還有0.9%和0.3%的劑型。
2.3、防治對象和使用方法
阿維菌素主要用于花卉、果樹、蔬菜、煙草棉花等作物防治棉鈴蟲、菜青蟲、潛葉蠅、蚜蟲、木虱、桃小食心蟲、以及葉螨等，一般用1.8%乳油2000-4000倍液噴霧；防治土壤根結(jié)線蟲，一般每667m2用1.8%乳油600-900ml效果極好。
2.4注意事項(xiàng)
2.4.1害蟲取食阿維菌素生物農(nóng)藥后有1-3d的不食、不動、不死的中毒過程，所以要抓住防治適期，在害蟲幼蟲盛發(fā)前期用藥，以達(dá)到較好的防效。
2.4.2與其他藥劑輪用或換用，可以延緩其抗性發(fā)展。
2.4.3使用增效劑，如在防治馬鈴薯甲蟲和二斑葉螨時可以增加多功能氧化酶抑制劑Pbo或酯酶抑制劑DEF，以提高防效，抑制抗性。
2.4.4加增效油，大多數(shù)植物油、礦物油對阿維菌素有不同程度的增效作用，可以減少阿維菌素的用量。
2.4.5阿維菌素藥效緩慢，應(yīng)正確使用，不要隨意加大用藥量。此藥是以觸殺和胃毒作用為主，要將藥劑與水混勻，并均勻噴霧在植株上。
2.4.6阿維菌素對蜜蜂、某些魚類毒性較高，所以用藥時盡量避開花期和污染魚池。
2.4.7阿維菌素原藥對人畜毒性高，制劑對人畜毒性中等，若誤服，可服用吐根糖漿或麻黃素解毒。
總之，隨著人類對環(huán)境保護(hù)和自身健康的日益關(guān)注。清潔、綠色、健康、環(huán)保的生活成為人們自覺的選擇和追求與人們?nèi)粘Ｉ钕⑾⑾嚓P(guān)的高效、安全的生物農(nóng)藥必將成為農(nóng)藥產(chǎn)品中的主力軍。
（作者單位：164321黑龍江省紅色邊疆農(nóng)場）
微生物肥料的主要優(yōu)點(diǎn)是可以改良土壤，不污染環(huán)境，無毒副作用，是生產(chǎn)“綠色食品”的理想肥料。將微生物肥料使用在種子和土壤上，可以增進(jìn)土壤肥力，協(xié)助植物吸收營養(yǎng)，增強(qiáng)植物抗病和抗旱能力，節(jié)約能源，降低生產(chǎn)成本，減少環(huán)境污染。
一、微生物肥料的分類
1、固氮菌肥料
可以自由生活的固氮的微生物為菌種生產(chǎn)出來的固氮菌肥料。按照菌種和特性可分為自生固氮菌肥料，根際聯(lián)合固氮菌肥料，復(fù)合固氮菌肥料。固氮菌肥料可用于各種作物，尤其是禾本科作物與蔬菜中的葉菜類作物，可作基肥，追肥，和種肥。
2、根瘤菌肥料
用于豆科作物接種，使豆科類作物結(jié)瘤、固氮的接種劑。復(fù)合根瘤菌肥料以根瘤菌為主，加入一些能促進(jìn)結(jié)瘤、固氮作用的芽胞桿菌、假單胞細(xì)菌和其他有益的促生微生物的根瘤菌肥料，叫做復(fù)合根瘤菌肥料。加入的促生微生物一定要對人畜及植物無害的菌種。
3、硅酸鹽細(xì)菌肥料
是說在土壤中通過硅酸鹽細(xì)菌的生命活動，增添植物營養(yǎng)元素的供應(yīng)量，刺激作物的生長，抑制有害微生物的活動，對作物有一定的增產(chǎn)效果的微生物制品。
4、磷細(xì)菌肥料
按菌種及肥料的作用特性分為兩種，一種是有機(jī)磷細(xì)菌肥料，另一種是無機(jī)磷細(xì)菌肥料。有機(jī)磷細(xì)菌肥料是說在土壤中能分解有機(jī)態(tài)磷化物（卵磷脂，核酸，植素等）的有益微生物發(fā)酵而制成的微生物肥料。而無機(jī)磷細(xì)菌肥料是說能把土壤中惰性的不能被作物直接吸收利用的無機(jī)態(tài)磷化物，溶解轉(zhuǎn)化為作物能吸收利用的有效態(tài)磷化物。
二、微生物肥料的好處
1、分泌生長激素
很多微生物種類在生長繁殖過程中產(chǎn)生對植物有益的代謝產(chǎn)物，如生長素，吲哚乙酸，赤霉素，多種維生素，氨基酸等等，可以刺激和調(diào)節(jié)作物生長，使植物生長健壯，營養(yǎng)良好，從而達(dá)到增產(chǎn)的效果。
2、改善作物品質(zhì)
是指微生物肥料的主要功效，各種自生、聯(lián)合和共生的固氮微生物肥料，能增加土壤中的氮素采源。多種分解磷、鉀礦物的微生物，如一些芽孢桿菌、假單胞菌的使用，能將土壤中難溶的磷、鉀溶解出來，轉(zhuǎn)變?yōu)樽魑锟梢晕绽玫牧?、鉀離子，使作物生活環(huán)境中的營養(yǎng)充分。由于微生物肥料能提高土壤的養(yǎng)分含量，因此在同樣地力水平的土壤上能減少化肥的用量，并且獲得等效的增產(chǎn)效果。使用微生物肥料能提高農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)，如蛋白質(zhì)、糖、維生素等含量的提高。
3、曾強(qiáng)作物抗病與抗旱能力
多種微生物能誘導(dǎo)植物的過氧化物酶，脂氧合酶，多酚氧化酶，苯甲氨酸解氨酶，幾丁質(zhì)酶等參和植物防御放應(yīng)，利于防病抗病，有些微生物種類還可以產(chǎn)生抗菌素類物質(zhì)，有的則是形成了優(yōu)勢種群，減少了作物病蟲害的發(fā)生。菌根真菌由于在植物根部的大量生長，它的菌絲除可為植物提供營養(yǎng)元素外，還能增加水分吸收，有利于提高植物的抗旱能力。
三、微生物肥料的應(yīng)用前景
1、適用品種多
