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開(kāi)篇：寫(xiě)作不僅是一種記錄，更是一種創(chuàng)造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的認(rèn)識(shí)，希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過(guò)程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
關(guān)鍵詞：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)；教學(xué)；學(xué)習(xí)興趣
為了探究生命現(xiàn)象、生命活動(dòng)的本質(zhì)，提高人們的生活水平和質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、農(nóng)林學(xué)、化學(xué)、生物材料科學(xué)、醫(yī)療器械、國(guó)防軍事科學(xué)等許多科學(xué)研究中起到了非常重要的作用。歷史上人類(lèi)的許多疾病研究均是通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)獲得突破的。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在生命科學(xué)研究中，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的課題占到60%以上。100多年來(lái)，諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)研究成果有67.5%是使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獲得的[1]。因此，上世紀(jì)五十年代，在現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展下誕生了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)這門(mén)學(xué)科。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)是以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為對(duì)象，對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制，并將培育的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用于生命科學(xué)研究的一門(mén)綜合性學(xué)科[2]。
生物（醫(yī)學(xué)）工程專(zhuān)業(yè)是生物科學(xué)、醫(yī)學(xué)和工程學(xué)交叉融合的一個(gè)專(zhuān)業(yè)，具有理、工、醫(yī)交叉學(xué)科特色。本專(zhuān)業(yè)要求學(xué)生具有較全面的知識(shí)結(jié)構(gòu)，因此，在本科生教學(xué)環(huán)節(jié)開(kāi)設(shè)了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)這門(mén)課程。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)是生物（醫(yī)學(xué)）工程專(zhuān)業(yè)的一門(mén)專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課。簡(jiǎn)單說(shuō)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)是專(zhuān)門(mén)研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)化和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的，它涉及到生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。一方面，隨著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的發(fā)展，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種逐漸標(biāo)準(zhǔn)化和多樣化；另一方面，生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提出更高的要求，促使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)不斷發(fā)展和提高。目前，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被稱(chēng)為“最精密的科學(xué)儀器”，在生物（醫(yī)學(xué)）和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮了重要的作用。為了能夠讓學(xué)生們更加深入的認(rèn)識(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的重要性，需要實(shí)時(shí)思考實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課程教學(xué)方式，建立符合自身?xiàng)l件和要求的教學(xué)體系。
1. 教學(xué)過(guò)程中引入“3R”原則
在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課程中，動(dòng)物福利和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，為了保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，《動(dòng)物福利法》提出了“3R”原則，3R是指Replacement（替代）、Reduction（減少）和Refinement（優(yōu)化），“3R”原則的主要目的是采用其他手段代替實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，盡量減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用量，用其它實(shí)驗(yàn)材料如生物醫(yī)用材料、細(xì)胞等代替實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行科學(xué)研究或教學(xué)，設(shè)法改良實(shí)驗(yàn)方法減少動(dòng)物疼痛和不安。
國(guó)際上普遍認(rèn)同將“3R”原則引入到“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)”教學(xué)中[3]。因此，在講課的過(guò)程中可以采用下列幾種方式：1）替代。利用多種教學(xué)方式代替單一模式教學(xué)。課堂上，可以通過(guò)展示圖片、播放錄像或影片、展示科研論文、互動(dòng)討論等方式與理論講解相結(jié)合讓學(xué)生們認(rèn)識(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的不同飼養(yǎng)環(huán)境、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物操作的技術(shù)要點(diǎn)、如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物認(rèn)知實(shí)驗(yàn)等。這樣就可以代替實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，同時(shí)減少了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用數(shù)量。2）減少。在理論課和實(shí)驗(yàn)課教授時(shí)，可以適當(dāng)?shù)臏p少理論課的學(xué)時(shí)，把理論知識(shí)進(jìn)行整合、調(diào)整，有重點(diǎn)的針對(duì)本學(xué)科的特點(diǎn)進(jìn)行講授。3）優(yōu)化。在考核方面，減少筆試在考核中的比重，加大學(xué)生們平時(shí)的實(shí)際操作能力訓(xùn)練和考核比重，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課程設(shè)計(jì)和教學(xué)評(píng)價(jià)體系。
2. 擴(kuò)充實(shí)驗(yàn)課課時(shí)安排
由于本課程是我院新安排的課程，目前對(duì)本課程安排的課時(shí)相對(duì)較少，僅有理論課時(shí)，而缺少一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課時(shí)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)是一門(mén)應(yīng)用性較強(qiáng)的課程。教學(xué)的主要目的是通過(guò)實(shí)際動(dòng)手操作，讓學(xué)生們認(rèn)識(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，懂得如何才能培養(yǎng)出標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，怎樣利用他們進(jìn)行科學(xué)研究，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為人類(lèi)的健康帶來(lái)福音。因此，需要在教學(xué)的同時(shí)進(jìn)行相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)課或?qū)嵺`課，讓學(xué)生們?cè)趯?shí)驗(yàn)課上認(rèn)識(shí)不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，與理論課相呼應(yīng)，通過(guò)實(shí)際觀察驗(yàn)證理論課上的科學(xué)理論。另外，讓同學(xué)們能夠進(jìn)行相應(yīng)的實(shí)際動(dòng)手操作，如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抓握、固定、標(biāo)記等簡(jiǎn)單的操作，必要的時(shí)候可以安排動(dòng)物解剖、測(cè)定分析相應(yīng)的生物學(xué)指標(biāo)，使學(xué)生們切身感受到動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的重要性，真正學(xué)到一些實(shí)驗(yàn)技術(shù)，達(dá)到教學(xué)目的。
3. 將科學(xué)研究過(guò)程融入教學(xué)過(guò)程之中
王生存等[4]通過(guò)問(wèn)卷調(diào)查發(fā)現(xiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)課感興趣的學(xué)生能達(dá)到82.5%，無(wú)謂心理的學(xué)生只有10.8%，其他的學(xué)生是因?yàn)楹ε隆⒖謶謱?shí)驗(yàn)動(dòng)物而產(chǎn)生畏懼心理，并不是沒(méi)有興趣，只要幫助他們克服了心理障礙，他們同樣會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生興趣。
基于此，我們可以把動(dòng)物實(shí)驗(yàn)科學(xué)研究融入到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)中，在教學(xué)過(guò)程中，可以把老師平時(shí)進(jìn)行的科學(xué)研究過(guò)程和成果與同學(xué)們一起分享，同時(shí)在實(shí)驗(yàn)條件允許、經(jīng)費(fèi)充足的情況下可以安排設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的行為學(xué)研究，如大鼠迷宮實(shí)驗(yàn)、位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)、條件反射實(shí)驗(yàn)等等一系列有趣的實(shí)驗(yàn)方法和測(cè)定技術(shù)，提高學(xué)生們對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的認(rèn)識(shí)。加強(qiáng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)課程，讓本課程教學(xué)實(shí)踐與大學(xué)生科研訓(xùn)練計(jì)劃（SRTP）相結(jié)合，確定不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模蓪W(xué)生們自行選擇合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，進(jìn)行分組、材料和試劑的準(zhǔn)備、實(shí)驗(yàn)期間對(duì)動(dòng)物的觀察、記錄等相關(guān)注意事項(xiàng)、實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死、生物樣本的采集、保存，結(jié)果的測(cè)定和分析，書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告等。這樣，學(xué)生們?cè)趯?shí)驗(yàn)和科研過(guò)程中就會(huì)更加意識(shí)到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人類(lèi)一樣也是一種具有行為、認(rèn)知和神經(jīng)反應(yīng)能力的一種動(dòng)物，具有寵物的一些共性，我們應(yīng)該倍加的保護(hù)、愛(ài)護(hù)他們，讓他們更好的為人類(lèi)服務(wù)。
4. 結(jié)合課程內(nèi)容使教學(xué)過(guò)程系統(tǒng)化
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)是一門(mén)系統(tǒng)的課程，包括與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)的遺傳學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、生態(tài)學(xué)、環(huán)境學(xué)、微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)、人類(lèi)疾病、法律法規(guī)等多方面的知識(shí)，近年發(fā)展的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和克隆動(dòng)物將分子生物學(xué)知識(shí)也引入了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)過(guò)程中，使得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)涉及的知識(shí)面更寬、更全。其實(shí)，不論是環(huán)境學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)，還是生態(tài)學(xué)、微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué)等等都是緊緊圍繞著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生產(chǎn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的需求展開(kāi)的[5]。教師在教學(xué)過(guò)程中需要將這些內(nèi)容聯(lián)系貫穿起來(lái)，以使學(xué)生們?cè)谏险n期間不覺(jué)得本門(mén)課程知識(shí)點(diǎn)多、散、亂，讓學(xué)生們充分認(rèn)識(shí)到這門(mén)課程的重要性，激發(fā)他們對(duì)這門(mén)課程的學(xué)習(xí)興趣和對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的愛(ài)心，使他們愛(ài)上實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，愛(ài)上這門(mén)課程。
在講授理論內(nèi)容時(shí)，課程設(shè)計(jì)緊緊圍繞實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)化為主線，緊緊圍繞著生產(chǎn)和繁殖出合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，分別講授如何控制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的環(huán)境設(shè)施、營(yíng)養(yǎng)、遺傳等方面，實(shí)施動(dòng)物質(zhì)量控制，并據(jù)此制定的相應(yīng)的法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)課教學(xué)時(shí)，課程設(shè)計(jì)圍繞保護(hù)動(dòng)物福利的原則，實(shí)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取、固定、給藥方法、麻醉及處死等方面的技術(shù)操作時(shí)，要從內(nèi)心真正關(guān)愛(ài)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，盡量減少和減輕他們的疼痛感和痛苦感。
總之，教師在教學(xué)過(guò)程中需要結(jié)合學(xué)科特點(diǎn)深入分析教學(xué)過(guò)程中存在的問(wèn)題和不足，為滿足學(xué)科需求進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整和改革，創(chuàng)建一攬子計(jì)劃來(lái)適應(yīng)現(xiàn)代教學(xué)的要求。教學(xué)過(guò)程中，以學(xué)生為本，調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，引導(dǎo)他們的學(xué)習(xí)興趣，以使學(xué)生們能夠更好的掌握相關(guān)知識(shí)。
[參考文獻(xiàn)]
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【摘要】
對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)進(jìn)行了大膽的改革，提出了該課程應(yīng)注重理論與實(shí)踐并重的指導(dǎo)思想。通過(guò)改進(jìn)教學(xué)方法，探索適合本學(xué)科的教學(xué)模式；通過(guò)加強(qiáng)實(shí)踐操作技能的教育，提高了學(xué)生的動(dòng)手操作能力；通過(guò)加強(qiáng)考試考核的改革，培養(yǎng)“高分高能型”的人才。
【關(guān)鍵詞】 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué) 中醫(yī)藥院校 教學(xué)改革
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)是一門(mén)研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的綜合性新興學(xué)科，它融合了生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)學(xué)、遺傳學(xué)等諸多學(xué)科的知識(shí)，具有很強(qiáng)的綜合性和交叉性，同時(shí)它的發(fā)展又推動(dòng)了基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)和中醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展，對(duì)科學(xué)研究尤其是生命科學(xué)研究起著越來(lái)越重要的作用，因而受到了相關(guān)部門(mén)的高度重視，也逐步步入了高等醫(yī)學(xué)院校的課堂，是中醫(yī)藥院校多數(shù)專(zhuān)業(yè)研究生必修的一門(mén)基礎(chǔ)課，也是部分中醫(yī)、中藥、藥學(xué)、生物工程、中西醫(yī)結(jié)合專(zhuān)業(yè)本科生的選修課程［1］。我院在研究生和本科生中開(kāi)設(shè)這門(mén)課程也有近十年的歷史，這對(duì)于我院普及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的有關(guān)知識(shí)和提高學(xué)生的動(dòng)手能力起到了一定的推動(dòng)作用。但由于教師隊(duì)伍的不專(zhuān)業(yè)（多為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心的工作人員或病理、生理教研室的教師），加之教學(xué)大綱及教學(xué)內(nèi)容的不統(tǒng)一、考核辦法的過(guò)時(shí)以及該課程是選修課的緣故，使得教學(xué)效果不好，流于形式化，達(dá)不到預(yù)期的目的，對(duì)學(xué)生動(dòng)手能力的培養(yǎng)也就無(wú)從談起［2］。為此，筆者在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物教學(xué)實(shí)踐中大膽進(jìn)行教學(xué)改革，更新教學(xué)觀念，改革教學(xué)模式，改進(jìn)教學(xué)方法與考試考核辦法，在我院中西醫(yī)結(jié)合專(zhuān)業(yè)研究生及中醫(yī)、中藥、藥學(xué)等本科班教學(xué)中取得了較好的效果。
1 更新教育觀念，確立了理論與實(shí)踐并重的指導(dǎo)思想
在以前的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)過(guò)程中，我們基本上以講授實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的基本理論為主，忽視了實(shí)驗(yàn)操作和動(dòng)手能力的培養(yǎng)，學(xué)完后即進(jìn)行理論考試，與當(dāng)時(shí)開(kāi)設(shè)這門(mén)課程主要為提高學(xué)生綜合素質(zhì)和科研能力的初衷不符。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)是一門(mén)實(shí)踐性較強(qiáng)的學(xué)科，單純講授理論對(duì)于以往很少接觸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)生來(lái)說(shuō)，往往非常抽象，效果也不好。因此，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)過(guò)程中，有必要更新教學(xué)觀念，確立以理論與實(shí)踐并重的指導(dǎo)思想，改過(guò)去的以理論學(xué)習(xí)為主為現(xiàn)在的以理論與實(shí)踐相結(jié)合為重點(diǎn)，改過(guò)去僅重視課堂學(xué)習(xí)為現(xiàn)在還重視實(shí)踐操作，采用更加行之有效的教學(xué)方法逐步提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的教學(xué)水平和教學(xué)質(zhì)量，為學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室和走上社會(huì)工作崗位打下良好的基礎(chǔ)。在具體實(shí)施過(guò)程中，要緊緊圍繞提高學(xué)生動(dòng)手能力為目的這個(gè)中心，制訂切實(shí)可行的教學(xué)計(jì)劃，適當(dāng)減少理論課時(shí)數(shù)，增加實(shí)驗(yàn)課時(shí)數(shù)，使實(shí)驗(yàn)課時(shí)占到總課時(shí)的40%左右。同時(shí)豐富教學(xué)內(nèi)容，使實(shí)驗(yàn)教學(xué)不單純停留在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿、保定、麻醉、采血、給藥等基本操作上，而是把科學(xué)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、選擇合適動(dòng)物復(fù)制中醫(yī)證候動(dòng)物模型進(jìn)行相關(guān)的中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)等綜合項(xiàng)目放在學(xué)生的實(shí)驗(yàn)課上，確保學(xué)生動(dòng)手能力的提高。