適合施用微生物肥料的作物種類繁多，各種豆科作物、經(jīng)濟(jì)作物、糧食作物、蔬菜瓜果等都能應(yīng)用微生物肥料提高產(chǎn)量、改善品質(zhì)。
2、生產(chǎn)無公害綠色食品
無公害的綠色食品對目前的農(nóng)業(yè)提出了更高的要求。隨著綠色農(nóng)業(yè)的發(fā)展，生產(chǎn)安全、無公害的綠色食品已經(jīng)成為一個發(fā)展趨勢；并且由于大量使用化肥，土壤質(zhì)量下降，土壤物理性質(zhì)惡化，地下水污染等眾多問題日益突出。
3、微生物肥料本身的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)
通過篩選優(yōu)良菌種、改進(jìn)生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)工藝，為生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的微生物肥料創(chuàng)造了有利條件，而且基因工程新菌株的出現(xiàn)讓微生物肥料的廣泛應(yīng)用成為可能。目前興起的植物根際促生細(xì)菌（PGPR）的研究和開發(fā)，更為微生物肥料的應(yīng)用開辟了廣闊前景。
四、推廣應(yīng)注意的問題
1、應(yīng)使用獲得國家登記證的微生物肥料。國家規(guī)定微生物肥料必須要經(jīng)農(nóng)業(yè)部指定單位檢驗(yàn)和正規(guī)田間試驗(yàn)，充分證明它的效益、無毒、無害后由農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)登記，而且先發(fā)給臨時登記證，經(jīng)3年實(shí)際應(yīng)用檢驗(yàn)可靠之后再發(fā)給正式登記證。正式登記證有效期只有5年。因此。沒有獲得國家登記證的微生物肥料，質(zhì)量很可能有問題，不要大面積推廣使用。
2、不要使用過期的微生物肥料。由于技術(shù)水平的有限，目前我國絕大多數(shù)微生物肥料的有效菌成活時間超過1年的并不多，所以一定在有效期內(nèi)盡快使用，越早越好，過期的微生物肥料效果肯定有影響。
3、要使用有效活菌數(shù)達(dá)標(biāo)的微生物肥料。國家規(guī)定微生物肥料菌劑有效活菌數(shù)≥2億個/g，大肥有效活菌數(shù)≥2000萬個/g，而且應(yīng)該有40%的富余。如果達(dá)不到這一標(biāo)準(zhǔn)，就不要使用，說明質(zhì)量不過關(guān)。
4、必須要正確存放和使用。微生物肥料中很多有效活菌是不耐高低溫和強(qiáng)光照射，不耐強(qiáng)酸堿，不能與一些化肥和殺菌劑混合，所以推廣應(yīng)用微生物肥料一定按產(chǎn)品說明書進(jìn)行科學(xué)保存和使用。
（作者單位：152100黑龍江省望奎縣靈山鄉(xiāng)農(nóng)牧業(yè)技術(shù)服務(wù)中心）
一、食品微生物檢驗(yàn)概述
食品微生物檢驗(yàn)是應(yīng)用微生物學(xué)的理論與方法，研究外界環(huán)境和食品中微生物的種類、數(shù)量、性質(zhì)、活動規(guī)律、對人和動物健康的影響及其檢驗(yàn)方法與指標(biāo)的一門學(xué)科，是近年來形成的微生物學(xué)的一個分支。食品微生物檢驗(yàn)，側(cè)重于有害方面，重點(diǎn)研究食品的微生物污染、檢測范圍、衛(wèi)生指標(biāo)、檢驗(yàn)方法等。
（一）食品微生物檢驗(yàn)的范圍
食品微生物檢驗(yàn)的范圍包括以下幾個方面。
1.生產(chǎn)環(huán)境的檢驗(yàn)
2.原輔料的檢驗(yàn)
3.食品加工過程、貯藏、銷售等環(huán)節(jié)的檢驗(yàn)
4.食品的檢驗(yàn)
（二）食品微生物檢驗(yàn)的指標(biāo)
1.菌落總數(shù)
菌落總數(shù)是食品檢驗(yàn)經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后1g/lmL或1cm2（表面積）檢驗(yàn)中所含細(xì)菌菌落的總數(shù)。
2.大腸菌群
大腸菌群是指一群在37℃培養(yǎng)24h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，需氧和兼性厭氧的革蘭陰性無芽孢桿菌。
3.致病菌
致病菌既能夠引起人們發(fā)病的細(xì)菌。食品中不允許有致病菌存在，這是食品衛(wèi)生質(zhì)量指標(biāo)中必不可少的標(biāo)準(zhǔn)之一。
4.霉菌及其毒素
鑒于有很多霉菌能夠產(chǎn)生毒素，引起疾病，故應(yīng)該對產(chǎn)毒霉菌進(jìn)行檢驗(yàn)。例如曲霉屬的黃曲霉、寄生曲霉等，青霉屬的橘青霉等。
二、鮮肉中微生物污染
1.宰前微生物的污染
（1）健康動物的體表及一些與外界相通的腔道，某些部位的淋巴結(jié)內(nèi)都不同程度地存在著微生物，尤其在消化道內(nèi)的微生物類群更多。
（2）有些微生物也可經(jīng)體表的創(chuàng)傷、感染而侵入深層組織。
（3）患傳染病或出于潛伏期或帶菌（毒）者。
（4）動物在運(yùn)輸、宰前等過程中的微生物的傳染。
2.屠宰過程中微生物的污染
（1）健康動物的皮膚和被毛上的微生物，其種類與數(shù)量和動物生前所處的環(huán)境有關(guān)。宰前對動物進(jìn)行淋浴和水浴，可減少皮毛上的微生物對鮮肉的污染。
（2）胃腸道內(nèi)的微生物有可能沿植物間隙侵入鄰近的組織和臟器。
（3）呼吸道和泌尿生殖道中的微生物。
（4）屠宰加工場所的衛(wèi)生狀況。如生產(chǎn)用水、屠宰加工車間的設(shè)備。
三、食品的腐敗變質(zhì)
1.溫度：低于4攝氏度或高于65攝氏度都不太利于細(xì)菌繁殖
2.水分：非常重要的因素，含水量較高的食品相比之下更容易腐敗
3.含鹽量：其實(shí)就是滲透壓，細(xì)菌一般不喜歡高鹽環(huán)境
4.有人提到酸堿性，情況很少，因?yàn)槭桥c人吃的東西，其酸堿性也很適于細(xì)菌繁殖。
四、食品中菌落總數(shù)的測定
（一）設(shè)備和材料
1.主要設(shè)備：溫箱36±1℃；冰箱0-4℃；恒溫水浴46±1℃；天平；電爐；吸管；廣口瓶或三角瓶：容量為500mL；玻璃珠：直徑約5mm平皿：直徑為90mm試管；放大鏡；菌落計數(shù)器；酒精燈；均質(zhì)器或乳缽；滅菌刀或剪子；試管架；滅菌鑷子。
2.培養(yǎng)基和試劑：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；磷酸鹽緩沖稀釋液；生理鹽水；75%乙醇
（二）實(shí)驗(yàn)方法
1.檢驗(yàn)程序：
（1）檢樣
（2）做成幾個適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液
（3）選擇2-3個適宜稀釋度各取1mL分別加入滅菌培養(yǎng)皿內(nèi)
（4）每皿內(nèi)加入適量營養(yǎng)瓊脂
（5）菌落計數(shù)
（6）報告
2.檢樣稀釋及培養(yǎng)
（1）以無菌操作，將檢樣25g（或mL）剪碎放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后，最好置均質(zhì)器中以8 000-10 000r/min的速度處理1min，做成1：10的均勻稀釋液。
（2）用1mL滅菌吸管吸取1：10稀釋液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)（注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液），振搖試管，混合均勻。做成1：100的稀釋液。
（3）另取1mL滅菌吸管，按上條操作順序，做10倍遞增稀釋液
（4）根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計，選擇2-3個適宜稀釋度，分別在做10倍遞增稀釋的同時。
（5）稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時將涼至46℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于46±1℃水浴保溫）注入平皿約15mL，并轉(zhuǎn)動平皿使混合均勻。
（6）等瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置（36±1）℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)（48±2）h取出，計算平板內(nèi)菌落數(shù)目乘以倍數(shù)，即得1mL樣品所含菌落總數(shù)。
3.菌落計數(shù)的報告
為適應(yīng)社會發(fā)展的需要，食品微生物檢驗(yàn)必須向自動化檢驗(yàn)和快速檢驗(yàn)的方向發(fā)展，其趨勢是靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性大、快速、簡便和經(jīng)濟(jì)等。隨著分子生物學(xué)和微電子技術(shù)的發(fā)展，快速、準(zhǔn)確、特異檢驗(yàn)微生物的新技術(shù)、新方法不斷涌現(xiàn)，微生物檢驗(yàn)技術(shù)由培養(yǎng)水平向分子水平邁進(jìn)，并向儀器化、自動化、標(biāo)準(zhǔn)化方向發(fā)展，提高了食品微生物檢驗(yàn)工作的高效性、準(zhǔn)確性和可靠性。
（作者單位：150500哈爾濱市呼蘭區(qū)職教中心）
微生物肥料是指一類含有活性微生物的特定制品劑，種類繁多、功能多樣，研究和應(yīng)用的潛力巨大，因此它在我國農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中發(fā)揮著不可替代的作用。但是微生物肥料在使用中還存在一些問題，本文主要從微生物肥料的概念、種類、作用、應(yīng)用現(xiàn)狀及存在的問題、建議以及發(fā)展趨勢等六方面進(jìn)行說明，以供參考。
一、微生物肥料的概念