2 豐富教學(xué)內(nèi)容和改革教學(xué)方法，探索適合本學(xué)科特點(diǎn)的新的教學(xué)模式
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的主要內(nèi)容包括如何培養(yǎng)出高質(zhì)量的符合各種實(shí)驗(yàn)要求的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以及如何利用這些符合要求的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合理地設(shè)計(jì)、開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)并獲得準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。對(duì)于中醫(yī)藥院校的畢業(yè)生，他們未來(lái)大多是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用者。因此，對(duì)如何培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的內(nèi)容可略講，而對(duì)如何利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容要詳講。在教學(xué)內(nèi)容的選擇上根據(jù)學(xué)生的具體情況要有所側(cè)重。對(duì)研究生來(lái)說(shuō)，重點(diǎn)要講授實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇和應(yīng)用、動(dòng)物模型的復(fù)制技術(shù)、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果的因素及其控制、相關(guān)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法、最新的法規(guī)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展，增加學(xué)生實(shí)驗(yàn)動(dòng)手的機(jī)會(huì)，提高實(shí)驗(yàn)課程的深度和難度；對(duì)本科生來(lái)說(shuō)，重點(diǎn)要提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，著重講述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的新技術(shù)、新進(jìn)展（轉(zhuǎn)基因技術(shù)、克隆技術(shù)、基因敲除技術(shù)）、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般操作技術(shù)等。堅(jiān)持以基礎(chǔ)知識(shí)為根本，側(cè)重相關(guān)知識(shí)、前沿知識(shí)的原則，通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)知識(shí)的學(xué)習(xí)，使學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的教學(xué)內(nèi)容和方法，對(duì)其歷史、現(xiàn)狀、前沿等方面的知識(shí)有整體的了解。在教學(xué)過(guò)程中根據(jù)不同的教學(xué)內(nèi)容采用不同的教學(xué)方法。除傳統(tǒng)的教學(xué)方法以外，還采用演示法、參觀法、實(shí)驗(yàn)法等［3］，以提高教學(xué)效果。
2.1 演示法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的內(nèi)容十分豐富，在信息化的今天，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課堂教學(xué)就不能再停留在單純的黑板加粉筆上，而應(yīng)該充分利用現(xiàn)代化的教學(xué)輔助手段，不然的話會(huì)造成教師努力講，學(xué)生認(rèn)真聽(tīng)，但收效不大的現(xiàn)象，為此，教師在講授這門(mén)課程時(shí)，不能一味地采用講授、描述等傳統(tǒng)方法幫助學(xué)生理解和記憶，還應(yīng)靈活運(yùn)用各種現(xiàn)代化的教學(xué)輔助手段，如投影、幻燈、多媒體課件等，把要講的內(nèi)容形象化，視、聽(tīng)并用，以增強(qiáng)學(xué)生的感性認(rèn)識(shí)，同時(shí)又有助于調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。如介紹實(shí)驗(yàn)小鼠的常用品種、品系時(shí)，可以將KM小鼠、DBA小鼠、C57BL/6小鼠、615小鼠的圖片通過(guò)多媒體展示出來(lái)，并結(jié)合圖片介紹它們的生物學(xué)特性及在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用，使學(xué)生能形象、直觀地理解和記憶，加深對(duì)不同品種、品系小鼠的認(rèn)識(shí)，改變過(guò)去認(rèn)為實(shí)驗(yàn)小鼠就只有單純白色，而沒(méi)有黑色、野生色、灰色等的錯(cuò)誤觀念；再如介紹該學(xué)科較前沿的轉(zhuǎn)基因和克隆技術(shù)時(shí)，也可以通過(guò)多媒體向?qū)W生展示嵌合體小鼠、綠色熒光小鼠、移植技術(shù)使身上能長(zhǎng)出人耳朵的裸鼠及動(dòng)物無(wú)性繁殖（即克隆）的動(dòng)物，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)本課程的興趣。
2.2 參觀法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的環(huán)境控制是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)一個(gè)十分重要的內(nèi)容，但在講授屏障環(huán)境時(shí)，涉及到屏障環(huán)境的溫、濕度調(diào)節(jié)系統(tǒng)、通風(fēng)凈化系統(tǒng)、消毒隔離系統(tǒng)以及屏障環(huán)境系統(tǒng)內(nèi)要做到人流、物流、動(dòng)物流“三流”分開(kāi)時(shí)，在課堂上講，教師往往難以講清楚，學(xué)生也難以聽(tīng)懂。如能根據(jù)教學(xué)目的，組織學(xué)生到實(shí)地參觀并講解，那么效果將十分好。屏障系統(tǒng)除感染性實(shí)驗(yàn)室以外，一般多為正壓，學(xué)生通過(guò)實(shí)地參觀進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)開(kāi)啟每一扇門(mén)迎面吹來(lái)的氣流就可以切身感受到屏障環(huán)境內(nèi)不同區(qū)域存在著的壓差；通過(guò)實(shí)地參觀，可以更好地理解屏障環(huán)境要進(jìn)行人、物及動(dòng)物分流的重要性，了解消毒隔離系統(tǒng)的操作規(guī)程。為今后走上工作崗位，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作掌握第一手感性資料。
2.3 實(shí)驗(yàn)法在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，教師應(yīng)盡量以學(xué)生為主體，自己僅充當(dāng)指導(dǎo)與協(xié)作者，讓學(xué)生多動(dòng)手、動(dòng)腦，以激發(fā)學(xué)生的興趣，培養(yǎng)其知難而進(jìn)的勇氣。讓其獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)的各個(gè)步驟，從而提高學(xué)生學(xué)習(xí)這門(mén)課程的積極性和動(dòng)手能力。對(duì)于諸如捉拿、保定、麻醉、采血、給藥等基本操作技術(shù)，在進(jìn)行示范之后，要讓學(xué)生親手操作，對(duì)于學(xué)生因?qū)?dòng)物抓得太緊引起動(dòng)物窒息死亡和灌胃灌到氣管里導(dǎo)致動(dòng)物死亡等的錯(cuò)誤操作要及時(shí)予以糾正；對(duì)于不同動(dòng)物為何要采取某種采血和給藥的方式。如小鼠采血為什么多采用尾靜脈和摘眼球采血而不用心臟采血，主要原因是因?yàn)閯?dòng)物小，心率太快，無(wú)法進(jìn)行心臟采血，讓學(xué)生在實(shí)踐中找答案。這樣在教師指導(dǎo)下，既能讓學(xué)生熟練掌握實(shí)驗(yàn)技術(shù)，培養(yǎng)實(shí)際操作技能，又能對(duì)一些實(shí)驗(yàn)方法有更深的了解。
當(dāng)然，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)除了以上方法以外，還可以采用討論或問(wèn)題式教學(xué)方法。倡導(dǎo)以教師為主導(dǎo)、學(xué)生為主體、形式多樣、生動(dòng)活潑的師生雙向交流、教學(xué)相長(zhǎng)的教學(xué)模式，積極營(yíng)造“平等、和諧、求知、創(chuàng)新”的課堂教學(xué)氛圍，充分調(diào)動(dòng)教與學(xué)的積極性［4］。如對(duì)某抗腫瘤藥物的實(shí)驗(yàn)研究可以同學(xué)生一起討論為什么要選擇這種動(dòng)物（如裸鼠）而不選擇別的動(dòng)物，同時(shí)還可以對(duì)造模接種的部位、給藥的方式及藥效的評(píng)價(jià)等進(jìn)行探討，讓學(xué)生對(duì)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)研究從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)開(kāi)始到實(shí)驗(yàn)結(jié)束全過(guò)程有一個(gè)全面的認(rèn)識(shí)，為全面提高學(xué)生素質(zhì)打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
3 加強(qiáng)考試考核改革，培養(yǎng)“高分高能型”的科技人才
多年來(lái)，在我國(guó)人才培養(yǎng)中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)學(xué)習(xí)成績(jī)很好，畢業(yè)后工作能力一般的所謂“高分低能型”人才現(xiàn)象，造成這種“高分低能”現(xiàn)象的主要原因是考試考核重理論輕實(shí)踐、重分?jǐn)?shù)輕能力的結(jié)果。對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)同樣存在這種情況，學(xué)生通過(guò)該課程的學(xué)習(xí)是否對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的基本知識(shí)有比較系統(tǒng)的了解，能否應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的基本知識(shí)去分析和解決問(wèn)題，能否熟練地開(kāi)展有關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，能否對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格的控制和科學(xué)的處理，既能反映學(xué)生“學(xué)”的效果，也能反映教師“教”的水平。以前多是通過(guò)理論考試，根據(jù)學(xué)生的分?jǐn)?shù)來(lái)評(píng)定學(xué)生“學(xué)”的效果和教師“教”的水平。不可否認(rèn)，這樣的評(píng)價(jià)方法有一定的科學(xué)性、合理性和可操作性，但對(duì)像實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)這樣一門(mén)實(shí)踐性較強(qiáng)的學(xué)科就有一定的局限性。為了避免出現(xiàn)“高分低能”現(xiàn)象，培養(yǎng)“高分高能”人才，在本學(xué)科的教學(xué)改革過(guò)程中，加強(qiáng)了考核辦法的改革，對(duì)理論考試的基本概念部分可通過(guò)問(wèn)答、思考、判斷題等形式考查；對(duì)綜合應(yīng)用部分可提出某個(gè)科研設(shè)想，由學(xué)生自行設(shè)計(jì)，并根據(jù)其設(shè)計(jì)方案評(píng)分，同時(shí)加強(qiáng)實(shí)踐基本操作考核，將實(shí)驗(yàn)成績(jī)單列，并將實(shí)踐動(dòng)手能力考核成績(jī)提高到該門(mén)課程總成績(jī)的40%。綜合評(píng)定學(xué)生的學(xué)習(xí)效果。
盡管在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)改革方面做了一些工作，但仍存在許多亟待探索和解決的課題，如本課程內(nèi)容及相關(guān)基礎(chǔ)課（生理、病理、藥理實(shí)驗(yàn)課）合并的改革；編寫(xiě)全國(guó)中醫(yī)藥院校統(tǒng)一的教科書(shū)；建立專(zhuān)業(yè)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)隊(duì)伍；開(kāi)設(shè)教師進(jìn)修培訓(xùn)基地，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)科建設(shè)等。我們期望中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物教學(xué)工作能夠得到教育行政管理部門(mén)及廣大實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技工作者的高度關(guān)注。
參考文獻(xiàn)
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1醫(yī)院注重生物醫(yī)學(xué)研究與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利協(xié)調(diào)發(fā)展的具體措施
歐美一些發(fā)達(dá)國(guó)家非常重視實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的福利和保護(hù),制定了一系列相關(guān)的政策、法規(guī)和措施,并有專(zhuān)門(mén)的組織機(jī)構(gòu)監(jiān)督并強(qiáng)制執(zhí)行。在我國(guó),由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)發(fā)展起步較晚,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的關(guān)愛(ài)和福利才剛剛引起人們的關(guān)注[1]。我院是一所國(guó)內(nèi)外著名的現(xiàn)代化大型綜合性醫(yī)院,“醫(yī)、教、研”發(fā)展水平在全國(guó)同類(lèi)醫(yī)院中處于領(lǐng)先地位,醫(yī)學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用面廣,使用量大。長(zhǎng)期以來(lái),醫(yī)院黨委十分重視醫(yī)學(xué)科研人員人文素養(yǎng)的培養(yǎng)和提高,重視實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)知識(shí)的普及和倫理教育,重視保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的福利,注重生物醫(yī)學(xué)研究與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的協(xié)調(diào)發(fā)展。
體現(xiàn)在:①投資新建和改建了多種符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和使用設(shè)施,購(gòu)置了適合不同種類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的標(biāo)準(zhǔn)化籠具和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備;②在屏障環(huán)境內(nèi)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物專(zhuān)門(mén)設(shè)置了背景音樂(lè),周期性定時(shí)自動(dòng)播放,一定程度上滿足了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的心理需要。另外還設(shè)置了緩控動(dòng)物照明系統(tǒng),降低了照度變化對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常生理活動(dòng)的影響程度[2];③自行設(shè)計(jì)研制了國(guó)內(nèi)第一臺(tái)內(nèi)環(huán)境符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的、最多可同時(shí)容納8人同時(shí)操作的、內(nèi)裝無(wú)影燈的多功能大型SPF級(jí)大、小鼠實(shí)驗(yàn)(手術(shù))臺(tái),自行設(shè)計(jì)研制了國(guó)內(nèi)第一臺(tái)可移動(dòng)、升降、前后傾翻、設(shè)置有可拆卸式輸液架、固定螺桿、手術(shù)器械擺放臺(tái)、雙向體液導(dǎo)出口和更適合動(dòng)物躺臥的U型臺(tái)面的大動(dòng)物手術(shù)臺(tái)。此手術(shù)臺(tái)設(shè)計(jì)科學(xué)、合理,符合動(dòng)物體型及解剖特性,使用方便;④建立和完善了詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、防(檢)疫、質(zhì)控及使用標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程(SOP)。詳細(xì)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)、管理、運(yùn)輸、保定、麻醉、實(shí)驗(yàn)操作、保護(hù)動(dòng)物隱私及尊嚴(yán)、術(shù)中術(shù)后護(hù)理、安樂(lè)死、尸體焚燒、防疫滅病、重復(fù)使用等福利內(nèi)容,并嚴(yán)格執(zhí)行。在國(guó)內(nèi)首先提出建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體系突發(fā)事件的各項(xiàng)應(yīng)急預(yù)案,確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量、生命及可持續(xù)性。⑤大力加強(qiáng)科技人員有關(guān)科學(xué)知識(shí)普及和技術(shù)培訓(xùn),對(duì)每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇、數(shù)量確定、實(shí)驗(yàn)方案、實(shí)驗(yàn)步驟均由動(dòng)物實(shí)驗(yàn)科與實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行討論。到目前為止,全院有400余名科技干部參加了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)知識(shí)培訓(xùn),并取得了由江蘇省科學(xué)技術(shù)廳統(tǒng)一頒發(fā)的江蘇省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員上崗證書(shū),是江蘇省參加培訓(xùn)并取得上崗證最多的單位。⑥積極開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)“3R”研究,在國(guó)內(nèi)首先建立了一項(xiàng)用細(xì)胞學(xué)方法替代實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行細(xì)菌致病性試驗(yàn)的方法;⑦建造了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紀(jì)念碑,主碑為青灰色大理石,碑文為雕刻的綠色“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紀(jì)念碑”;副碑為米黃色大理石,碑文為紅色的“紀(jì)念為生命科學(xué)研究而獻(xiàn)身的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物”。紀(jì)念碑掩映在綠草、鮮花、翠竹叢中,既具有濃郁的人文氣息,又飽含深刻的警示及教育意義;⑧在國(guó)內(nèi)首創(chuàng)設(shè)計(jì)制作了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)人類(lèi)貢獻(xiàn)的大型噴繪展板并在科室展出。
展板以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)生物醫(yī)學(xué)發(fā)展所作貢獻(xiàn)為主線,以人類(lèi)與動(dòng)物共同擁有這個(gè)地球,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是人類(lèi)健康的階梯,關(guān)愛(ài)動(dòng)物就是關(guān)愛(ài)我們自己為主題,選取了從1628年哈維(WilliamHarvey)利用動(dòng)物發(fā)現(xiàn)血液循環(huán),從而把生理學(xué)確定為一門(mén)科學(xué)開(kāi)始,到19世紀(jì)認(rèn)識(shí)糖尿病的本質(zhì),20世紀(jì)抗生素及磺胺藥物的發(fā)明,單克隆抗體的發(fā)現(xiàn)及體細(xì)胞克隆成功,再到目前正在進(jìn)行的生命科學(xué)研究前沿領(lǐng)域“功能基因組學(xué)”的研究等若干醫(yī)學(xué)發(fā)展史上具有“里程碑”式的飛躍都離不開(kāi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為內(nèi)容,從成果介紹、科學(xué)家本人圖片到利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類(lèi)及實(shí)驗(yàn)過(guò)程,圖文并茂,栩栩如生,通俗易懂。豐富多彩的畫(huà)面配以具有層次變化的草綠色背景,與周?chē)G化帶及相關(guān)建筑協(xié)調(diào)配合,交相輝映,給人以全新的視覺(jué)感受,設(shè)計(jì)新穎,創(chuàng)意獨(dú)特。不僅美化了環(huán)境,而且還具有重要的科普及倫理教育意義,充分體現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)生命科學(xué)發(fā)展的重要性以及關(guān)愛(ài)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、重視實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的重要意義。
2醫(yī)院注重生物醫(yī)學(xué)研究與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利協(xié)調(diào)發(fā)展取得成效