微生物肥料又稱接種劑，菌肥或生物肥料等，是一種含有特定微生物活體的制品，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，它通過其中所含微生物的生命活動，來增加植物養(yǎng)分的供應(yīng)量，從而發(fā)揮肥效的作用。
二、微生物肥料的種類
微生物具有資源豐富、種類繁多等特點(diǎn)，由微生物制出的肥料品種也非常多，如第一類：細(xì)菌類肥料 、 放線菌類肥料 、 真菌類肥 料；第二類：單一微生物肥料、復(fù)合微生物肥料；第三類：固氮菌類肥料 、 解磷菌類 肥料 、 解鉀菌類肥料 （ 硅酸鹽細(xì)菌） 、 抗生菌肥料 、 菌 VA 根真菌肥料 、 堆肥菌劑和發(fā)酵菌劑等。其中第一類微生物肥料是按照微生物種類劃分的；第二類微生物肥料是按照制品內(nèi)含物劃分的；第三類是按照作用機(jī)理劃分的。由此可見，使用者在使用微生物肥料時，具有選擇范圍廣，作用性強(qiáng)等特點(diǎn)。但是需要注意的是，由于微生物肥料種類繁多，使用者在選擇前一定要對每種肥效了解透徹，以免造成錯誤使用。
三、微生物肥料的作用
微生物肥料具有其它普通肥料不可替代的作用。本文主要以固氮菌肥、解鉀菌肥、5406 菌肥、植物根際促生菌 （ PGPR）、解磷菌肥等五種微生物肥料為例，簡要分析其作用。
1. 固氮菌肥的作用
固氮菌肥主要是利用微生物自身或聯(lián)合固氮菌固定空氣中的氮素來發(fā)揮作用的，從而提高土壤中速效氮含量，發(fā)揮固氮菌對農(nóng)作物的作用。
2. 解鉀菌肥的作用
解鉀菌肥主要是利用膠質(zhì)芽孢桿菌發(fā)揮作用的，這種菌能夠分解土壤中的云母、長石等鉀鋁硅酸鹽及磷灰石，從而釋放對植物生長有效的礦質(zhì)成分，促進(jìn)土壤肥力的增加。
3. 5406 菌肥的作用
5406 菌肥是通過細(xì)黃放線菌可分泌抗菌物質(zhì)和刺激素來發(fā)揮作用的，從而達(dá)到抑制作物病害，促進(jìn)作物健康生長的目的。
4. 植物根際促生菌肥的作用
植物根際促生菌簡稱PGPR，又名增產(chǎn)菌或多效菌劑。它是通過植物根部生長大量的有益菌來發(fā)揮作用，從而促進(jìn)作物對對礦質(zhì)營養(yǎng)的吸收和利用，還可以促進(jìn)植物的新陳代謝，抑制病原菌的產(chǎn)生。
5. 解磷菌肥的作用
解磷菌肥主要是利用巨大芽孢桿菌發(fā)揮作用，將土壤中的不溶物轉(zhuǎn)化為植物可吸收的營養(yǎng)成分。如不溶性磷向可溶性磷的轉(zhuǎn)化。
由以上可以概括出微生物肥料的作用：首先，它制造和協(xié)助作物吸收營養(yǎng)，增加植物養(yǎng)分的供應(yīng)量和土壤的肥力，從而促進(jìn)植物生長、提高產(chǎn)量。其次，它增強(qiáng)了植物的抗病能力和抗干旱能力，降低和減輕了植物病蟲害的侵襲。最后，它的使用，減少了化肥等含污染物的肥料的使用，從而凈化土壤、修復(fù)土壤肥力，起到保護(hù)環(huán)境，促進(jìn)我國農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的作用。
四、微生物肥料應(yīng)用現(xiàn)狀及存在的問題
1.我國微生物肥料的應(yīng)用現(xiàn)狀
我國微生物肥料的研究、生產(chǎn)和應(yīng)用已經(jīng)有60多年的歷史，期間經(jīng)歷了3次大的起伏，目前正處在第4次發(fā)展階段。微生物肥料產(chǎn)業(yè)發(fā)展勢頭良好，約有500個企業(yè)，而且產(chǎn)品種類繁多，效果顯著，深受廣大用戶的喜愛。但是微生物肥料的在使用上仍然存在一些問題，需要馬上進(jìn)行解決。
2.微生物肥料應(yīng)用中存在的問題
2.1微生物肥料成本和價格較高
目前，由于我國微生物肥料生產(chǎn)技術(shù)較落后，生產(chǎn)工藝不是很完善，造成高投入、低產(chǎn)出的現(xiàn)象，而且成本和價格較高，這嚴(yán)重阻礙了種植戶對微生物肥料的購買率，也降低了種植戶使用微生物肥料的積極性。
2.2微生物肥料活菌數(shù)低，效果不穩(wěn)定
微生物肥料存在的另一個問題就是微生物肥料活菌數(shù)低，效果不穩(wěn)定。這是由于微生物肥料生產(chǎn)設(shè)備較低級，技術(shù)不純熟，造成滅菌不徹底以及培養(yǎng)配方不正確而引起的。
2.3微生物肥料機(jī)械設(shè)備簡陋，技術(shù)較落后
微生物肥料機(jī)械設(shè)備簡陋，技術(shù)較落后，這嚴(yán)重阻礙微生物肥料質(zhì)量的提高，質(zhì)量得不到保證，這也阻礙了使用者對微生物肥料的使用。
2.4微生物肥料產(chǎn)品魚龍混雜
一些生產(chǎn)微生物肥料的商家為了牟取暴利，不按照國家NY227 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)微生物肥料，造成市面上的產(chǎn)品魚龍混雜。表現(xiàn)為肥料中僅含有大量的N 、P K 微量元素；或使用生長調(diào)節(jié)劑冒充微生物肥料，這對微生物肥料行業(yè)的發(fā)展是百害而無一利的。
五、對微生物肥料應(yīng)用的建議
1.改善生產(chǎn)條件，降低生產(chǎn)成本
改善生產(chǎn)條件，降低生產(chǎn)成本，達(dá)到低投入、高產(chǎn)出的目的。同時，需要注意的是成品在儲存時，條件要合理，以便活菌數(shù)能維持較長時間，使其效果穩(wěn)定。
2.提高生產(chǎn)技術(shù)，完善生產(chǎn)設(shè)備
加強(qiáng)對專業(yè)工人的技術(shù)指導(dǎo)，提高生產(chǎn)技術(shù)，購買一批先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備，改善生產(chǎn)條件，提高微生物肥料的質(zhì)量。
3.加強(qiáng)市場監(jiān)督和管理，促進(jìn)微生物肥料產(chǎn)業(yè)的發(fā)展
為了促進(jìn)市場行業(yè)的有序進(jìn)行，微生物肥料行業(yè)的健康發(fā)展，要加強(qiáng)微生物生產(chǎn)肥料市場的監(jiān)督和管理，將微生物肥料的生產(chǎn)和使用納入法制軌道，將市場進(jìn)行規(guī)范化管理，以達(dá)到促進(jìn)微生物肥料行業(yè)發(fā)展的目的。
六、微生物肥料的發(fā)展趨勢
我國微生物肥料行業(yè)發(fā)展已經(jīng)有60多年的歷史，尤其是近十年得到了快速的發(fā)展，以后將會有更大的發(fā)展空間，功能上將會由單功能向多功能轉(zhuǎn)變，菌種上將會出現(xiàn)更新?lián)Q代，選用抗逆性高、能長時間儲存的芽孢桿菌屬，而且由單一菌種向復(fù)合菌種方面發(fā)展。
結(jié)束語：
在今后的日子里，微生物肥料將會有更大的發(fā)展空間，并且將會大受歡迎，它將成為綠色用肥而進(jìn)入市場，成為新興的綠色產(chǎn)業(yè)，擁有更加廣闊的發(fā)展前景。
摘要：目的：探討微生物檢驗(yàn)在感染控制中的應(yīng)用效果。方法：對照組住院患者根據(jù)其實(shí)際病情進(jìn)行臨床常規(guī)對癥治療與護(hù)理；研究組住院患者除上述措施外，進(jìn)行感染情況監(jiān)控措施，觀察并記錄兩組患者醫(yī)院獲得性感染輕度、中度、重度發(fā)生情況及感染總發(fā)生率，將所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果：研究組住院患者醫(yī)院獲得性感染發(fā)生率僅為9.00%，顯著低于對照組患者醫(yī)院獲得性感染發(fā)生率67.00%，且P
關(guān)鍵詞：微生物檢驗(yàn)；感染控制；臨床應(yīng)用分析
本文將選取2012年1月至12月期間前來我院住院治療的200例患者給予臨床分組研究，從而探討微生物檢驗(yàn)在感染控制中的應(yīng)用效果，為降低患者醫(yī)院獲得性感染發(fā)生率提供可靠依據(jù)，最終保障患者生活質(zhì)量與生命安全，現(xiàn)報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 共選取200例住院患者，其中男患為121例、女患為79例，患者最大年齡為87歲，最小年齡為18歲，平均45.29±1.29歲，住院時間在7至48天之間，平均住院時間為17.36±2.28天。將我院200例住院患者以隨機(jī)分組方式平均分為兩組，即研究組（100例患者）與對照組（100例患者）。研究組與對照組住院患者在性別、例數(shù)、年齡、疾病類型、教育背景以及社會經(jīng)歷等方面無顯著性差異（P>0.05）， 患者資料具有可比性。
1.2 方法 對照組住院患者根據(jù)其實(shí)際病情進(jìn)行臨床常規(guī)對癥治療與護(hù)理；研究組住院患者除上述措施外，進(jìn)行感染情況監(jiān)控措施，具體監(jiān)控方法為實(shí)施微生物檢，內(nèi)容包括環(huán)境細(xì)菌學(xué)監(jiān)測、細(xì)菌耐藥性監(jiān)測、醫(yī)療器械及用品細(xì)菌學(xué)監(jiān)測、醫(yī)護(hù)人員手部細(xì)菌學(xué)檢測等。對研究組與對照組住院患者發(fā)生輕、中、重度醫(yī)院獲得性感染情況以及總發(fā)生率進(jìn)行記錄，給予統(tǒng)計學(xué)分析。
1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，以P
2 結(jié)果
由表一可知，研究組住院患者于我院就診過程中發(fā)生獲得性感染機(jī)率為9.00%，顯著低于對照組發(fā)生率為67.00%，兩組患者對比結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義（P
3 討論
患者在醫(yī)院進(jìn)行治療過程中發(fā)生感染且表現(xiàn)出相應(yīng)臨床癥狀的情況稱為醫(yī)院獲得性感染。研究表明[1]，隨著近年來抗生素類藥物在臨床廣泛使用，以及介入治療、放射性治療不斷發(fā)展，耐藥性菌株的發(fā)生率也隨之不斷上升，對感染患者臨床治療與預(yù)后帶來一定困難，因此，醫(yī)院獲得性感染已引起廣大醫(yī)務(wù)工作者高度重視。