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利工作的好壞,不僅反映了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)科建設(shè)的成就,而且影響著生物醫(yī)學(xué)研究成果的準(zhǔn)確性、社會(huì)性及公眾的認(rèn)可程度,將動(dòng)物福利融入生物醫(yī)學(xué)研究中,不僅是知識(shí)工程的構(gòu)建,也是對(duì)人才工程的貢獻(xiàn)[3]。在醫(yī)院各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)的關(guān)心支持下,我院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)科建設(shè)和保障服務(wù)穩(wěn)步發(fā)展,形成了從本學(xué)科工作人員到醫(yī)學(xué)研究人員人人關(guān)愛(ài)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的良好氛圍,科室內(nèi)設(shè)備先進(jìn),環(huán)境優(yōu)美,設(shè)施建設(shè)及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),順利通過(guò)了軍地雙方歷次組織的檢查驗(yàn)收,是“江蘇省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(清潔級(jí)大、小鼠)供應(yīng)基地”(1998)、“中國(guó)人民醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心”(1994)及國(guó)內(nèi)首家“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理及科普教育基地”(2004)。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)科領(lǐng)域以第一完成單位獲國(guó)家科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)、江蘇省科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)、軍隊(duì)科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)各一項(xiàng)、軍隊(duì)科技進(jìn)步三、四等獎(jiǎng)四項(xiàng)的科研成果,配合醫(yī)院及其他單位完成或正在承擔(dān)國(guó)家“863”、“973”、國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目、軍隊(duì)及省部級(jí)重大科研項(xiàng)目多項(xiàng),已成為醫(yī)院全面可持續(xù)科學(xué)發(fā)展的重要支撐條件之一,促進(jìn)了我國(guó)生物醫(yī)學(xué)研究事業(yè)的發(fā)展。
關(guān)鍵詞：醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)；教學(xué)內(nèi)容；教學(xué)方法；考核評(píng)價(jià)機(jī)制
中圖分類(lèi)號(hào)：G424文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1674-9324（2018）02-0272-02
高等醫(yī)學(xué)院校《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》是碩士研究生必修課程之一，它是進(jìn)行基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的基本課程。據(jù)相關(guān)調(diào)查顯示，生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中60—70%的課題要選用合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行相關(guān)研究；而藥理學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)實(shí)驗(yàn)和外科學(xué)實(shí)驗(yàn)等超過(guò)70%科研研究領(lǐng)域需要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物參與實(shí)驗(yàn)[1-2]；此外，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物廣泛應(yīng)用于教學(xué)培訓(xùn)、醫(yī)學(xué)研究、藥品、生物制品、食品等功能及安全性評(píng)價(jià)領(lǐng)域[3-4]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)作為一門(mén)獨(dú)特的學(xué)科對(duì)生命科學(xué)領(lǐng)域研究起著越來(lái)越重要的作用。
《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》課程如此重要，因此，如何做好這門(mén)課程的教學(xué)工作給授課教師提出了更高的要求。結(jié)合近年來(lái)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在使用過(guò)程中出現(xiàn)的一些問(wèn)題，我們對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課教學(xué)從調(diào)整教學(xué)內(nèi)容、改進(jìn)教學(xué)方法、改革考核方式等方面做出相應(yīng)的改革。經(jīng)過(guò)兩輪的教學(xué)改革取得了良好的教學(xué)效果，充分調(diào)動(dòng)了學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性和求知欲，培養(yǎng)了學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)、科學(xué)的學(xué)習(xí)態(tài)度，切實(shí)提高了學(xué)生的基本操作技能，激發(fā)了學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性，培養(yǎng)了從發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題到解決問(wèn)題的科學(xué)研究思路，增強(qiáng)了團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí)及能力，全面調(diào)高了研究生教學(xué)質(zhì)量。在此，我們結(jié)合近2年對(duì)碩士研究生《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》的教學(xué)改革情況，對(duì)我校遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)本門(mén)課程的教學(xué)進(jìn)行相關(guān)教學(xué)總結(jié)，希望進(jìn)一步促進(jìn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)改革。
一、優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容，理論與實(shí)驗(yàn)整合優(yōu)化
摒棄“灌輸式”教育模式，將20學(xué)時(shí)的理論教學(xué)降至16學(xué)時(shí)。我們充分利用學(xué)校研究生網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)、理論課程其他相關(guān)教學(xué)內(nèi)容課件以“學(xué)習(xí)筆記”形式進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)教學(xué)。我們將教材中所列10個(gè)章節(jié)理論教學(xué)分為五大專(zhuān)題進(jìn)行教學(xué)：專(zhuān)題一，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生命科學(xué)領(lǐng)域重要作用；專(zhuān)題二，動(dòng)物福利與動(dòng)物倫理；專(zhuān)題三，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本操作技術(shù)；專(zhuān)題四，人類(lèi)疾病動(dòng)物模型；專(zhuān)題五，基因工程動(dòng)物與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的建立。這五大模塊從不同的角度展示了作為醫(yī)學(xué)生應(yīng)具備的基本知識(shí)。而實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容，則由16學(xué)時(shí)增為32學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)教學(xué)將分為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)這種“三步法”教學(xué)來(lái)與理論相呼應(yīng)，進(jìn)一步將理論融入到實(shí)踐中，在嚴(yán)格遵循“3R”原則的前提下提高學(xué)生的動(dòng)手操作能力。我們本著“不放棄教材，但不局限于教材”的原則，根據(jù)專(zhuān)題實(shí)驗(yàn)的需要，精選教材中相關(guān)的章節(jié)進(jìn)行講述；對(duì)于教材中沒(méi)有及時(shí)更新或沒(méi)有詳細(xì)闡述的部分，借助互聯(lián)網(wǎng)資源進(jìn)行適當(dāng)補(bǔ)充，做到有的放矢。
二、采用多元化教學(xué)方法
我們采用視頻教學(xué)、PBL教學(xué)和網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)相結(jié)合的多元教學(xué)方法。首先，在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中貫徹實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利“3R”原則和動(dòng)物倫理觀，規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)課中倡導(dǎo)和強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理觀念是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)教學(xué)改革必不可少的環(huán)節(jié)之一，將動(dòng)物福利觀落實(shí)到具體實(shí)驗(yàn)操作如抓取、保定、給藥、采血、處死等各環(huán)節(jié)中，善待動(dòng)物，及時(shí)制止并糾正學(xué)生不規(guī)范操作，對(duì)于虐待動(dòng)物者給予批評(píng)警告并納入期末成績(jī)考核。
其次，我們?cè)诮虒W(xué)中部分專(zhuān)題還引入“PBL”教學(xué)模式，以學(xué)生為主體，以問(wèn)題為中心，在教師的整體把握和指導(dǎo)下，強(qiáng)調(diào)學(xué)生的主動(dòng)參與[5-6]。比如，在動(dòng)物福利這個(gè)專(zhuān)題中，我們引入“如何理解動(dòng)物福利”、“動(dòng)物解放表現(xiàn)在哪些方面”、“道德進(jìn)步與動(dòng)物福利的關(guān)系”、“我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中應(yīng)該如何合理對(duì)待動(dòng)物”以及“動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果關(guān)系”等問(wèn)題，通過(guò)實(shí)驗(yàn)操作及實(shí)驗(yàn)體會(huì)分組進(jìn)行相關(guān)討論，并寫(xiě)出相關(guān)匯報(bào)，以加深對(duì)動(dòng)物福利的理解與認(rèn)識(shí)，通過(guò)“問(wèn)題式探討”激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，增強(qiáng)其自主查閱文獻(xiàn)、收集資料等能力。學(xué)生是教學(xué)中的主體，是教學(xué)最終成果的體現(xiàn)者，只有保證學(xué)生成為這樣的角色，才能實(shí)現(xiàn)最終的教學(xué)目的。教師角色也發(fā)生了轉(zhuǎn)變，由知識(shí)的傳授者、灌輸者、知識(shí)權(quán)威、教學(xué)中心，轉(zhuǎn)變?yōu)榻虒W(xué)活動(dòng)的組織者、引導(dǎo)者、參與者和研究者，這樣，在教與學(xué)的矛盾中，才能促使教師成為創(chuàng)新教學(xué)的主要方面，使其正確地把握創(chuàng)新教學(xué)的方向。
此外，我們還利用網(wǎng)絡(luò)資源及購(gòu)買(mǎi)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)視頻進(jìn)行直觀教學(xué)，參考資料有武漢大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心錄制的“實(shí)驗(yàn)動(dòng)物”；國(guó)外動(dòng)物福利組織提供的“共享世界”；國(guó)家衛(wèi)生部錄制的“動(dòng)物基本操作技術(shù)”、“動(dòng)物模型基本病理過(guò)程”、“顯微注射法建立轉(zhuǎn)基因動(dòng)物”；錢(qián)永祥與梁文道關(guān)于“動(dòng)物倫理與道德進(jìn)步”的學(xué)習(xí)視頻等。多元化教學(xué)方法的應(yīng)用使教學(xué)過(guò)程形象化、直觀化，達(dá)到了文字語(yǔ)言描述難以達(dá)到的效果，便于學(xué)生進(jìn)行觀察和思考，利于學(xué)生分析問(wèn)題和解決問(wèn)題。
三、構(gòu)建合理的考核評(píng)價(jià)機(jī)制
我們根據(jù)學(xué)生實(shí)際情況，制定評(píng)價(jià)考核表，從規(guī)范操作動(dòng)手能力評(píng)價(jià)、創(chuàng)新能力評(píng)價(jià)、團(tuán)隊(duì)合作能力評(píng)價(jià)、科研寫(xiě)作能力評(píng)價(jià)等方面進(jìn)行考核[7]（參考表1）。通過(guò)實(shí)驗(yàn)考核評(píng)價(jià)體系綜合評(píng)定學(xué)生學(xué)習(xí)能力，符合大部分學(xué)生的意愿，同時(shí)培養(yǎng)了學(xué)生獨(dú)立思考問(wèn)題的能力。其次，請(qǐng)專(zhuān)家組老師深入課堂進(jìn)行教學(xué)評(píng)估。最后在課程結(jié)束后進(jìn)行相關(guān)問(wèn)卷調(diào)查（表2）。調(diào)查結(jié)果顯示：98%的同學(xué)認(rèn)為教學(xué)改革有助于提高其實(shí)驗(yàn)操作技能和科研能力，能提高其分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力；95%的同學(xué)認(rèn)為可以激發(fā)其興趣和主動(dòng)性，增強(qiáng)其團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力；94%的同學(xué)認(rèn)為教學(xué)改革拓寬了他們的知識(shí)面；100%的同學(xué)對(duì)教學(xué)方法滿意，認(rèn)可教學(xué)改革。改革也仍有需要改進(jìn)的方面，比如，鍛煉學(xué)生的表達(dá)能力和寫(xiě)作能力，以及增強(qiáng)師生間互動(dòng)這三方面體現(xiàn)得不是很好。今后將尋求可行的方法提高以上幾個(gè)方面的效果。
四、結(jié)語(yǔ)
通過(guò)對(duì)《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》課程中理論與實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)的整合優(yōu)化，使理論知識(shí)與實(shí)驗(yàn)內(nèi)容更加緊密地結(jié)合，有助于學(xué)生對(duì)知識(shí)理解的融會(huì)貫通，學(xué)生也更能從動(dòng)物的角度考慮它們應(yīng)享有的權(quán)益，從心里油然而生一種敬畏之情；通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的適當(dāng)擴(kuò)充，形成相對(duì)完整的專(zhuān)題，增加了動(dòng)手操作機(jī)會(huì)，培養(yǎng)學(xué)生整體的科研思維觀和全面的實(shí)驗(yàn)操作協(xié)調(diào)能力，掌握基本科研思路從發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、提出問(wèn)題到設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、解決問(wèn)題四步法著手去構(gòu)建科研課題研究框架；通過(guò)多元化教學(xué)方法激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣和提高其自主學(xué)習(xí)能力，興趣和主動(dòng)性是科研的開(kāi)始；通過(guò)完善的考核方式更合理地從學(xué)習(xí)態(tài)度、創(chuàng)新思維、動(dòng)手操作、團(tuán)隊(duì)協(xié)作及自主學(xué)習(xí)5大方面衡量學(xué)生的綜合能力，促進(jìn)學(xué)生個(gè)性化發(fā)展，同時(shí)有利于充分提高該課程研究生教學(xué)效果。另外，通過(guò)解決和應(yīng)對(duì)專(zhuān)題實(shí)驗(yàn)教學(xué)中出現(xiàn)的新問(wèn)題，提高任課教師的整體素質(zhì)，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)課程的建設(shè)和完善。我們也希望能在不斷進(jìn)行教學(xué)革新基礎(chǔ)上，申請(qǐng)教改項(xiàng)目來(lái)引入更多實(shí)踐教學(xué)，構(gòu)建合理的課程體系，在更大程度上促進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的課程建設(shè)和發(fā)展，進(jìn)一步推進(jìn)產(chǎn)學(xué)研一體化，培養(yǎng)出真正合格的研究生。
作者：張青峰
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關(guān)鍵詞：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 生物安全
在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的安全問(wèn)題，包括物理安全、化學(xué)安全、生物安全三個(gè)方面的問(wèn)題。在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)科中，在實(shí)驗(yàn)室里，主要易發(fā)生的安全問(wèn)題是生物安全問(wèn)題，本文著重就生物安全做如下探討。
一、提高自身意識(shí)，堅(jiān)持管理嚴(yán)格
實(shí)驗(yàn)室生物安全的管理，是指在操作具有潛在致病因子的微生物時(shí)，為防止操作人員感染，采取適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)室操作，使用實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)裝備，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施、結(jié)構(gòu)提出特定安全要求的一個(gè)過(guò)程。
在常規(guī)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，盡最大努力做到生物安全的防護(hù)，保證教學(xué)活動(dòng)正常進(jìn)行。要積極預(yù)防，對(duì)進(jìn)行每次實(shí)驗(yàn)時(shí)做到嚴(yán)格生物安全管理。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中若出現(xiàn)問(wèn)題，一切要以生物安全為重，杜絕一切違背生物安全的活動(dòng)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中若出現(xiàn)可能導(dǎo)致感染的意外發(fā)生時(shí)，必須要在第一時(shí)間進(jìn)行處理，以防止病原微生物進(jìn)一步擴(kuò)散。嚴(yán)格按照規(guī)章制度執(zhí)行，做到安全衛(wèi)生的規(guī)定上墻。
二、落實(shí)責(zé)任，明確制度
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程當(dāng)中要應(yīng)堅(jiān)決執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程。參與人員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中都要接觸各種微生物及致病因子，有些還具有易燃易爆的性質(zhì)。因此，作為實(shí)驗(yàn)人員，必須遵守實(shí)驗(yàn)室安全守則。如在接觸血液樣本時(shí)，所有的樣本要均視為污染性樣本，在檢驗(yàn)的過(guò)程中，如出現(xiàn)針頭損傷或皮膚沾血，應(yīng)馬上利用肥皂水清洗并擠出傷口余血，再用大量清水沖洗傷口，如需包扎，再根據(jù)傷口情況進(jìn)行包扎。在接觸菌種時(shí)，所有菌株的使用均要在生物安全柜及特定的設(shè)備內(nèi)進(jìn)行操作。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，要使用紫外線燈對(duì)操作空間進(jìn)行消毒，并用消毒液對(duì)地板及操作臺(tái)進(jìn)行消毒。操作人員在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后均應(yīng)根據(jù)要求洗手。
在學(xué)校的學(xué)生、醫(yī)院里的實(shí)習(xí)生有的還不能夠自覺(jué)遵守規(guī)章制度，作為教師應(yīng)盡職盡責(zé)，規(guī)范學(xué)生的行為，對(duì)其違規(guī)的操作應(yīng)及時(shí)制止，給予糾正。如對(duì)學(xué)生進(jìn)行分組管理，進(jìn)行輔導(dǎo)，不但要進(jìn)行對(duì)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技術(shù)輔導(dǎo)，更應(yīng)對(duì)學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的生物安全進(jìn)行督導(dǎo)。
三、加強(qiáng)設(shè)備應(yīng)用，明確設(shè)備范圍
在檢驗(yàn)學(xué)中，常規(guī)用到得設(shè)備由超凈工作臺(tái)、生物安全柜、高壓滅菌器、等生物安全設(shè)備，使用這些設(shè)備要嚴(yán)格按照操作規(guī)則使用。
超凈工作臺(tái)是為了保護(hù)試驗(yàn)品而設(shè)計(jì)的，通過(guò)吹入工作臺(tái)內(nèi)的垂直、水平氣流防止試驗(yàn)品受到工作區(qū)的污染。一旦微生物樣品放置于工作區(qū)域，空氣經(jīng)預(yù)過(guò)濾器初濾，再經(jīng)空氣高效過(guò)濾，從空氣高效過(guò)濾器出風(fēng)面吹出的潔凈氣流具有一定的和均勻的斷面風(fēng)速，可以排除工作區(qū)原來(lái)的空氣，將塵埃顆粒和生物顆粒帶走，以形成無(wú)菌的高潔凈的工作環(huán)境。從而達(dá)到潔凈的目的，減少實(shí)驗(yàn)結(jié)果的誤差。此設(shè)備在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中一般用于培養(yǎng)基的制備。