住院患者微生物檢驗(yàn)控制感染具體措施為[2]：①對醫(yī)院各處環(huán)境進(jìn)行及時充分的細(xì)菌監(jiān)測，如手術(shù)室、病房、換藥室等，采用生物指標(biāo)控制法是最可靠的消毒滅菌指標(biāo)檢測方法，可準(zhǔn)確判斷環(huán)境消毒是否達(dá)標(biāo)；②定期總結(jié)分析患者進(jìn)行細(xì)菌藥敏監(jiān)測的結(jié)果，并及時向臨床醫(yī)師反饋；③對治療所需醫(yī)療器械及用品進(jìn)行細(xì)菌監(jiān)測，定期抽樣檢查并進(jìn)行無菌實(shí)驗(yàn)，待各項(xiàng)微生物檢驗(yàn)結(jié)果合格后方可于臨床治療中使用；④醫(yī)護(hù)人員手部細(xì)菌是重要的污染源，有研究表明，若醫(yī)護(hù)人員與患者接觸后未進(jìn)行洗手措施，則其手部帶菌率為100.00%，因此應(yīng)制定嚴(yán)格的手部清洗規(guī)范，并定期對醫(yī)護(hù)人員手部進(jìn)行細(xì)菌檢測；⑤患者若出現(xiàn)糖尿病、惡性腫瘤、燒傷以及骨髓移植等情況，則其機(jī)體免疫力較其他普通住院患者更低，因此屬于醫(yī)院獲得性感染高危人群，醫(yī)護(hù)人員應(yīng)對其進(jìn)行嚴(yán)密的微生物檢測，必要時常規(guī)應(yīng)用抗生素預(yù)防感染，盡量避免此類患者發(fā)生醫(yī)院獲得性感染。
綜上所述，對住院患者進(jìn)行臨床常規(guī)治療與護(hù)理措施的同時，給予微生物檢驗(yàn)措施，能夠有效預(yù)防患者醫(yī)院獲得性感染發(fā)生率，促進(jìn)患者盡快恢復(fù)健康，保障患者生活質(zhì)量及生命安全，值得臨床推廣應(yīng)用[3]。
摘要：目的 建立八珍顆粒微生物限度檢查方法并進(jìn)行驗(yàn)證。方法 按《中國藥典》2010年版一部的要求，對細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法和控制菌檢查方法進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果 八珍顆?？砂闯Ｒ?guī)法進(jìn)行微生物限度檢查。 結(jié)論 為保證藥品的微生物污染能被檢出，應(yīng)對藥品的微生物限度檢查進(jìn)行驗(yàn)證。
關(guān)鍵詞：八珍顆粒 微生物限度檢查 方法驗(yàn)證
八珍顆粒由黨參、炒白術(shù)、茯苓、炙甘草、當(dāng)歸、炒白芍、川芎、熟地黃八種中草藥組成，用于氣血兩虧，面色萎黃，食欲不振，四肢乏力，月經(jīng)過多。 為保證微生物限度檢查結(jié)果的可靠有效，應(yīng)對檢查進(jìn)行方法驗(yàn)證，保證藥品的微生物污染能被檢出。
1.試藥、儀器與培養(yǎng)基
1.1 試藥
八珍顆粒（寧波利華制藥有限公司，批號：130204）
1.2 儀器
電熱恒溫培養(yǎng)箱，電子天平，高壓蒸汽滅菌器。
1.3 實(shí)驗(yàn)用菌種
大腸埃希菌[CMCC〔B〕44 102]、金黃色葡萄球菌[CMCC〔B〕26 003]、枯草芽孢桿菌[CMCC〔B〕63 501]、白色念珠菌[CMCC〔F〕98 001]、黑曲霉[CMCC〔F〕98 003]，以上均為購自山東省食品藥品檢驗(yàn)所的第三代菌種。
1.4 培養(yǎng)基
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（1103162），玫瑰紅鈉培養(yǎng)基（110222），營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（101215），改良馬丁培養(yǎng)基（110211），pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液（1103232），北京三藥科技開發(fā)公司；膽鹽乳糖培養(yǎng)基（20130326），MUG培養(yǎng)基（20121126），青島高科園海博生物技術(shù)有限公司。
1.5 供試液制備
取供試品10g，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，混勻，作為1：10的供試液。
2.細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法驗(yàn)證
2.1 菌液制備
取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，34℃培養(yǎng)24小時，取白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，26℃培養(yǎng)24小時，上述培養(yǎng)物用0.9%氯化鈉溶液稀釋到50-100cfu/ml的菌懸液備用；取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，26℃培養(yǎng)7天，加入5ml含0.05%聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫，吸出孢子懸液至無菌試管，用含0.05%聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋到50-100cfu/ml的孢子懸液備用。