生物安全柜是指：為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)品時(shí)，用來(lái)保護(hù)人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料的，使其避免暴露于在上述操作過(guò)程中，可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠或?yàn)R出物而設(shè)計(jì)的。世界衛(wèi)生組織出版的《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》中提出到：“生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實(shí)驗(yàn)室感染以及培養(yǎng)物交叉污染，生物安全柜同時(shí)也能保護(hù)工作環(huán)境。”
在微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)時(shí)，所有操作均應(yīng)在該設(shè)備中完成。現(xiàn)在一些單位條件不具備使用這些設(shè)備時(shí)，很多單位仍是使用創(chuàng)痛方法，如用酒精燈創(chuàng)造無(wú)菌環(huán)境等。這些方法本身對(duì)操作者自身的保護(hù)能力是比較弱的。
以上兩種設(shè)備是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室常用并不可缺少的設(shè)備。應(yīng)合理使用，嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作，以免發(fā)生事故。
四、規(guī)范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用，重視動(dòng)物福利
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是指過(guò)經(jīng)人工飼養(yǎng)，對(duì)攜帶的微生物實(shí)行控制，遺傳背景明確、來(lái)源清楚，用于科研、鑒定、生產(chǎn)、及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)用的動(dòng)物。它是實(shí)驗(yàn)教學(xué)中生物安全重要的防范環(huán)節(jié)。如近幾年所發(fā)生的一些特殊傳染病中，大多數(shù)都是由于野生動(dòng)物所致。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室來(lái)講，我們所使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安全使用也是不可小覷的。在平時(shí)的實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)注意不要使用非實(shí)驗(yàn)動(dòng)物做實(shí)驗(yàn)，否則導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的偏差，甚至?xí)a(chǎn)生意外等。在操作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)，我們也要注意操作方法，要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物操作規(guī)程執(zhí)行，如在抓取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)應(yīng)戴手套，并要合理利用動(dòng)物固定裝置，避免抓傷、咬傷。
在使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物做實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們應(yīng)當(dāng)重視動(dòng)物福利，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是為了科學(xué)研究目的而存在的，它的整個(gè)生命過(guò)程完全受到人為的控制，但它們都是一個(gè)鮮活的生命體，應(yīng)享有生命權(quán)。我們要做到的就是在實(shí)際工作中，在情感、道義和實(shí)踐上尊重、善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
五、加強(qiáng)生物安全管理
【關(guān)鍵詞】“互聯(lián)網(wǎng)+”；機(jī)能實(shí)驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
在高職護(hù)理專(zhuān)業(yè)人才培養(yǎng)中，醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程的實(shí)驗(yàn)教學(xué)是專(zhuān)業(yè)教學(xué)的重要手段，是評(píng)估理論教學(xué)質(zhì)量、考核學(xué)生素質(zhì)的必要條件。而機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)作為醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程的重要組成部分，在培養(yǎng)護(hù)士的實(shí)踐能力和團(tuán)隊(duì)精神中發(fā)揮了重要作用[1]。伴隨著互聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的普及與發(fā)展，教育也和其他行業(yè)一樣，一同進(jìn)入了“互聯(lián)網(wǎng)+”的大時(shí)代。如何順應(yīng)學(xué)生認(rèn)知發(fā)展的變化，建設(shè)高效課堂在高職護(hù)理專(zhuān)業(yè)機(jī)能實(shí)驗(yàn)的課堂中引入“互聯(lián)網(wǎng)+”教育理念，將是我們思考的重要課題。
1機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)現(xiàn)狀
1.1機(jī)能實(shí)驗(yàn)已成為一門(mén)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)課程
自20世紀(jì)80—90年代，為了更好的培養(yǎng)高素質(zhì)人才，國(guó)內(nèi)大多數(shù)醫(yī)學(xué)院校將生理學(xué)、藥理學(xué)、病理生理學(xué)3門(mén)學(xué)科的實(shí)驗(yàn)教學(xué)合并成為一門(mén)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)學(xué)科并成立相關(guān)的機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心。以期加強(qiáng)學(xué)科間的聯(lián)系，同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生的綜合性科研思維能力和分析問(wèn)題解決問(wèn)題的能力。我校也建立基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心機(jī)能實(shí)驗(yàn)室，開(kāi)設(shè)包含機(jī)能實(shí)驗(yàn)、形態(tài)實(shí)驗(yàn)、微生物實(shí)驗(yàn)在內(nèi)的《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》課程，并編寫(xiě)了適合我校高職醫(yī)學(xué)生應(yīng)用的《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》教材，內(nèi)容包含動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)、常用實(shí)驗(yàn)器材的識(shí)別與使用方法、經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方案和綜合性試驗(yàn)方案等。
1.2教學(xué)內(nèi)容
現(xiàn)在國(guó)內(nèi)各院校的機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)多以基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)和基本技能訓(xùn)練以及驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)為主。這種傳統(tǒng)的機(jī)能實(shí)驗(yàn)課程也只是簡(jiǎn)單的驗(yàn)證生理學(xué)、病理學(xué)、病理生理學(xué)的某一知識(shí)理論和鞏固，缺少課程之間的聯(lián)系與系統(tǒng)的疏導(dǎo)。而課上學(xué)生根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求按步驟完成就可以看到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，按照書(shū)本和老師的要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生缺少自主思考的意識(shí)和行為。
2存在問(wèn)題
2.1學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)課程本身的不重視
學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)課程本身缺少重視程度，因?yàn)檩^多的實(shí)驗(yàn)課程不進(jìn)行考核，并多數(shù)情況是以小組為單位完成，因此增加了部分同學(xué)的懶惰性。而高職院校中基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)在今后的工作中應(yīng)用性較差，這同樣也增加了學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)課的疏忽。
2.2重結(jié)果輕過(guò)程，實(shí)驗(yàn)結(jié)果缺少真實(shí)性
機(jī)能實(shí)驗(yàn)主要用到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及部分危化藥品等，很多同學(xué)（特別是高職院校護(hù)理專(zhuān)業(yè)的學(xué)生中女生較多）怕臟、怕動(dòng)物、怕手術(shù)見(jiàn)血，實(shí)驗(yàn)課基本處于旁觀狀態(tài)，很多時(shí)候不是做實(shí)驗(yàn)而是看實(shí)驗(yàn)，或者當(dāng)上“小記者”時(shí)時(shí)朋友圈更新其他同學(xué)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，這樣的結(jié)果可想而知[2]。
2.3章程對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的保護(hù)
在我國(guó)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》動(dòng)物福利章節(jié)規(guī)定：“實(shí)驗(yàn)人員要愛(ài)護(hù)動(dòng)物，不得虐待、傷害動(dòng)物；再符合科學(xué)原則的情況下，開(kāi)展動(dòng)物替代方法研究；在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的情況下，采取有效措施避免給動(dòng)物造成不必要的不安、痛苦和傷害……”[3]。因此，提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)質(zhì)量、減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用、改善現(xiàn)行的實(shí)驗(yàn)課程教育教學(xué)方式是刻不容緩的。
3如何利用“互聯(lián)網(wǎng)+”機(jī)能實(shí)驗(yàn)高效課堂設(shè)計(jì)
最近幾年，隨著網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的迅速發(fā)展，互聯(lián)網(wǎng)已經(jīng)深入到教育教學(xué)的每個(gè)角落中，同時(shí)也帶給了各門(mén)學(xué)科無(wú)限的發(fā)展契機(jī)，但如何將互聯(lián)網(wǎng)帶入實(shí)驗(yàn)課堂是需要思考的重要問(wèn)題。而虛擬仿真實(shí)驗(yàn)教學(xué)系統(tǒng)就是將計(jì)算機(jī)虛擬仿真技術(shù)與互聯(lián)網(wǎng)結(jié)合，無(wú)需實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)儀器，利用計(jì)算機(jī)模擬醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)的操作過(guò)程，是伴隨科技發(fā)展應(yīng)運(yùn)而生的先進(jìn)教學(xué)手段[4]。而在教學(xué)應(yīng)用過(guò)程中，教師還是充當(dāng)著主角，學(xué)生還是被動(dòng)接受的模式。
3.1網(wǎng)絡(luò)課堂先行，扎實(shí)理論學(xué)習(xí)
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)包括機(jī)能實(shí)驗(yàn)、形態(tài)實(shí)驗(yàn)以及微生物實(shí)驗(yàn)，而機(jī)能實(shí)驗(yàn)中多以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為主。而實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的操作，學(xué)生是很難通過(guò)書(shū)本文字和教師講解抽象復(fù)雜的操作理解到位的。因此，我們先將動(dòng)手操作移到網(wǎng)上模擬，讓學(xué)生們更多的去關(guān)注實(shí)驗(yàn)的原理和理論課的聯(lián)系，而不是反復(fù)停留在實(shí)驗(yàn)操作失敗上的打擊。實(shí)驗(yàn)課堂上，為學(xué)生講解實(shí)驗(yàn)需要解決的問(wèn)題，提供參考資料、對(duì)應(yīng)理論知識(shí)，利用問(wèn)題式學(xué)習(xí)（problem-basedlearning，PBL）教學(xué)法讓學(xué)生逐步成為實(shí)驗(yàn)課程的主導(dǎo)者[5]。
3.2課前討論充分，確定實(shí)驗(yàn)方案
對(duì)于新的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，學(xué)生單純的通過(guò)看書(shū)很難理解抽象的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。教師通過(guò)上一次課程布置下次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，學(xué)生可以通過(guò)學(xué)校網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)進(jìn)入虛擬教學(xué)系統(tǒng)使得學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)課程的內(nèi)容有初步的了解和認(rèn)識(shí)，提前做好預(yù)習(xí)和準(zhǔn)備工作。以小組為單位做好實(shí)驗(yàn)課程流程、分工及步驟等設(shè)計(jì)方案，反復(fù)通過(guò)虛擬操作對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程做深刻了解，根據(jù)上節(jié)課教師布置的實(shí)驗(yàn)要求，按照PBL經(jīng)典教學(xué)法：提出問(wèn)題建立假設(shè)假設(shè)論證歸納總結(jié)的要求初步完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告[6]。也可將實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案提前與實(shí)驗(yàn)教師進(jìn)行溝通討論。
3.3課上真實(shí)操作，保障教學(xué)效果
學(xué)生通過(guò)課前的討論和預(yù)習(xí)以及實(shí)驗(yàn)思路的整理，同時(shí)按照虛擬教學(xué)系統(tǒng)的訓(xùn)練，在課上進(jìn)行真實(shí)的操作。教師在學(xué)生實(shí)驗(yàn)過(guò)程中充當(dāng)觀摩者，適時(shí)的對(duì)操作過(guò)程進(jìn)行稍許指點(diǎn)和建議。在操作結(jié)束后，整理總結(jié)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，提出需要改進(jìn)的問(wèn)題和操作過(guò)程中可避免的失誤點(diǎn)，為今后的實(shí)驗(yàn)操作設(shè)計(jì)總結(jié)經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)。
3.4課后作業(yè)提交，批改討論結(jié)果
根據(jù)課程安排，按照實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求，以組為單位上交團(tuán)隊(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在下節(jié)課時(shí)反饋信息，小組成員進(jìn)行整改反饋。綜上所述，在機(jī)能實(shí)驗(yàn)課程中利用互聯(lián)網(wǎng)開(kāi)設(shè)實(shí)驗(yàn)教育與教學(xué)是適應(yīng)現(xiàn)代基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育迅猛發(fā)展、培養(yǎng)高素質(zhì)醫(yī)學(xué)人才的重要方式，無(wú)論是學(xué)生在學(xué)習(xí)中的體驗(yàn)、教師在過(guò)程中的指導(dǎo)以及學(xué)校在整體上對(duì)學(xué)生的培養(yǎng)，其中的重要性不言而喻。“互聯(lián)網(wǎng)+”與機(jī)能實(shí)驗(yàn)的有機(jī)融合，將無(wú)可置疑的給基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展提供了更有力的支持。因此，把握這個(gè)機(jī)會(huì)，做好實(shí)驗(yàn)課程與時(shí)俱進(jìn)的改變，使得實(shí)驗(yàn)教學(xué)跨進(jìn)豐富的“互聯(lián)網(wǎng)+”時(shí)代，讓其發(fā)展的更遠(yuǎn)。
參考文獻(xiàn)
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【關(guān)鍵詞】
病理生理實(shí)驗(yàn)教學(xué);改革;能力隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展,社會(huì)對(duì)人才的需求越來(lái)越迫切,對(duì)于人才質(zhì)量的要求也越來(lái)越高,為培養(yǎng)適應(yīng)社會(huì)需要的高素質(zhì)醫(yī)學(xué)人才,必須把能力培養(yǎng)作為醫(yī)學(xué)教育目標(biāo)。病理生理學(xué)是醫(yī)學(xué)教育的一門(mén)主干課程,在醫(yī)學(xué)教學(xué)中起著承前啟后的重要作用。它以疾病為研究對(duì)象,主要從機(jī)能和代謝的角度來(lái)闡述疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律和發(fā)病機(jī)制,為臨床實(shí)踐提供理論依據(jù),越來(lái)越受到臨床各科醫(yī)師的重視。病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)是病理生理學(xué)教學(xué)的一個(gè)重要組成部分,在加強(qiáng)和鞏固本學(xué)科理論課程知識(shí)的理解和掌握,提高學(xué)生的分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力,提高學(xué)生的綜合素質(zhì),培養(yǎng)出合格的醫(yī)學(xué)人才等方面發(fā)揮著重要作用。本課程以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為主,通過(guò)在動(dòng)物身上復(fù)制人類(lèi)疾病和病理過(guò)程的模型,探討其發(fā)生機(jī)理。作為普通高等醫(yī)學(xué)院校的實(shí)驗(yàn)教學(xué),對(duì)于培養(yǎng)具有扎實(shí)的基礎(chǔ)知識(shí),嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng),創(chuàng)造性思維及開(kāi)拓型的復(fù)合人才具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)和不可推卸的責(zé)任。因此,如何形成更合理、更實(shí)用的實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系,完善病理生理實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革,提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量是我們一直在積極實(shí)踐與探索的問(wèn)題。為使學(xué)生能更好的適應(yīng)社會(huì)發(fā)展需求,培養(yǎng)全面發(fā)展的高素質(zhì)跨世紀(jì)醫(yī)學(xué)人才,對(duì)病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)從實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法、實(shí)驗(yàn)考核方法等方面實(shí)施了改革,從而培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生綜合能力。
1 普通高等專(zhuān)科醫(yī)學(xué)院校病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)現(xiàn)狀
1.1 對(duì)實(shí)驗(yàn)課的重視不夠
1.1.1 實(shí)驗(yàn)課時(shí)不足 對(duì)病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重要性認(rèn)識(shí)不足,這一點(diǎn)體現(xiàn)在教學(xué)的安排上。很多人把實(shí)驗(yàn)教學(xué)看作是理論教學(xué)的附屬,把實(shí)驗(yàn)教學(xué)放在從屬地位。目前,普通高等專(zhuān)科醫(yī)學(xué)教育學(xué)制為三年,一般在第三學(xué)期開(kāi)設(shè)病理生理課,臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專(zhuān)業(yè)總學(xué)時(shí)31,實(shí)驗(yàn)6學(xué)時(shí),占總學(xué)時(shí)19.34%,護(hù)理、助產(chǎn)、中西醫(yī)結(jié)合專(zhuān)業(yè)總學(xué)時(shí)19,實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)0學(xué)時(shí),未開(kāi)設(shè)病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)。可見(jiàn),實(shí)驗(yàn)課所占的比例嚴(yán)重不足。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)投入有限 隨著高校的擴(kuò)招,醫(yī)學(xué)生人數(shù)明顯增加,原有的實(shí)驗(yàn)設(shè)備已不能滿足需要,再加上多數(shù)醫(yī)學(xué)院校的實(shí)驗(yàn)教學(xué)由于經(jīng)費(fèi)投入有限,實(shí)驗(yàn)設(shè)備沒(méi)有得到及時(shí)的更新、加強(qiáng)。這樣的實(shí)驗(yàn)教學(xué)一方面不利于培養(yǎng)學(xué)生解決實(shí)際問(wèn)題的能力和思維方法的訓(xùn)練,另一方面不能調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性,激發(fā)學(xué)生主動(dòng)深入考察現(xiàn)象背后的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思想。