2.2 細(xì)菌計數(shù)方法驗(yàn)證[1]
2.2.1 試驗(yàn)組 取1：10的供試液1ml注入平皿中，再分別注入1ml 2.1中制備好的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌菌懸液，傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
2.2.2 菌液組 各取1ml 2.1中制備好的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌菌懸液，分別注入平皿中，傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
2.2.3 供試品對照組取1：10的供試液1ml注入平皿中，傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
2.3 霉菌及酵母菌計數(shù)方法驗(yàn)證[1]
2.3.1 試驗(yàn)組 取1：10的供試液1ml注入平皿中，再分別注入1ml 2.1中制備好的白色念珠菌菌懸液和黑曲霉孢子懸液，傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基。
2.3.2 菌液組 各取1ml 2.1中制備好的白色念珠菌菌懸液和黑曲霉孢子懸液，分別注入平皿中，傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基。
2.3.3 供試品對照組 取1：10的供試液1ml注入平皿中，傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基。
各試驗(yàn)菌分別進(jìn)行3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)，分別計算各試驗(yàn)菌每次實(shí)驗(yàn)的回收率。各組計數(shù)及試驗(yàn)組的菌數(shù)回收率見表1。
2.4 結(jié)果 表1顯示5株試驗(yàn)菌株的3次回收率均高于70%，八珍顆?？捎贸Ｒ?guī)法進(jìn)行細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)。
3 控制菌檢查方法驗(yàn)證[1]
3.1 菌液制備 取大腸埃希菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，34℃培養(yǎng)24小時，上述培養(yǎng)物用0.9%氯化鈉溶液稀釋到50-100cfu/ml的菌懸液備用。
3.2 供試品組 取1：10供試液10ml接種至100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中， 34℃培養(yǎng)24小時，取上述培養(yǎng)物0.2ml至5mlMUG培養(yǎng)基試管中，于5小時、24小時在366nm紫外光下觀察；沿培養(yǎng)管的管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液，觀察液面顏色。
3.3 試驗(yàn)組 取1：10供試液10ml、3.1中制備好的大腸埃希菌菌懸液1ml（50-100cfu）接種至100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，方法同3.2。
3.3 陽性對照實(shí)驗(yàn) 取3.1中制備好的大腸埃希菌菌懸液1ml（50-100cfu）至100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，方法同3.2。
3.4 陰性對照實(shí)驗(yàn) 取pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液10ml至100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，方法同3.2。
觀察結(jié)果見表2
3.5 結(jié)果 試驗(yàn)組檢出大腸埃希菌，表明八珍顆?？捎贸Ｒ?guī)法進(jìn)行控制菌檢查。
4 討論
通過方法驗(yàn)證，八珍顆?？梢圆捎贸Ｒ?guī)平皿法進(jìn)行細(xì)菌、霉菌和酵母菌計數(shù)，可用常規(guī)法進(jìn)行控制菌檢查。由于微生物限度檢查易受試驗(yàn)條件的影響，中國藥典規(guī)定要進(jìn)行方法驗(yàn)證，以確保在檢驗(yàn)條件下被污染的微生物能被檢出，因此所有藥品的微生物限度檢查均需進(jìn)行方法驗(yàn)證，確保所用方法適用于該藥品的微生物限度檢查。