1.1.3 缺乏自己的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房 在我國(guó)本科及以上的醫(yī)學(xué)院校,都有屬于自己的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房,為教學(xué)、科研提供了便利條件。而對(duì)于專(zhuān)科醫(yī)學(xué)院校大多都是從其他本科院校購(gòu)買(mǎi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,這樣不但不利于教學(xué),而且增加了教學(xué)成本。例如:我校要開(kāi)展病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn),就需要從蘭州、天水等地購(gòu)買(mǎi)實(shí)驗(yàn)用的小白鼠、蟾蜍等,路途遙遠(yuǎn),并且有時(shí)也會(huì)受到天氣影響,不能按照開(kāi)學(xué)初制定的教學(xué)進(jìn)度開(kāi)展實(shí)驗(yàn),影響教學(xué)進(jìn)度,給教學(xué)帶來(lái)了不便。
1.2 實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法單一 傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)以知識(shí)的記憶和復(fù)現(xiàn)為基本目標(biāo),把掌握知識(shí)本身作為教學(xué)目的,教學(xué)內(nèi)容依附于理論教學(xué),以驗(yàn)證書(shū)本理論為主。目前,病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)采用首先由教師講解實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⑹褂脤?shí)驗(yàn)動(dòng)物、器材、步驟、方法、注意事項(xiàng),然后學(xué)生分組開(kāi)始實(shí)驗(yàn),教師在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中進(jìn)行相應(yīng)的輔導(dǎo),是以書(shū)本知識(shí)為本位、教員為中心,以傳授理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技能為主要特征。
1.3 實(shí)驗(yàn)報(bào)告質(zhì)量偏低
通過(guò)對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)報(bào)告的批閱發(fā)現(xiàn):實(shí)驗(yàn)報(bào)告的質(zhì)量偏低,內(nèi)容僵化,對(duì)出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象沒(méi)有很好的觀察,深入的思考;如果和實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符,也沒(méi)有進(jìn)行透徹的分析原因,并沒(méi)有充分發(fā)揮實(shí)驗(yàn)課的作用。
2 實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革
2.1 不斷創(chuàng)新,改革實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
從目前病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課時(shí)來(lái)看,實(shí)驗(yàn)課時(shí)不足,所占的比例不到20%。應(yīng)加強(qiáng)課程改革,適當(dāng)增加學(xué)時(shí)。實(shí)踐是檢驗(yàn)真理的標(biāo)準(zhǔn),也是發(fā)現(xiàn)、創(chuàng)造的根本途徑,實(shí)驗(yàn)教學(xué)能夠培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力、思考能力和創(chuàng)新能力,所以適當(dāng)?shù)乜紤]增加實(shí)驗(yàn)教學(xué)比例,改進(jìn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)題目和設(shè)計(jì),多開(kāi)設(shè)綜合性、設(shè)計(jì)性、應(yīng)用性強(qiáng)的實(shí)驗(yàn),能夠與時(shí)俱進(jìn),最大限度發(fā)揮實(shí)驗(yàn)教學(xué)的預(yù)期效果,提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)題目質(zhì)量。同時(shí),也可以對(duì)已開(kāi)設(shè)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行改革。例如:我校開(kāi)展“條件在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用”和“缺氧”這兩個(gè)實(shí)驗(yàn),對(duì)于第一個(gè)實(shí)驗(yàn)需要使用小白鼠復(fù)制缺氧模型,通過(guò)改變外部環(huán)境和機(jī)體狀態(tài)來(lái)觀察對(duì)缺氧耐受性影響;第二個(gè)實(shí)驗(yàn)則是使用小白鼠復(fù)制不同缺氧類(lèi)型,觀察不同缺氧類(lèi)型機(jī)體皮膚的變化;對(duì)于這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)都要復(fù)制缺氧模型,可以通過(guò)改變教學(xué)安排,將兩個(gè)實(shí)驗(yàn)安排在一起,這樣不但使同學(xué)們對(duì)缺氧加深認(rèn)識(shí),觀察不同條件對(duì)缺氧影響、各種缺氧類(lèi)型皮膚變化,加強(qiáng)知識(shí)之間的滲透、聯(lián)系,并且可以節(jié)省一部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
2.2 積極探索,改革教學(xué)方法
2.2.1 開(kāi)設(shè)一次實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)課,營(yíng)造主動(dòng)參與的氛圍
創(chuàng)新能力的培養(yǎng)需要一個(gè)思維不受限制的寬松環(huán)境,同時(shí)也需要積極參與的主動(dòng)性。針對(duì)這一點(diǎn),實(shí)驗(yàn)教學(xué)應(yīng)著重結(jié)合實(shí)踐,進(jìn)行科研作風(fēng)和思想方法的培養(yǎng)。在常規(guī)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,開(kāi)展設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)和探索性實(shí)驗(yàn)。由學(xué)生作為主體,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)、查找資料、準(zhǔn)備器材、配制部分試劑等全過(guò)程都讓學(xué)生參加。讓學(xué)生體會(huì)實(shí)驗(yàn)的完整性、連續(xù)性和探索性,主動(dòng)參與,提出問(wèn)題并設(shè)計(jì)解決問(wèn)題方案,并實(shí)行具體的實(shí)驗(yàn)操作。使學(xué)生能夠充分發(fā)揮主觀能動(dòng)性和創(chuàng)造力,能夠激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情,促進(jìn)學(xué)生主動(dòng)思考,既訓(xùn)練了學(xué)生的基本操作技能又增強(qiáng)了動(dòng)手能力的培養(yǎng)和訓(xùn)練。
2.2.2 強(qiáng)化教學(xué)環(huán)節(jié),提高教學(xué)成效
在上實(shí)驗(yàn)課之前,對(duì)同學(xué)們進(jìn)行實(shí)驗(yàn)做好預(yù)先的安排。第一,做好實(shí)驗(yàn)前的預(yù)習(xí)工作,以免在實(shí)驗(yàn)時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程不熟悉,邊看書(shū)邊做,影響實(shí)驗(yàn)效果,浪費(fèi)時(shí)間。第二,提前分好實(shí)驗(yàn)小組,分配好每個(gè)人所擔(dān)當(dāng)?shù)慕巧?實(shí)驗(yàn)就可以有條不紊進(jìn)行。對(duì)于每個(gè)角色,在做不同的實(shí)驗(yàn)時(shí)可以變換,使每個(gè)同學(xué)都能熟悉各種角色。第三,課中加強(qiáng)示教,加強(qiáng)輔導(dǎo)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中對(duì)學(xué)生嚴(yán)格要求,按照實(shí)驗(yàn)步驟認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn),教師隨時(shí)給予指導(dǎo),對(duì)不正確的操作糾正。通過(guò)以上幾個(gè)環(huán)節(jié)加強(qiáng),可以順利完成實(shí)驗(yàn)。
2.2.3 采用現(xiàn)代化教學(xué)輔助設(shè)備,提高教學(xué)質(zhì)量
隨著現(xiàn)代教育技術(shù)的發(fā)展,在病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,可以采用多媒體幻燈片、教學(xué)錄像等手段,應(yīng)用多種教學(xué)輔助設(shè)施,提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量。例如:在實(shí)驗(yàn)前可以觀看相應(yīng)視頻錄像,熟悉實(shí)驗(yàn)步驟;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可以將實(shí)驗(yàn)步驟在幻燈上顯示,幫助同學(xué)們熟悉整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程。
2.3 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論,注重實(shí)驗(yàn)小結(jié)
通過(guò)學(xué)生親自動(dòng)手做的實(shí)驗(yàn),在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,組織同學(xué)們以討論的方式分析、總結(jié)自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并分析原因。例如:在做水腫實(shí)驗(yàn)時(shí),蟾蜍的灌流標(biāo)本制作完成后,首先灌流任氏液,通過(guò)同學(xué)們觀察發(fā)現(xiàn),蟾蜍下肢變腫了,重了;再灌流20%葡萄糖時(shí),又變輕了,變皺縮了。對(duì)此實(shí)驗(yàn)結(jié)果和同學(xué)們進(jìn)行分析、討論、總結(jié)。如果和實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符,要分析原因。每次實(shí)驗(yàn)都能非常認(rèn)真的思考、分析、總結(jié),可以加深對(duì)實(shí)習(xí)內(nèi)容的理解,鞏固理論知識(shí)。
2.4 仔細(xì)、嚴(yán)格批閱實(shí)驗(yàn)報(bào)告
實(shí)驗(yàn)課后,要求同學(xué)們認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書(shū)寫(xiě)是一項(xiàng)重要的基本技能訓(xùn)練,是科學(xué)研究論文寫(xiě)作的基礎(chǔ),應(yīng)當(dāng)實(shí)事求是、認(rèn)真準(zhǔn)確地書(shū)寫(xiě)。實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容包括:一般項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)動(dòng)物、實(shí)驗(yàn)步驟和方法、實(shí)驗(yàn)結(jié)果。重要的是分析討論,根據(jù)所記錄下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,聯(lián)系所學(xué)過(guò)理論知識(shí),進(jìn)行分析。通過(guò)學(xué)生的實(shí)習(xí)報(bào)告,教師仔細(xì)批閱,指出相應(yīng)問(wèn)題,從而提高同學(xué)們實(shí)驗(yàn)以及書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告的能力。
2.5 建立學(xué)校自己的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房及相應(yīng)等級(jí)的實(shí)驗(yàn)室
為了便于學(xué)生上課,教師做科研,可以建立學(xué)校自己的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房及相應(yīng)等級(jí)的實(shí)驗(yàn)室,設(shè)專(zhuān)人管理,繁殖、飼養(yǎng)教學(xué)及科研相關(guān)動(dòng)物,既能滿足教學(xué)及科研需要,又可為其他兄弟院校及科研單位提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地并獲得一部分利潤(rùn)以進(jìn)一步改善實(shí)驗(yàn)條件。
【關(guān)鍵詞】 骨關(guān)節(jié)炎；動(dòng)物模型；文獻(xiàn)綜述
骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）是一種由多種因素相互作用導(dǎo)致的以關(guān)節(jié)軟骨損害為主的進(jìn)行性骨關(guān)節(jié)疾病[1]。致病因素包括炎癥、創(chuàng)傷、老齡化、肥胖、軟骨細(xì)胞分化或遺傳易感性等[2-3]。臨床表現(xiàn)為關(guān)節(jié)痛、僵硬、肥大、活動(dòng)受限。本病有一定的致殘率，也是中年以上人群?jiǎn)适趧?dòng)力、生活不能自理的主要原因。如今，我國(guó)老年化日趨嚴(yán)重，但還沒(méi)有有效的方法治愈OA，只能控制癥狀和延緩疾病發(fā)展，不僅給患者帶來(lái)巨大的痛苦，也給國(guó)家?guī)?lái)了社會(huì)負(fù)擔(dān)。為解決這一問(wèn)題，科研工作者們利用動(dòng)物模型探討OA的發(fā)病機(jī)制及治療方法。OA動(dòng)物模型主要有自l性動(dòng)物模型、誘發(fā)性動(dòng)物模型、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型3種，所選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要有鼠、兔、大型哺乳動(dòng)物等。本文對(duì)常用的動(dòng)物模型和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇進(jìn)行具體分析對(duì)比，以便科研工作者選擇更合適的造模方法。
1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇是醫(yī)學(xué)科研工作者首先要考慮的問(wèn)題。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展起到了不可磨滅的作用，臨床上每一種新藥物的產(chǎn)生和診療方法的突破，都離不開(kāi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要綜合考慮動(dòng)物疾病的發(fā)病機(jī)制、基因與人類(lèi)的相似性、動(dòng)物是否容易控制、費(fèi)用、倫理等很多因素。
目前，常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、大型哺乳動(dòng)物等[4]。小鼠飼養(yǎng)方便、易于獲取、費(fèi)用合理、造模周期短；但小鼠跟人類(lèi)的基因譜差異較大，因而不能完全模擬人OA。大鼠在實(shí)驗(yàn)研究中不僅具有小鼠的優(yōu)勢(shì)，還具有生存能力強(qiáng)、實(shí)驗(yàn)成功率高的特點(diǎn)，目前廣泛用于實(shí)驗(yàn)研究。豚鼠是自發(fā)性O(shè)A模型最常用的動(dòng)物，因?yàn)槠浒l(fā)病率與人OA相似，且性格溫順、體型較小易于飼養(yǎng)、觀察，花費(fèi)較低。家兔性格溫順，被廣泛用于實(shí)驗(yàn)室研究，家兔因膝關(guān)節(jié)較大，可行關(guān)節(jié)內(nèi)操作，更適合OA動(dòng)物模型的選擇。大型哺乳動(dòng)物所需費(fèi)用比較昂貴，飼養(yǎng)成本大，由于OA實(shí)驗(yàn)研究需要大量動(dòng)物，因而不合適；但是相對(duì)于小動(dòng)物而言更適宜手術(shù)操作。有實(shí)驗(yàn)用刀在狗的膝關(guān)節(jié)軟骨上造成軟骨劃痕，
2周后出現(xiàn)OA病理變化，該動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，實(shí)驗(yàn)中可根據(jù)情況選擇[5]。
2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型
2.1 自發(fā)性動(dòng)物模型 自發(fā)性動(dòng)物模型是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物沒(méi)有任何人為因素參與的在自然狀態(tài)下形成的OA。Moskowitz等[6]記錄了30多個(gè)天然自發(fā)OA模型，其中對(duì)Hartly豚鼠的研究最多。Wei等[7]研究證明，Hartly豚鼠軟骨降解過(guò)程與人OA退行性變化相似。Hartly豚鼠達(dá)到約3月齡時(shí)，其膝關(guān)節(jié)軟骨組織主要表現(xiàn)關(guān)節(jié)面粗糙不平，軟骨細(xì)胞數(shù)異常，軟骨中糖胺聚糖異常分布，這與人OA形成的機(jī)制相似。肖萍等[8]在對(duì)2月齡Hartly豚鼠做實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)空白對(duì)照組1個(gè)月后即可自發(fā)出現(xiàn)軟骨組織病理性改變。Yamamoto等[9]對(duì)C57黑鼠關(guān)節(jié)軟骨組織分析研究發(fā)現(xiàn)，隨著年齡的增加，OA的發(fā)病率和嚴(yán)重程度逐漸增加，且退化過(guò)程十分類(lèi)似人OA。人類(lèi)在自然狀態(tài)下形成的OA與自發(fā)性動(dòng)物模型形成的OA有很多的相似之處，主要發(fā)病機(jī)制是關(guān)節(jié)受累過(guò)重，比如體質(zhì)量大、關(guān)節(jié)受力不均衡等。Bendele等[10]發(fā)現(xiàn)，減輕豚鼠體質(zhì)量后，可降低豚鼠膝OA的發(fā)生率及減輕OA的嚴(yán)重程度。這為臨床提供了思考，減輕體質(zhì)量，避免肥胖，少負(fù)重可以預(yù)防、減輕OA癥狀。該類(lèi)動(dòng)物性格溫順，容易飼養(yǎng)，自然狀態(tài)下病理機(jī)制穩(wěn)定，是研究人OA形成機(jī)制的重要?jiǎng)游锬Ｐ汀５窃擃?lèi)動(dòng)物自發(fā)形成的OA與人OA存在差異，而且形成時(shí)間長(zhǎng)，不易掌握數(shù)據(jù)，費(fèi)用高，導(dǎo)致該模型一般不作為實(shí)驗(yàn)研究的首選。
2.2 誘發(fā)性動(dòng)物模型 誘發(fā)性動(dòng)物模型是通過(guò)實(shí)驗(yàn)措施誘導(dǎo)OA的產(chǎn)生。科研人員可以通過(guò)人工干涉的方法更好地控制實(shí)驗(yàn)的發(fā)展趨勢(shì)以及收集數(shù)據(jù)，相比自發(fā)性O(shè)A模型更加穩(wěn)定，發(fā)病過(guò)程相對(duì)較短，是常選用的動(dòng)物模型。一般將誘發(fā)性模型分為手術(shù)方法和非手術(shù)方法兩大類(lèi)，每類(lèi)方法又具體分為很多種，以下是對(duì)實(shí)驗(yàn)中常用的幾種誘發(fā)動(dòng)物模型介紹。
2.2.1 手術(shù)方法 手術(shù)方法誘導(dǎo)OA，主要是通過(guò)造成關(guān)節(jié)正常受力改變，導(dǎo)致關(guān)節(jié)應(yīng)力長(zhǎng)時(shí)間處于失衡狀態(tài)使關(guān)節(jié)變形產(chǎn)生的動(dòng)物模型，也有部分手術(shù)方法是通過(guò)破壞相關(guān)組織影響軟骨細(xì)胞的正常生長(zhǎng)而產(chǎn)生的OA模型。目前常用的造模方法主要有Hulth模型、半月板切除法、前交叉韌帶切斷法、卵巢切除法、臀肌切斷法等。
2.2.1.1 Hulth模型 Hulth模型是最經(jīng)典的手術(shù)造模方法[11]，分為Hulth法和改良Hulth法。其中Hulth法是直接全部切除動(dòng)物膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)半月板，并切斷內(nèi)側(cè)副韌帶及前后交叉韌帶，使關(guān)節(jié)破壞，應(yīng)力失衡，造成關(guān)節(jié)腔狹窄，關(guān)節(jié)面摩擦增大，術(shù)后任其活動(dòng)，不固定傷肢，形成類(lèi)似人OA的病理性改變。王婧等[12]在SD大鼠膝關(guān)節(jié)行Hulth法造模術(shù)后4周，出現(xiàn)關(guān)節(jié)軟骨表面粗糙不平等OA病理特征。方銳等[13]發(fā)現(xiàn)在兔膝關(guān)節(jié)行Hulth法造模后12周出現(xiàn)類(lèi)似OA表現(xiàn)。Hulth模型破壞動(dòng)物維持關(guān)節(jié)穩(wěn)定的幾條主要韌帶，使關(guān)節(jié)受力失衡，局部關(guān)節(jié)軟骨負(fù)重增加，加快關(guān)節(jié)軟骨變形，該類(lèi)模型適合研究因韌帶損害導(dǎo)致的OA的治療及關(guān)節(jié)置換等方面的研究。但Hulth法對(duì)關(guān)節(jié)損傷比較大，很難避免關(guān)節(jié)感染和創(chuàng)傷對(duì)模型動(dòng)物生理破壞。因而王云峰等[14]對(duì)Hulth法進(jìn)行改良，將家兔右膝內(nèi)側(cè)半月板以及前交叉韌帶切斷，但不切斷后交叉韌帶，分別于造模后2，6，10，14周時(shí)觀察膝關(guān)節(jié)的組織學(xué)變化，結(jié)果在14周內(nèi)成功復(fù)制出不同時(shí)期的膝OA，證實(shí)了此種改良方法的可行性。改良Hulth法相對(duì)于Hulth法操作較為簡(jiǎn)單，手術(shù)創(chuàng)傷較小，實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ洼^穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)較可靠，有利于動(dòng)物模型造模成功，為OA的深入研究打下了基礎(chǔ)。
2.2.1.2 半月板切除法 半月板是維持膝關(guān)節(jié)穩(wěn)定的重要結(jié)構(gòu)，可傳布膝關(guān)節(jié)負(fù)荷力，能最大限度地增大關(guān)節(jié)間的接觸面和減少磨損，從而保證了膝關(guān)節(jié)長(zhǎng)期負(fù)重運(yùn)動(dòng)不受損傷[15]。Welch等[16]發(fā)現(xiàn)，切除大鼠膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)半月板模型中，4周時(shí)即發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)評(píng)分顯著增加，證明半月板切除法可以制備膝OA模型。宋濤等[17]對(duì)膝關(guān)節(jié)半月板切除的患者進(jìn)行隨訪，發(fā)現(xiàn)基本出現(xiàn)OA樣病理改變，得出結(jié)論：半月板切除后最終會(huì)導(dǎo)致膝OA。半月板切除法比Hulth法操作簡(jiǎn)單，手術(shù)創(chuàng)傷小，動(dòng)物模型穩(wěn)定，容易控制實(shí)驗(yàn)方向，可在較短時(shí)間內(nèi)完成造模，是手術(shù)方法造模比較可靠的方法之一。但這種造模方法對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身仍有不小的損傷，容易造成創(chuàng)傷性感染，因而該模型多用于研究因創(chuàng)傷引起的關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制，不適于探討藥物對(duì)OA生化代謝影響方面的研究[18]。
2.2.1.3 前交叉韌帶切斷法 前交叉韌帶切斷法是將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶切除造成局部關(guān)節(jié)應(yīng)力發(fā)生改變，導(dǎo)致軟骨細(xì)胞發(fā)生病理改變而引起OA。王婧等[12]SD大鼠麻醉后剪斷其膝前交叉韌帶，不固定傷肢，任其自由活動(dòng)，術(shù)后
6周觀察到嚴(yán)重軟骨缺損，軟骨下骨開(kāi)始硬化，說(shuō)明前交叉韌帶切除法可造成OA改變。孫先潤(rùn)等[19]切斷SD大鼠右側(cè)膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶，于術(shù)后28 d
見(jiàn)全膝形態(tài)明顯改變，膝關(guān)節(jié)骨密度增高及滑膜纖維化增生等OA病理變化。前交叉韌帶切斷法較Hulth法有了較大的改進(jìn)，本模型手術(shù)創(chuàng)傷小，模型穩(wěn)定，成功率高，操作簡(jiǎn)便，是實(shí)驗(yàn)中常用的OA模型。但本法和半月板切除法一樣易出現(xiàn)創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎、滑膜炎癥和術(shù)后感染，該模型也是研究創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎較好的模型之一，因此實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)自身需求選擇[20]。因而在臨床上對(duì)于創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎應(yīng)避免負(fù)重，臥床為主，盡早修復(fù)創(chuàng)傷對(duì)OA的預(yù)防和緩解有很大幫助。
2.2.1.4 卵巢切除法 卵巢切除法是將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物卵巢切除致使雌激素缺乏而間接影響軟骨細(xì)胞改變引起OA的方法。李楠等[21]對(duì)SD大鼠行卵巢切除法，術(shù)后3個(gè)月大鼠出現(xiàn)不同程度關(guān)節(jié)軟骨層變薄，排列紊亂等OA病變表現(xiàn)，證明單純卵巢切除術(shù)可以成功建立OA動(dòng)物模型。李釗等[22]經(jīng)背部切口切除大鼠雙側(cè)卵巢，術(shù)后12周可見(jiàn)軟骨表面粗糙，表淺層軟骨細(xì)胞減少，軟骨細(xì)胞排列紊亂。該模型因其特殊的致病機(jī)制，適用于研究雌激素及其類(lèi)似物對(duì)關(guān)節(jié)的保護(hù)作用和絕經(jīng)期婦女關(guān)節(jié)損害，因而臨床上對(duì)于女性O(shè)A患者，應(yīng)檢查體內(nèi)雌激素水平，并使之維持正常水平。但是其應(yīng)用面比較窄，操作復(fù)雜，造模時(shí)間長(zhǎng)，手術(shù)條件要求嚴(yán)格，很難實(shí)際應(yīng)用。
2.2.2 非手術(shù)方法 非手術(shù)方法是指通過(guò)外界壓力致使關(guān)節(jié)應(yīng)力失衡和機(jī)體系統(tǒng)循環(huán)障礙使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生OA樣改變而建立動(dòng)物模型的方法。目前主要有關(guān)節(jié)固定法、關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射法、骨內(nèi)高壓法等。該類(lèi)方法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)適用，不受手術(shù)創(chuàng)傷影響。
2.2.2.1 關(guān)節(jié)固定法 關(guān)節(jié)固定法又叫關(guān)節(jié)制動(dòng)，根據(jù)制動(dòng)部位可分為屈曲位和伸直位制動(dòng)，屈曲位制動(dòng)因限制關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)，減少關(guān)節(jié)附近肌肉和韌帶收縮運(yùn)動(dòng)而導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨的萎縮性變化，伸直位制動(dòng)是使關(guān)節(jié)應(yīng)力發(fā)生改變而產(chǎn)生關(guān)節(jié)軟骨退變，因而臨床上多使用伸直位制動(dòng)法。唐進(jìn)等[23]用管型石膏將兔左后膝關(guān)節(jié)伸直位固定6周后，軟骨組織可見(jiàn)細(xì)胞減少，排列不規(guī)則，部分軟骨表面有破壞，說(shuō)明伸直位關(guān)節(jié)制動(dòng)可導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎病變。田世坤等[24]
將兔膝關(guān)節(jié)伸直位固定，4周后出現(xiàn)軟骨退行性改變的OA癥狀。該方法直接在關(guān)節(jié)外操作，無(wú)手術(shù)創(chuàng)傷影響，操作簡(jiǎn)單，材料易于獲取，適合于外界因素導(dǎo)致的關(guān)節(jié)炎的研究。其缺點(diǎn)是動(dòng)物會(huì)在固定過(guò)程中感覺(jué)不適而撕咬扯壞固定的材料，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果和進(jìn)程，甚至吞服固定材料感到不適，有些材料如石膏等容易導(dǎo)致動(dòng)物死亡，因而模型制備的成功率不高，甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗[25]。所以在選擇該動(dòng)物模型時(shí)要考慮到各種因素，并且在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中盡可能一次性固定完美，避免耗材耗時(shí)。關(guān)節(jié)固定造模成功提示我們，對(duì)于OA的預(yù)防和緩解癥狀，應(yīng)適當(dāng)運(yùn)動(dòng)，避免運(yùn)動(dòng)限制以減輕軟骨
退變。
2.2.2.2 關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射法 關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射藥物可分為化學(xué)類(lèi)、酶類(lèi)、激素類(lèi)等，化學(xué)因子刺激軟骨能快速形成類(lèi)似人OA的終末期軟骨病理改變，常見(jiàn)的注射藥物有膠原酶、碘醋酸鹽、碘乙酸鹽、木瓜蛋白酶、菲律賓素等。其中最常用的是木瓜蛋白酶，關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射能較快誘導(dǎo)OA，較其他注射藥物具有造模成功率高、造模時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)[26]。
嵇波等[27]分別在造模第1，4，7 d將木瓜蛋白酶溶液與半胱氨酸溶液的混合液注射入兔膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)，造模4周后均出現(xiàn)OA病理改變。王平樂(lè)等[28]
將質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.6%的木瓜蛋白酶生理鹽水溶液注射入兔膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)，造模2周后可觀察到關(guān)節(jié)軟骨變薄，表面粗糙甚至有纖維樣改變等關(guān)節(jié)炎病理改變。王婧等[12]在鼠膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入100 μL碘乙酸溶液，造模4周后，軟骨出現(xiàn)明顯損傷；6周后，關(guān)節(jié)面軟骨層腐蝕殆盡。該模型造模時(shí)間短，能在短期內(nèi)形成類(lèi)似人OA的軟骨終末病理改變，是最快形成的OA動(dòng)物模型，其創(chuàng)傷較小，模型穩(wěn)定，容易產(chǎn)生，適用于OA終末期軟骨病理、治療藥物及方法療效研究。臨床上應(yīng)避免此類(lèi)藥物進(jìn)入關(guān)節(jié)腔內(nèi)。但不同動(dòng)物、不同部位所需的藥物劑量不同，實(shí)驗(yàn)中很難掌控，容易給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)一定
誤差。
2.2.2.3 骨內(nèi)高壓法 骨內(nèi)高壓法是骨內(nèi)靜脈受阻導(dǎo)致靜脈淤滯、骨內(nèi)壓升高形成的早中期膝OA。戴七一等[29]結(jié)扎并切斷兔的右側(cè)臀下靜脈，右下腹部的股靜脈和大隱靜脈，造模8周后關(guān)節(jié)面可出現(xiàn)明顯缺損和骨贅形成，達(dá)到OA初中期的變化。黃等[30]分別在股靜脈遠(yuǎn)、近端雙重結(jié)扎造模，造模8周后出現(xiàn)軟骨細(xì)胞排列紊亂，各層細(xì)胞數(shù)明顯減少等OA病理表現(xiàn)。賀文楠等[31]行結(jié)扎股靜脈并切斷腓腸肌內(nèi)外側(cè)頭造模，造模8周后出現(xiàn)滑膜增厚，軟骨纖維化，12周后出現(xiàn)軟骨面剝脫，有骨贅形成，證實(shí)了結(jié)扎股靜脈可誘發(fā)OA樣病變。該方法打破了骨內(nèi)和骨外軟組織血液循環(huán)之間的動(dòng)態(tài)平衡，導(dǎo)致機(jī)體經(jīng)絡(luò)氣血阻滯不通，符合不通則痛的中醫(yī)理論。該模型對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的整體傷害較小，有利于后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究；但是對(duì)結(jié)扎靜脈的肢體傷害較大，可能會(huì)導(dǎo)致傷肢供血不足而壞死，引起動(dòng)物不適甚至死亡，使實(shí)驗(yàn)成功率低，因此該模型對(duì)實(shí)驗(yàn)水平要求較高。臨床上對(duì)于靜脈淤阻形成的OA應(yīng)活血化瘀通絡(luò)，使血液暢行，對(duì)于OA預(yù)防應(yīng)避免血管阻塞。
3 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型
轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型是應(yīng)用基因技術(shù)把外源基因用實(shí)驗(yàn)方法導(dǎo)入動(dòng)物基因組中，并使之在動(dòng)物體內(nèi)表達(dá)或通過(guò)生物學(xué)技術(shù)敲除動(dòng)物基因組中的某些基因造成基因缺陷建立起來(lái)的。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，生物學(xué)基因技術(shù)也迅速飛猛發(fā)展，作為科學(xué)技術(shù)的前沿，轉(zhuǎn)基因技術(shù)也為OA研究提供了新的選擇。目前OA轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型最常選用小鼠，小鼠標(biāo)記基因已得到很好翻譯，而且小鼠又容易成批獲取，費(fèi)用不高，可做大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究。有研究對(duì)OA患者關(guān)節(jié)軟骨進(jìn)行細(xì)胞組織學(xué)分析，在細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞凋亡現(xiàn)象，而且與OA的病變程度相符，繼而深入研究發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)控制OA退變基因調(diào)控軟骨細(xì)胞的凋亡[32-33]。于斐等[34]將小鼠膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶橫斷加內(nèi)側(cè)半月板切除進(jìn)行造模，其中一組小鼠敲除沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）基因，12周后發(fā)現(xiàn)敲除SIRT1基因的模型組比對(duì)照組膝OA軟骨破壞更加明顯。這也為我們提供了思考，可以通過(guò)激活SIRT1基因降低軟骨細(xì)胞凋亡。Liu等[35]發(fā)現(xiàn)，白蘆藜醇還可以通過(guò)激活SIRT1顯著降低一氧化氮合酶及基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，而抑制基質(zhì)金屬蛋白酶后可以減輕對(duì)Ⅱ型膠原的降解，顯著降低因一氧化氮和放射線導(dǎo)致的軟骨細(xì)胞
凋亡。
人類(lèi)與動(dòng)物的基因基本相似，所以利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建立模型研究基因?qū)θ薕A的調(diào)控具有可行性。OA轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型避免了手術(shù)創(chuàng)傷性和直接對(duì)動(dòng)物的損傷，減少了對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。但是每種動(dòng)物基因還是有區(qū)別的，而且目前基因技術(shù)不夠成熟，還不能達(dá)到對(duì)OA具體研究的技術(shù)水平，且成功率不高，實(shí)驗(yàn)成本高，致使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型還不能廣泛運(yùn)用于實(shí)驗(yàn)研究中，所以研究基因?qū)A的影響還有待于基因技術(shù)的提高[36]。
目前，尚需要解決的技術(shù)問(wèn)題有：①選擇合適的目的基因。②治療基因的表達(dá)量有待進(jìn)一步提高。③如何調(diào)節(jié)治療基因的長(zhǎng)期表達(dá)。④基因安全：基因突變、基因污染等。因而實(shí)驗(yàn)中基因?qū)A調(diào)控的研究很少，臨床上尚沒(méi)有通過(guò)基因技術(shù)診療OA，因此基因?qū)A的預(yù)防、延緩和逆D還是非常有研究前景的。特別是隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型的研究將會(huì)更加深入，因此OA的基因研究必將成為科學(xué)工作者的研究熱點(diǎn)。
4 小 結(jié)
隨著人類(lèi)生活水平的提高，人口老年化的加劇，OA發(fā)病率也逐漸增加，嚴(yán)重影響人類(lèi)的健康[37]。目前OA發(fā)病率、致殘率較高，而且臨床上還沒(méi)有一種有效的方法可以治愈，因此OA的研究已經(jīng)刻不容緩。動(dòng)物模型是重現(xiàn)疾病發(fā)病過(guò)程的重要方法，良好的動(dòng)物模型是研究的基礎(chǔ)，更是實(shí)驗(yàn)結(jié)論可靠性的保證。在選擇動(dòng)物模型的同時(shí)，要關(guān)注最新的相關(guān)研究進(jìn)展，結(jié)合實(shí)際情況選擇更快、更廉便、更有效的造模方法，以便能夠在實(shí)驗(yàn)研究中獲得新的突破，為廣大OA患者減輕痛苦[38]。
總的來(lái)說(shuō)，誘發(fā)性動(dòng)物模型是目前最常用的OA動(dòng)物模型，手術(shù)方法因其穩(wěn)定性好，可較短時(shí)間完成造模，目前應(yīng)用最為廣泛。但由于手術(shù)對(duì)關(guān)節(jié)引起的創(chuàng)傷較大，因而不適用于觀察OA早期炎癥介質(zhì)的表達(dá)；而非手術(shù)方法則避免了手術(shù)創(chuàng)傷對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的影響，更符合OA病理過(guò)程，在研究藥物及其療效等方面具有優(yōu)勢(shì)。自發(fā)性動(dòng)物模型與人OA的發(fā)病機(jī)制很相似，模型穩(wěn)定，干擾因素少；但該模型很難控制實(shí)驗(yàn)方向和數(shù)據(jù)，對(duì)實(shí)驗(yàn)要求較高，所以應(yīng)用較少。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型是一個(gè)很有前景的動(dòng)物模型，其更加模仿了人OA，也避免了對(duì)動(dòng)物的損傷；但因技術(shù)不成熟、實(shí)驗(yàn)要求高，暫時(shí)沒(méi)有廣泛運(yùn)用，但未來(lái)是研究OA最佳的動(dòng)物模型。
OA是臨床研究中的一個(gè)難點(diǎn)，需要科研工作者的不斷研究和突破來(lái)認(rèn)識(shí)OA。研究OA的動(dòng)物模型有很多種，每一種都有其優(yōu)缺點(diǎn)。在實(shí)驗(yàn)研究中首先應(yīng)以人為本，然后綜合考慮選擇最適合的動(dòng)物模型，為臨床對(duì)OA的預(yù)防和治療提供更好的理論基礎(chǔ)。
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人文素質(zhì)教育是通過(guò)人文知識(shí)傳授、環(huán)境熏陶以及自身實(shí)踐等方式，培養(yǎng)學(xué)生高尚的道德情操、高品位的人格修養(yǎng)以及創(chuàng)造性思維能力和多維知識(shí)視野。醫(yī)學(xué)是研究人的健康和疾病的科學(xué)，本身就承載著關(guān)愛(ài)生命、救死扶傷的崇高責(zé)任，因此醫(yī)學(xué)教育離不開(kāi)人文素質(zhì)教育。隨著醫(yī)學(xué)模式的轉(zhuǎn)變以及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)教育的要求和社會(huì)發(fā)展的需求，新世紀(jì)培養(yǎng)的合格醫(yī)護(hù)人員也絕不僅僅只是要求掌握牢固的醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)知識(shí)，還必須具備良好的醫(yī)學(xué)人文素質(zhì)。醫(yī)學(xué)人文素質(zhì)教育是對(duì)醫(yī)學(xué)生進(jìn)行素質(zhì)和品格的教育，從而更好的培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生熱愛(ài)生命、尊重病人、救死扶傷的內(nèi)在品質(zhì)。作為醫(yī)學(xué)院校教師，如何在各學(xué)科的教學(xué)過(guò)程中適時(shí)、適當(dāng)?shù)娜谌肴宋乃刭|(zhì)教育，使醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)知識(shí)與人文精神相互滲透，更好的提高和培養(yǎng)師生的綜合素質(zhì)，值得每個(gè)教師去探索與實(shí)踐。生理學(xué)作為一門(mén)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課，在新生入學(xué)的第一學(xué)期就將開(kāi)課。作為生理學(xué)教師應(yīng)當(dāng)抓住這一重要時(shí)期，在醫(yī)學(xué)教育的早期，就及早有效的在教學(xué)過(guò)程中多方面來(lái)貫穿和滲入醫(yī)學(xué)人文素質(zhì)教育。通過(guò)該研究者在多年教學(xué)活動(dòng)中的探索與實(shí)踐，認(rèn)為可從以下幾個(gè)方面來(lái)著手進(jìn)行。
1 努力提高教師自身素質(zhì)是根本
“本立而道生，加強(qiáng)人文教育，關(guān)鍵在于提高教師的素質(zhì)[1]。”素質(zhì)教育必須依靠高素質(zhì)的教師來(lái)完成，只有高素質(zhì)的教師才可能培養(yǎng)出高素質(zhì)的學(xué)生。正所謂“榜樣的力量是無(wú)窮的”，教師的榜樣示范作用對(duì)學(xué)生的影響不可小覷。就一堂課而言，教師可通過(guò)以下幾個(gè)方面潛移默化的培養(yǎng)學(xué)生的人文素質(zhì)。首先，教師必須嚴(yán)格遵守教學(xué)紀(jì)律，為人師表，不遲到早退曠工。不難想象，一個(gè)經(jīng)常不遵守教學(xué)紀(jì)律的老師如何能培養(yǎng)出高素質(zhì)的學(xué)生。其次，始終以飽滿的教學(xué)熱情和嚴(yán)肅認(rèn)真的教學(xué)態(tài)度上好每一節(jié)課。教師在講臺(tái)上飽滿的教學(xué)熱情，可以體現(xiàn)出對(duì)本職工作的熱愛(ài)，可以感染學(xué)生，有助于培養(yǎng)學(xué)生對(duì)職業(yè)的熱愛(ài)。教師嚴(yán)肅認(rèn)真的教學(xué)態(tài)度，可讓學(xué)生感受到醫(yī)學(xué)知識(shí)的科學(xué)與嚴(yán)謹(jǐn)，有助于培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。再次，注意維持課堂紀(jì)律，及時(shí)制止課堂上的不良現(xiàn)象。這樣既有利于順利的進(jìn)行生理學(xué)教學(xué)，又可幫助學(xué)生樹(shù)立遵守紀(jì)律的基本素質(zhì)，還可以于潛移默化之中培養(yǎng)學(xué)生勇于同不良現(xiàn)象作斗爭(zhēng)的道德品質(zhì)。最后，一定要真誠(chéng)、耐心、細(xì)致的對(duì)待和解答課堂上學(xué)生提出的每一個(gè)問(wèn)題，潛移默化的培養(yǎng)學(xué)生真誠(chéng)、耐心與人溝通交流的醫(yī)學(xué)人文素質(zhì)。教師應(yīng)清楚認(rèn)識(shí)到，課堂教學(xué)不僅僅是傳授醫(yī)學(xué)知識(shí)的場(chǎng)所，更應(yīng)作為育人的渠道，將人文精神教育融匯于醫(yī)學(xué)課程教學(xué)之中，有效地促進(jìn)醫(yī)學(xué)生人文精神的培養(yǎng)。教師對(duì)學(xué)生的人文素質(zhì)培養(yǎng)絕不僅限于課堂，課后教師還應(yīng)多與學(xué)生交流、溝通。教師在與學(xué)生的相處中不可因其身份而高高在上，要平等真誠(chéng)的對(duì)待學(xué)生，真情實(shí)意的關(guān)愛(ài)學(xué)生。深入學(xué)生中，了解他們的學(xué)習(xí)、生活及面臨的困難，并予以力所能及的幫助。教師通過(guò)自身的修養(yǎng)、真誠(chéng)關(guān)愛(ài)會(huì)潛移默化地影響學(xué)生并內(nèi)化到學(xué)生的心靈中去，這對(duì)培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生關(guān)心人、尊重人、理解人和服務(wù)人思想觀念的形成具有重要的作用。因此，要在教學(xué)中融入人文素質(zhì)教育，努力提高教師自身素質(zhì)是的根本。
2 充分發(fā)掘生理學(xué)中所蘊(yùn)含的人文精神，適時(shí)與教學(xué)內(nèi)容相結(jié)合