【摘 要】對微生物傳感器快速測定法準(zhǔn)確度和精密度進(jìn)行測試。通過用微生物傳感器快速測定法和稀釋接種法對質(zhì)控樣及水樣測試比對，結(jié)果表明兩種測試方法的相對誤差、相對偏差無明顯差異，均符合國家標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控要求。微生物傳感器快速測定法克服了稀釋接種法耗時長的缺點(diǎn)，具有測定直接，操作簡便等優(yōu)勢。
【關(guān)鍵詞】BOD；微生物傳感器快速測定法；稀釋接種法
作為水體有機(jī)物污染的重要指標(biāo)之一的生化需氧量的測定，傳統(tǒng)方法是稀釋接種法，此法要在測定五日后出結(jié)果耗時長，且它的操作過程涉及稀釋、培養(yǎng)、滴定等步驟較復(fù)雜。而微生物傳感器快速測定法相對簡便快捷，本文就該兩種方法對質(zhì)控樣及實(shí)際水樣做了測定，對兩種方法測定結(jié)果進(jìn)行比較。
1.微生物傳感器快速測定法測定BOD原理
測定水中BOD的微生物傳感器是由氧電極和微生物菌膜構(gòu)成，其原理是當(dāng)含有飽和溶解氧的水樣進(jìn)入流通池中與微生物傳感器接觸，水樣中溶解性可生化降解的有機(jī)物受到微生物菌膜中菌種的作用，使擴(kuò)散到氧電極表面上氧的質(zhì)量減少。當(dāng)水樣中可生化降解的有機(jī)物向菌膜擴(kuò)散速度（質(zhì)量）達(dá)到恒定時，此時擴(kuò)散到氧電極表面上氧的質(zhì)量也達(dá)到恒定，因此產(chǎn)生了一個恒定電流。由于恒定電流與水樣中可生化降解的有機(jī)物濃度的差值與氧的減少量存在定量關(guān)系，據(jù)此可換算出水樣中生物化學(xué)需氧量。
2.稀釋接種法測BOD的原理
水樣在20℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5天，分別測定樣品培養(yǎng)前后的溶解氧，二者之差即為BOD5值，以mg/L表示。
3.校準(zhǔn)
稀釋接種法是通過測定水樣培養(yǎng)前后溶解氧的量來測定BOD值，而微生物傳感器是利用固定在傳感器上的菌膜和水中有機(jī)物作用所消耗的溶解氧進(jìn)行BOD的測定，水樣與菌膜接觸的時間、微生物生長周期以及活性的變化等都對測定結(jié)果有直接影響，所以每批次測量前必須用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對微生物傳感器進(jìn)行校準(zhǔn)并定期更換微生物膜。
4.測定結(jié)果討論
4.1質(zhì)控樣測定結(jié)果比較
分別用微生物傳感器快速測定法與稀釋接種法測定質(zhì)控樣1（22.7±3.4（mg/L）），同時平行測定七次實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1、表2。
4.1.1精密度、準(zhǔn)確度測試結(jié)果分析
由表1可知：濃度為22.7±3.4（mg/L）的樣品，微生物傳感器快速測定法得出平均值為23.64mg/L，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.7214mg/L，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.05%，相對誤差為4.14%。稀釋接種法得出平均值為23.78mg/L，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.3425mg/L，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.44%，相對誤差為4.76%。
4.1.2相對偏差
由表2可知用微生物傳感器快速測定法與稀釋接種法測得的BOD值，其相對偏差在0.21%—2.39%之間都在國家標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控要求的范圍以內(nèi)，且兩種方法測量的相對偏差和相對誤差無顯著差異。
4.2實(shí)際樣品測定結(jié)果比較
表3 兩種方法所測地表水各實(shí)際樣品結(jié)果比對
由表3數(shù)據(jù)可知，用微生物傳感器快速測定法與稀釋接種法測得實(shí)際樣品的BOD值，其相對偏差在0.00%-3.23%之間，都在國家標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控要求的范圍以內(nèi)，且兩種方法測量的相對偏差無顯著差異。
4.3小結(jié)
從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，用微生物傳感器快速測定法與稀釋接種法測量BOD的準(zhǔn)確度和精密度無顯著差異，且都在國家標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控允許的范圍內(nèi)，微生物傳感器快速測定法用時短，效率較高，藥品用量較小，取樣量較小，克服了稀釋接種法操作繁瑣、工作量大、試劑要求多等缺點(diǎn)，具有操作簡便、測量直接快速等優(yōu)點(diǎn)，且測定結(jié)果與稀釋接種法無顯著差異，有可推廣性。