（1）講授生理學(xué)發(fā)展史進(jìn)行人文素質(zhì)教育。生理學(xué)是研究機(jī)體及其各組成部分正常功能活動(dòng)規(guī)律的一門(mén)學(xué)科，其發(fā)展歷程中蘊(yùn)含著豐富的人文內(nèi)涵。教師在講授生理學(xué)專(zhuān)業(yè)知識(shí)同時(shí)，也要注意相關(guān)研究背景的講授。例如，在介紹第四章血液循環(huán)時(shí)，可介紹英國(guó)的Harvey醫(yī)生如何通過(guò)鍥而不舍的反復(fù)實(shí)驗(yàn)研究血液循環(huán)。在介紹第六章消化吸收時(shí)，可介紹2005年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者，澳大利亞科學(xué)家羅賓?沃倫和巴里?馬歇爾發(fā)現(xiàn)幽門(mén)螺旋桿菌的故事；還可介紹林可勝等人對(duì)胃運(yùn)動(dòng)和分泌機(jī)制進(jìn)行的系統(tǒng)研究，以及他們?nèi)〉玫某删汀Ｔ诮榻B第十一章內(nèi)分泌時(shí)，可介紹1965年我國(guó)科學(xué)家首次合成了結(jié)晶牛胰島素等。教師在課堂上講解專(zhuān)業(yè)知識(shí)同時(shí)，給學(xué)生講述這些真實(shí)的事例，介紹杰出的科學(xué)家為生理學(xué)發(fā)展，為人類(lèi)健康所做出的杰出貢獻(xiàn)，將人文教育適當(dāng)、適時(shí)地融入到生理學(xué)教學(xué)過(guò)程中，可以于無(wú)形中培養(yǎng)學(xué)生高度的責(zé)任感和使命感，以及無(wú)私奉獻(xiàn)的職業(yè)精神。同時(shí)還能創(chuàng)造生動(dòng)活潑的學(xué)習(xí)氛圍，提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。
（2）結(jié)合生理學(xué)相應(yīng)知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行人文素質(zhì)教育。例如，在血液一章中將介紹血量占體重的7%～8%，即每公斤體重有70～80mL血液，正常人體一次失血不超過(guò)總血量的10%，由于機(jī)體的代償功能，可以很快恢復(fù)，不會(huì)對(duì)身體造成影響[2]。針對(duì)社會(huì)上流傳的獻(xiàn)血有害健康的種種傳言，給學(xué)生們介紹獻(xiàn)血的條件、要求、標(biāo)準(zhǔn)及獻(xiàn)血的意義。告訴學(xué)生無(wú)償獻(xiàn)血對(duì)正常人體是沒(méi)有危害的，是一種無(wú)私奉獻(xiàn)、救死扶傷的崇高行為，是愛(ài)心奉獻(xiàn)的體現(xiàn)。在介紹血型及輸血時(shí)，可給學(xué)生介紹臨床工作中的“三查七對(duì)”及其重要性。在介紹心輸出量的影響因素時(shí)，應(yīng)當(dāng)給學(xué)生強(qiáng)調(diào)在臨床上給病人輸液過(guò)程中，控制補(bǔ)液速度補(bǔ)液量，嚴(yán)密觀察病人反應(yīng)的重要性。通過(guò)介紹相關(guān)知識(shí)，一方面可讓學(xué)生對(duì)今后將從事的職業(yè)有一定認(rèn)識(shí)，同時(shí)還可以教育學(xué)生在工作中應(yīng)樹(shù)立一絲不茍、認(rèn)真負(fù)責(zé)的工作作風(fēng)，真正做到“關(guān)愛(ài)生命”和“以人為本”。
3 充分利用生理學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行人文素質(zhì)教育
（1）尊重生命，善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。生理學(xué)是一門(mén)實(shí)驗(yàn)性科學(xué)，必然離不開(kāi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。哲學(xué)家們注意到“對(duì)動(dòng)物的殘酷行為會(huì)使人變得殘暴，而對(duì)動(dòng)物的關(guān)愛(ài)也會(huì)使人變得崇高而更富人性”[3]。因此，在對(duì)待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的態(tài)度問(wèn)題上，教師從一開(kāi)始就要向?qū)W生傳遞“敬畏生命”、“善待和科學(xué)使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物”的理念。并將這些理念貫穿到實(shí)驗(yàn)的每一個(gè)步驟中。例如用家兔來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，一開(kāi)始就要告知正確的捕捉方法，而不是簡(jiǎn)單粗暴的的揪住雙耳，增加兔子的疼痛和不適。在計(jì)算麻醉劑量時(shí)，一定要核算清楚，避免因麻醉過(guò)量而導(dǎo)致動(dòng)物死亡，或因麻醉不足而加重動(dòng)物的疼痛。在手術(shù)操作過(guò)程中要?jiǎng)t應(yīng)盡量做到細(xì)心、謹(jǐn)慎，避免因操作不慎而導(dǎo)致動(dòng)物死亡。試驗(yàn)結(jié)束后，要求學(xué)生克服害怕心理，妥善處理動(dòng)物尸體。在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課程中注意不斷滲透人文關(guān)懷精神，可以使學(xué)生獲得醫(yī)學(xué)人文精神的熏陶，從而培養(yǎng)學(xué)生對(duì)生命的敬畏和尊重；深刻體會(huì)將來(lái)所從事的是“健康所系、性命相托”的神圣職業(yè)。
（2）分工協(xié)作，培養(yǎng)團(tuán)隊(duì)精神。臨床工作的協(xié)作性和整體性都很強(qiáng)要完成對(duì)患者生理、心理、精神及社會(huì)文化等全方位的整體護(hù)理，團(tuán)隊(duì)精神顯得十分重要[4]。現(xiàn)在的學(xué)生大多數(shù)是獨(dú)生子女，在家里大多是唯我獨(dú)尊，缺乏與人合作的團(tuán)隊(duì)意識(shí)，對(duì)于今后的臨床工作是不利的。以往還曾有過(guò)個(gè)別同學(xué)實(shí)驗(yàn)課不愿動(dòng)手，不愿參與到實(shí)驗(yàn)中的不良現(xiàn)象。因此在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，應(yīng)想法培養(yǎng)學(xué)生與他人合作完成實(shí)驗(yàn)任務(wù)的團(tuán)隊(duì)意識(shí)和參與意識(shí)。首先在實(shí)驗(yàn)之前將一個(gè)班級(jí)的同學(xué)分為幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組并指定該組負(fù)責(zé)人，并告知一個(gè)組就是一個(gè)團(tuán)隊(duì)，該組的實(shí)驗(yàn)成功與否需要大家的通力合作。然后在講解實(shí)驗(yàn)步驟時(shí)，具體說(shuō)明該如何正確分工，如何操作，依靠團(tuán)隊(duì)的力量去獲得最后實(shí)驗(yàn)的成功。最后還可在小組之間進(jìn)行比賽，看哪組的實(shí)驗(yàn)做得好，實(shí)驗(yàn)結(jié)論分析正確。這樣可讓團(tuán)隊(duì)里的每一個(gè)人都積極參與到實(shí)驗(yàn)的環(huán)節(jié)中，并且人人都有事做，最后一起去分享試驗(yàn)成功帶來(lái)的愉悅和成功感。如此可讓學(xué)生體會(huì)團(tuán)隊(duì)合作的重要性和培養(yǎng)參與意識(shí)。
（3）通過(guò)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。醫(yī)學(xué)是一門(mén)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)，必須要有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度，否則可能會(huì)造成不可挽回的后果，正所謂“失之毫厘，謬之千里”。針對(duì)個(gè)別同學(xué)學(xué)習(xí)態(tài)度散漫，做事馬虎、不認(rèn)真，甚至出現(xiàn)修改實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果等不良的現(xiàn)象。在每一次實(shí)驗(yàn)前都要求必須要先預(yù)習(xí)，了解實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、步驟，做到心中有數(shù)。在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之前，務(wù)必一步步詳細(xì)講解實(shí)驗(yàn)步驟及實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，提醒同學(xué)認(rèn)真謹(jǐn)慎進(jìn)行進(jìn)行每一步操作，如使用藥物前一定要看清標(biāo)簽，盡量把失誤降到最低。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中認(rèn)真觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，認(rèn)真讀取各項(xiàng)數(shù)值時(shí)，一定要先看清單位和數(shù)量級(jí)，數(shù)值一定要讀準(zhǔn)。總而言之，在實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格要求，力求培養(yǎng)學(xué)生認(rèn)真嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的工作態(tài)度。
外科手術(shù)學(xué)是聯(lián)系基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的重要橋梁課，是一門(mén)實(shí)踐性和操作性很強(qiáng)的學(xué)科。提高手術(shù)學(xué)的教學(xué)質(zhì)量，更好地適應(yīng)新形式下培養(yǎng)高素質(zhì)人才的要求，對(duì)教與學(xué)提出了更高的要求，對(duì)提高教與學(xué)的時(shí)效性、實(shí)用性，具有積極意義。
1增強(qiáng)學(xué)生對(duì)外科實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的認(rèn)識(shí)醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是外科學(xué)教學(xué)中不可缺少的重要環(huán)節(jié)，而由于手術(shù)實(shí)驗(yàn)課的時(shí)間長(zhǎng)、次數(shù)多、學(xué)生技能不熟練等因素，常導(dǎo)致學(xué)生在動(dòng)物身上的劣性行為。因此將人文理念融入教學(xué)之中，讓學(xué)生充分認(rèn)識(shí)到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的偉大，手術(shù)過(guò)程動(dòng)作要輕柔細(xì)心，避免造成不必要的損傷。對(duì)于科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度的樹(shù)立，良好的職業(yè)行為和習(xí)慣的培養(yǎng)大有裨益［1］。
2強(qiáng)調(diào)無(wú)菌技術(shù)和手術(shù)基本操作技術(shù)
2.1無(wú)菌觀念的培養(yǎng)在無(wú)菌技術(shù)的教學(xué)過(guò)程中，要求要非常嚴(yán)格，并貫穿整個(gè)教學(xué)過(guò)程中，以便培養(yǎng)學(xué)生養(yǎng)成良好的習(xí)慣。我們注重強(qiáng)調(diào)以下幾點(diǎn)：①老師必須以身作則，比如：必須戴口罩、帽子才能進(jìn)手術(shù)室，親自示范外科洗手法，穿手術(shù)衣，戴手套，無(wú)菌器械或用品的取用與傳遞等，并指出常見(jiàn)的錯(cuò)誤；②發(fā)現(xiàn)學(xué)生的錯(cuò)誤必須立即指出和糾正，督促學(xué)生養(yǎng)成良好的習(xí)慣，且在每節(jié)課完后進(jìn)行相應(yīng)的總結(jié)；③將無(wú)菌技術(shù)納入操作考試內(nèi)容，并向?qū)W生指出每一項(xiàng)的得失分要點(diǎn)。
2.2基本操作能力的培養(yǎng)切開(kāi)、止血、結(jié)扎、縫合四項(xiàng)是最主要的基本操作技術(shù)，也是手術(shù)學(xué)基礎(chǔ)教學(xué)中學(xué)生能力培養(yǎng)的重點(diǎn)。手術(shù)基本操作的熟練程度主要體現(xiàn)在“穩(wěn)、準(zhǔn)、輕、快”四個(gè)方面：①穩(wěn)，即平穩(wěn)，包括術(shù)者情緒上的穩(wěn)和操作上的穩(wěn)，使每一個(gè)手術(shù)步驟扎扎實(shí)實(shí)，整個(gè)手術(shù)過(guò)程有條不紊；②準(zhǔn)，即準(zhǔn)確，每一個(gè)操作步驟都要準(zhǔn)確無(wú)誤，特別是解剖血管神經(jīng)不能有半點(diǎn)差錯(cuò)；③輕，指輕柔和靈巧，是在穩(wěn)的基礎(chǔ)上的輕，要與靈巧密切配合，避免手術(shù)中用力猛、動(dòng)作粗暴而引起嚴(yán)重的組織損傷；④快，即反應(yīng)靈敏和手術(shù)進(jìn)程快。反應(yīng)靈敏指手術(shù)中出現(xiàn)意外情況時(shí)，必須當(dāng)機(jī)立斷、迅速做出決策。手術(shù)進(jìn)程快指手術(shù)操作中每一個(gè)具體動(dòng)作在穩(wěn)的基礎(chǔ)上要有一定速度，但這種速度一定要建立在高質(zhì)量的基礎(chǔ)之上，不要盲目追求［1］。
3傳統(tǒng)教學(xué)與多媒體教學(xué)
有機(jī)結(jié)合多媒體教學(xué)可克服傳統(tǒng)教學(xué)視野小等的局限，通過(guò)圖形、動(dòng)畫(huà)及聲音等，還可以提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。同時(shí)，多媒體教學(xué)還具有傳統(tǒng)教學(xué)所不可比擬的優(yōu)勢(shì)，如可隨時(shí)返回重看等，有助于提高課堂教學(xué)效果。傳統(tǒng)教學(xué)方式可提高學(xué)生的直觀感受，對(duì)于以后的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)有更深刻的印象。兩者相結(jié)合，側(cè)重多媒體的應(yīng)用，更能促進(jìn)教學(xué)質(zhì)量的提高。
4注重設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用
在進(jìn)行教學(xué)過(guò)程中，在學(xué)生已經(jīng)掌握一些基本操作和無(wú)菌觀念的基礎(chǔ)上，加強(qiáng)設(shè)計(jì)性試驗(yàn)的應(yīng)用，不僅可以培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度，加深知識(shí)的記憶，促進(jìn)對(duì)于臨床的認(rèn)識(shí)，而且對(duì)于學(xué)生整體觀念和團(tuán)隊(duì)精神的樹(shù)立也是非常重要的。具體方式為：將學(xué)生分成實(shí)驗(yàn)小組，在實(shí)驗(yàn)前一周，將有關(guān)病歷資料和需解決的問(wèn)題打印成文，分發(fā)給學(xué)生，說(shuō)明將要實(shí)施的教學(xué)程序，小組自學(xué)、討論。需解決的問(wèn)題有：①陳述診斷、診斷依據(jù)、鑒別診斷、診療計(jì)劃；②將洗手、消毒、鋪單、切開(kāi)、止血、分離、暴露、結(jié)扎、縫合等外科手術(shù)學(xué)基礎(chǔ)內(nèi)容貫穿在實(shí)驗(yàn)實(shí)施過(guò)程中；③書(shū)術(shù)記錄單，組織學(xué)生觀看手術(shù)錄像，要求以組為單位寫(xiě)出實(shí)施操作步驟；并確定組內(nèi)成員在實(shí)驗(yàn)實(shí)施過(guò)程中扮演的角色，然后老師啟發(fā)指導(dǎo)，糾正不足之處，最后進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)［2］。
5考核方式改革
考試成績(jī)由三部分組成：平時(shí)成績(jī)(10%)，操作考試成績(jī)(20%)，理論考試成績(jī)(70%)。結(jié)合學(xué)生存在的問(wèn)題，如：遲到、時(shí)操作中不嚴(yán)格要求自己等情況可扣平時(shí)成績(jī)或者操作考試成績(jī)，平時(shí)成績(jī)針對(duì)學(xué)生的組織紀(jì)律性進(jìn)行考核。操作考試內(nèi)容可分為兩組，考前由學(xué)生隨機(jī)抽簽決定考試內(nèi)容。考試的目的是為了讓學(xué)生能盡可能地掌握教學(xué)的內(nèi)容，因此對(duì)打結(jié)、穿衣、消毒鋪巾、器械認(rèn)識(shí)等內(nèi)容的要點(diǎn)要為學(xué)生進(jìn)行復(fù)習(xí)，并在操作考試結(jié)束后，進(jìn)行總結(jié)點(diǎn)評(píng)［3］。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，教師要嚴(yán)格要求學(xué)生把實(shí)驗(yàn)室當(dāng)成臨床手術(shù)室，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要不斷地巡回指導(dǎo)學(xué)生，及時(shí)發(fā)現(xiàn)學(xué)生操作中存在的問(wèn)題并加以糾正。全面提高手術(shù)學(xué)教學(xué)質(zhì)量，對(duì)于優(yōu)秀的醫(yī)學(xué)生的培養(yǎng)具有舉足輕重的作用，需要在不斷的實(shí)踐中總結(jié)提高。
參考文獻(xiàn)
1］ 張集建，左艷芳.淺談手術(shù)學(xué)教學(xué)中的互動(dòng)作用［J］.局解手術(shù)學(xué)雜志，2006，15（1）：46.
【關(guān)鍵詞】 洋參御唐丸；血脂；高密度脂蛋白；低密度脂蛋白；大鼠
隨著我國(guó)人民生活水平的提高，生活方式的改變，糖尿病的發(fā)病率呈居高趨勢(shì)，通過(guò)糖尿病病因病機(jī)的分析和臨床新藥的研發(fā)，對(duì)提高人口素質(zhì)、解決糖尿病患者的痛苦，有著極為重要的意義。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康Wistar大鼠120只，雌雄各半。體重(200±20)g，由遼寧雙益實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
1.2 藥物與試劑［1］ 洋參御唐丸(西洋參、龜板、山藥、鹿茸、玉竹、葛根、烏梅、黃芪、麥冬、山茱萸等)由黑龍江省中西醫(yī)結(jié)合研究所制劑室生產(chǎn))；西藥對(duì)照藥：二甲雙胍，由河北文成藥物有限公司提供；中藥對(duì)照藥：糖尿樂(lè)膠囊，由廣東萬(wàn)基藥業(yè)有限公司提供；鏈脲佐菌素(STZ)由AIGMA CHEMICALCO USA提供；低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定試劑盒(PVS沉淀法)；由浙江東鷗生物工程有限公司提供；高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定試劑盒(PTA-Mg)：由浙江東鷗生物工程有限公司提供。
1.3 飼料配方 基礎(chǔ)飼料：按AOAC標(biāo)準(zhǔn)配制(豆餅25%、小麥粉19%、玉米粉15%、大米粉20%、麩皮15%、魚(yú)粉5%、骨粉3%、酵母1%、食鹽1%、魚(yú)肝油1%)由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。高糖高脂飼料(膽固醇2.5%、蛋黃粉5%、豬油10%、蔗糖20%、基礎(chǔ)飼料62.5%)：由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器 TGL-16G臺(tái)式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠制造；臺(tái)式離心機(jī)5417C型，德國(guó)ERPENDORF公司；722型光柵可見(jiàn)分光光度計(jì)，美國(guó)PHAMEACIA公司；紫外分光光度計(jì)，美國(guó)Phamacia公司；AL204型電子天平：梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；TD型電子天平：沈陽(yáng)龍騰電子稱(chēng)量?jī)x器有限公司；強(qiáng)生穩(wěn)毫血糖儀：美國(guó)強(qiáng)生公司生產(chǎn)；DZG-6020型真空干燥箱：上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；超低溫冰箱：SANYO ULTRALOW(Japan)。
1.5 實(shí)驗(yàn)方法
1.5.1 分組 120只Wistar大鼠，雌雄各半。分為空白對(duì)照組15只予基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)，余105只為造模給予高糖高脂飼料(4周)，4周后禁食、禁水12 h。1次性腹腔注射STZ溶液(STZ溶液為STZ干粉和0.1 mmol/L，pH4.5的檸檬酸鈉—檸檬酸緩沖液在冰浴中新鮮配置，濃度為1%的溶液20 mg/L，調(diào)pH值至4.21)每只大鼠按25 mg/kg注射，72 h后測(cè)得空腹血糖。以空腹血糖大于16.7 mmol/L為造模成功共造模成功90只，隨機(jī)分為6組(洋參御唐丸高、中、低劑量組、西藥對(duì)照組、中藥對(duì)照組、模型對(duì)照組)此后繼續(xù)給予高脂飲食。
1.5.2 給藥 洋參御唐丸按5.4 g/kg、2.7 g/kg、1.35 g/kg高、中、低劑量給藥，西藥對(duì)照組按0.1125 g/kg給藥，中藥對(duì)照組按2.43 g/kg給藥，模型對(duì)照組與空白對(duì)照組灌胃同體積生理鹽水。連續(xù)給藥4周。結(jié)束后禁食12 h，以摘取眼球的方法取血，分裝試管。4℃以下3000 min離心10 min。取血清在-20℃冷凍保存。血清按試劑盒操作方法處理后測(cè)得高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇數(shù)值。
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，數(shù)據(jù)處理用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 13.0進(jìn)行成組設(shè)計(jì)t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 洋參御唐丸對(duì)糖尿病大鼠血脂的影響（略）
注：與空白對(duì)照組比較 P＜0.05；與模型對(duì)照組比較#P＜0.05；##P＜0.01
3 結(jié)論
近年來(lái)對(duì)脂肪細(xì)胞內(nèi)分泌學(xué)特性的新發(fā)現(xiàn)及對(duì)2型糖尿病脂代謝異常的新認(rèn)識(shí)，使血脂異常與2型糖尿病的關(guān)系由既往的相關(guān)關(guān)系上升為病因發(fā)病學(xué)關(guān)系。根據(jù)NCEP標(biāo)準(zhǔn)，有40%的2型糖尿病患者有血脂異常，其血脂異常的特點(diǎn)是TG和LDL增高，HDL-C降低的三聯(lián)癥。英國(guó)前瞻性糖尿病研究(UKPDS)證實(shí)，只有控制血壓、血脂，同時(shí)控制血糖，才能綜合控制糖尿病及心血管病的發(fā)生和發(fā)展［1］。本研究表明，洋參御唐丸能降低STZ-DM大鼠LDL-C的血脂濃度，升高STZ-DM大鼠HDL-C的血脂濃度，并且療效與中西藥對(duì)照組相當(dāng)。
洋參御唐丸中西洋參補(bǔ)氣養(yǎng)陰而不生火，黃芪補(bǔ)氣升陽(yáng)健脾促進(jìn)運(yùn)化共為君藥；龜板滋陰潛陽(yáng)，玉竹滋陰潤(rùn)肺，女貞子滋陰補(bǔ)腎，山藥滋補(bǔ)脾陰，麥冬養(yǎng)肺胃之陰共為臣藥；山茱萸補(bǔ)肝腎養(yǎng)精血，白芍、烏梅酸甘化陰，葛根生津止渴，鹿茸壯腎益精，配伍精當(dāng)，全面調(diào)節(jié)糖尿病人的內(nèi)分泌代謝障礙，從而減輕脂類(lèi)代謝的紊亂，延緩并減輕并發(fā)癥的發(fā)生。
參考文獻(xiàn)
［1］UKPDS Group:Tight blood pressure control and risk of macro-micro-vascular complications in type 2 diabetes［J］.BMJ，1998，317:731-720.
［2］范冠杰.專(zhuān)科專(zhuān)病名醫(yī)臨證經(jīng)驗(yàn)叢書(shū)之糖尿病［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:65.
[關(guān)鍵詞] 卵巢早衰；卵巢低反應(yīng)；慢性應(yīng)激；小鼠
[中圖分類(lèi)號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2017）06（b）-0019-04
Study on establishment of premature ovarian function and poor ovarian response mice model through chronic stress
SHEN Kejia SHEN Zouqinxuan LIU Biyuan FU Lingmei XIONG Jie
TCM University of Hu'nan， Hu'nan Province， Changsha 410208， China
[Abstract] Objective To explore the method of chronic immobilization stress which can establish the mice model of premature ovarian function （POF） and poor ovarian response （POR）. Methods Self-made brakes were used to make chronic stress stateon SPFICR female mice， during the general situation， body weight and estrous cycle of these mice were observed. The microstimulated super ovulation was used on the mice after immobilization， and the follicles of the mice were counted respectively on the third day of superovulation and 24 h after HCG injection. Results Compared with those in the non-immobilization mice， the general situation such as eating， hair color and so on were worse， the body weight significantly reduced （P < 0.05）， and the number of abnormal estrous cycle distinct increased （P < 0.05） in the immobilization mice during the braking period. But there was no obvious difference of the follicle number between the immobilization mice and the non-immobilization mice at various levels on the third day of superovulation and 24 h after HCG injection （P > 0.05）. Conclusion Chronic immobilization stress can causethe disorder or degradation of ovarian function，and further study is needed to find whetherit can cause premature ovarian function and poor ovarian response.
[Key words] Premature ovarian function； Poor ovarian response； Chronic stress； Mice
o助生殖超排卵過(guò)程中卵巢對(duì)促性腺激素的刺激反應(yīng)低下稱(chēng)為卵巢低反應(yīng)（POR），病因與年齡、遺傳和免疫、手術(shù)和感染、環(huán)境等因素相關(guān)，還有一類(lèi)無(wú)明確病因可循，可能是因長(zhǎng)期壓力應(yīng)激導(dǎo)致卵巢功能衰退（特發(fā)性POF）而引起的POR在臨床也越發(fā)多見(jiàn)[1-4]。目前基礎(chǔ)研究大多為化療藥物、免疫及半乳糖等所致POF動(dòng)物模型，少見(jiàn)特發(fā)性POF/POR動(dòng)物模型[5-9]。本實(shí)驗(yàn)擬在模擬人類(lèi)特發(fā)性POF的發(fā)病經(jīng)過(guò)，用重復(fù)制動(dòng)造成小鼠慢性應(yīng)激狀態(tài)，并在制動(dòng)結(jié)束后進(jìn)行超排卵，探討是否能建立POF/POR小鼠模型。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
6周齡健康SPF級(jí)ICR雌性小鼠80只和成年雄性小鼠20只，體重為22～25 g，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（湘）2011-0003。實(shí)驗(yàn)遵循湖南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保護(hù)和使用指南，并經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
1.1.2 超排卵藥物
來(lái)曲唑片（LE）：江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)H19991001。注射用尿促性腺激素（Gn）：麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)H10940097；注射用絨毛膜促性腺激素（HCG）：麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)H44020673。
1.1.3 儀器
自制制動(dòng)器：用50 mL塑料注射器改造而成，管壁上每隔5 mm左右用燒紅的探針戳穿，形成直徑約2 mm的小孔。TP-5000游锍浦仄鰨合嬉翹炱揭瞧鞒В還庋顯微鏡：日本Olympus。
1.1.4 試劑
二甲苯，100%、95%、80%、70%乙醇，蘇木素，1%的鹽酸乙醇，1%的稀氨水，伊紅，中性樹(shù)膠，瑞氏染液。
1.2 方法
1.2.1 分組及制動(dòng)
6周齡ICR雌性小鼠80只，正常喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為四組，分別為模型組、西藥組、中藥組、正常對(duì)照組。稱(chēng)量并記錄體重。模型組、西藥組、中藥組小鼠每上午放入制動(dòng)器內(nèi)制動(dòng)，共制動(dòng)14 d；每天制動(dòng)時(shí)間從3 h開(kāi)始，每天延長(zhǎng)0.5 h，至最長(zhǎng)制動(dòng)時(shí)間為每天6 h，造成小鼠應(yīng)激狀態(tài)；正常對(duì)照組不制動(dòng)。制動(dòng)第10天開(kāi)始至制動(dòng)第14天結(jié)束，每天陰道涂片并用瑞氏染色觀察小鼠動(dòng)情周期。正常的小鼠動(dòng)情周期為4～5 d，有四期規(guī)律的變化，分別為動(dòng)情前期（17～21 h）、動(dòng)情期（9～15 h）、動(dòng)情后期（10～14 h）和動(dòng)情間期（60～70 h）。若發(fā)現(xiàn)動(dòng)情周期紊亂無(wú)規(guī)律交替，或在某期明顯延長(zhǎng)或持續(xù)停留在間期記為動(dòng)情周期異常，提示小鼠卵巢功能紊亂和/或減退[10-11]。第14天制動(dòng)結(jié)束后再次稱(chēng)量所有小鼠體重。
1.2.2 給藥
1.2.2.1 各組小鼠均在第15天啟動(dòng)微刺激超排卵，具體方案為L(zhǎng)E+Gn+HCG，即先用LE 0.013 mg/d每日灌胃1次，共5 d；接下來(lái)用Gn 0.39 U/d每日腹腔注射1次共7 d，使用Gn最后1天傍晚雌雄鼠合籠，次日晨檢查陰栓，有陰栓者腹腔注射1次HCG（25.71 U/次）。
1.2.2.2 西藥組和中藥組在制動(dòng)期間分別使用干預(yù)卵巢低反應(yīng)的西藥和中藥（西藥組：第8～19天，每天1次生長(zhǎng)激素0.01 U/d腹腔注射，第15天開(kāi)始至處死日每天1次阿司匹林0.2 mg/d灌胃；中藥組第1天開(kāi)始至處死日每天1次護(hù)卵湯0.597 g/d灌胃，護(hù)卵湯組配方參考文獻(xiàn)[12]。模型組和正常對(duì)照組未使用干預(yù)治療藥物。
1.2.2.3 各組小鼠每天在相同時(shí)間段進(jìn)行相應(yīng)的藥物灌胃及腹腔注射，不使用藥物的小鼠用生理鹽水代替藥物，保證組間灌胃及腹腔注射操作一致。
1.2.3 標(biāo)本采集
每組小鼠在超排卵啟動(dòng)第3天上午脫頸椎處死10只，開(kāi)腹取出卵巢。每組余下雌鼠在注射HCG前1 d晚上與雄鼠以2∶1比例合籠過(guò)夜，次日早晨7：00檢查雌鼠，將有陰栓的雌鼠注射HCG，24 h后脫頸椎處死，開(kāi)腹取出卵巢。沒(méi)有陰栓的雌鼠繼續(xù)與雄鼠以2∶1比例合籠過(guò)夜，直至發(fā)現(xiàn)陰栓后，再按上述方法處理獲取卵巢。
1.2.4 卵泡計(jì)數(shù)
每組隨機(jī)8只小鼠的一側(cè)卵巢組織（左右隨機(jī)）用10%甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片后HE染色，高倍鏡下觀察。每組隨機(jī)選擇8張切片（不含連續(xù)切片），每張切片選取3個(gè)不同區(qū)域計(jì)數(shù)，將每組各張切片3個(gè)區(qū)域計(jì)數(shù)的各級(jí)卵泡數(shù)累積為每組原始卵泡、初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡、竇卵泡的總個(gè)數(shù)。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 一般情況觀察
正常對(duì)照組從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始到實(shí)驗(yàn)結(jié)束外觀及活動(dòng)狀態(tài)均無(wú)異常，體重適度增加。其他組小鼠造模開(kāi)始后逐漸出現(xiàn)進(jìn)食減少，二便減少，行動(dòng)遲緩，四肢無(wú)力，毛色晦暗無(wú)光并出現(xiàn)不同程度的脫落，制動(dòng)結(jié)束后明顯較正常對(duì)照組瘦弱；制動(dòng)結(jié)束后到實(shí)驗(yàn)結(jié)束這段時(shí)間這些小鼠逐漸恢復(fù)進(jìn)食及二便，行動(dòng)變活潑，毛色恢復(fù)光澤，體重增加。
2.2 各組小鼠體重變化
在各組小鼠開(kāi)始制動(dòng)前、完全結(jié)束制動(dòng)后、HCG 24 h后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)稱(chēng)量各組小鼠的體重。組間比較結(jié)果顯示：完全結(jié)束制動(dòng)后模型組、西藥組、中藥組小鼠體重均低于正常對(duì)照組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），提示制動(dòng)應(yīng)激對(duì)小鼠體重造成不良影響；HCG 24 h后西藥組和中藥組小鼠體重低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01或P < 0.05）。組內(nèi)比較結(jié)果顯示：各組小鼠隨時(shí)間推移在制動(dòng)前、完全結(jié)束制動(dòng)后、HCG 24 h后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)體重逐步增加，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。見(jiàn)表1。
2.3各組小鼠動(dòng)情周期變化
至制動(dòng)結(jié)束，模型組、西藥組、中藥組發(fā)生動(dòng)情周期異常的小鼠明顯多于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01或P < 0.05），提示制動(dòng)實(shí)驗(yàn)使小鼠處于應(yīng)激狀態(tài)對(duì)卵巢功能有不良影響。見(jiàn)表2。
2.4 各組小鼠卵巢組織內(nèi)各級(jí)卵泡數(shù)量及比例
分別在超排卵第3天和HCG 24 h后獲取小鼠卵巢組織，結(jié)果顯示：四組小鼠卵巢組織內(nèi)各級(jí)卵泡所占比例差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表3～4。
3 討論
現(xiàn)代社會(huì)女性身兼家庭工作多重角色，承受的壓力越來(lái)越大，長(zhǎng)期焦慮、憂郁、憤怒等負(fù)面情緒作為應(yīng)激，不斷刺激下丘腦-垂體-卵巢軸，引起神經(jīng)內(nèi)分泌及卵巢功能紊亂，卵巢功能的受損引起女性生殖功能退化，出現(xiàn)月經(jīng)失調(diào)、閉經(jīng)、不孕等等系列疾病，嚴(yán)重影響女性的生活質(zhì)量并加速機(jī)體衰老進(jìn)程。即使在輔助生殖技術(shù)如此發(fā)達(dá)的今天，仍有部分患者因卵巢功能衰退無(wú)法獲得足夠的高質(zhì)量卵子而失去生育的機(jī)會(huì)，給患者身心及社會(huì)經(jīng)濟(jì)帶來(lái)巨大的壓力。對(duì)于卵巢功能障礙，西醫(yī)多用激素替代治療及誘導(dǎo)排卵等方法，但療效不確切，副作用大且費(fèi)用昂貴，中醫(yī)藥的優(yōu)勢(shì)越來(lái)越受關(guān)注[12-20]。所以本研究中，希望通過(guò)應(yīng)激模擬人類(lèi)特發(fā)性POF發(fā)病經(jīng)過(guò)，建立相關(guān)的動(dòng)物模型，用以探討西醫(yī)和中醫(yī)在此方面的療效。
制動(dòng)（束縛）是最常用的身心應(yīng)激模型，本實(shí)驗(yàn)將50 mL注射器改造成制動(dòng)器，與實(shí)驗(yàn)小鼠的體型大小匹配，用燒紅的探針將針筒的前壁及側(cè)壁布滿小孔，以減少塑料管內(nèi)溫度升高，小鼠放入制動(dòng)器后堵住活塞使其活動(dòng)受限，但可進(jìn)食。實(shí)驗(yàn)采用重復(fù)制動(dòng)的方法，每天制動(dòng)時(shí)間從3 h開(kāi)始，以后每天延長(zhǎng)0.5 h，至最長(zhǎng)制動(dòng)時(shí)間為每天6 h，使小鼠處于慢性應(yīng)激狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與未制動(dòng)小鼠相比，經(jīng)過(guò)14 d慢性重復(fù)制動(dòng)處理的小鼠，無(wú)論是單純制動(dòng)的模型組，還是使用西藥或中藥干預(yù)的制動(dòng)西藥組、中藥組，在制動(dòng)期間進(jìn)食、活動(dòng)、精神、毛色等一般情況明顯變差，體重明顯減輕（P < 0.05），憂櫓芷諼陜壹把映/停滯的例數(shù)明顯增多（P < 0.05）。重復(fù)制動(dòng)作為慢性應(yīng)激，刺激下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸異常活化，使糖皮質(zhì)激素持續(xù)升高導(dǎo)致海馬神經(jīng)元受損；同時(shí)在應(yīng)激中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的去甲腎上腺素不斷耗竭，導(dǎo)致抑郁樣癥狀的發(fā)生[21]。故本研究觀察到慢性應(yīng)激后小鼠活動(dòng)和進(jìn)食明顯減少、體重減輕、反應(yīng)遲鈍、皮毛枯燥，與各種抑郁癥狀相一致。高水平的糖皮質(zhì)激素會(huì)直接抑制性腺軸，導(dǎo)致促性腺激素釋放激素及促性腺激素分泌減少，同時(shí)卵巢對(duì)促性腺激素的反應(yīng)降低，最終影響卵巢的分泌功能[22-23]。卵巢分泌的雌激素減少導(dǎo)致血清中雌激素水平降低，雌激素的應(yīng)激性降低與動(dòng)情周期的應(yīng)激性變化高度相關(guān)。有報(bào)道慢性應(yīng)激導(dǎo)致動(dòng)物血漿雌激素不同程度降低，部分動(dòng)物周期未受影響或性周期延長(zhǎng)但仍有規(guī)律，部分動(dòng)物血漿雌二醇在動(dòng)情前期的生理峰值進(jìn)一步降低或消失，陰道涂片結(jié)果表現(xiàn)為無(wú)規(guī)律或持續(xù)處于間期，與更年期大鼠一致[11]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)慢性制動(dòng)應(yīng)激能導(dǎo)致大部分小鼠動(dòng)情周期異常，可建立卵巢功能紊亂或減退模型，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[24]。
制動(dòng)完全結(jié)束后對(duì)各組小鼠進(jìn)行微刺激超排卵，于超排卵第3天和HCG 24 h對(duì)小鼠卵巢內(nèi)原始卵泡、初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡、竇卵泡進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果顯示制動(dòng)小鼠與未制動(dòng)小鼠之間各級(jí)卵泡數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），各制動(dòng)組小鼠之間也沒(méi)有明顯區(qū)別（P > 0.05）。小鼠各級(jí)卵泡中，原始卵泡數(shù)代表卵巢的儲(chǔ)備功能，與POF直接相關(guān)，竇卵泡數(shù)代表能發(fā)育為成熟卵泡的數(shù)量，與POF和POR直接相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)中各組小鼠間各級(jí)卵泡數(shù)目沒(méi)有顯著差別，說(shuō)明未建立POF/POR小鼠模型。是否需要延長(zhǎng)應(yīng)激天數(shù)或改變應(yīng)激方式才能建立POF/POR動(dòng)物模型，據(jù)研究報(bào)道[11，25]，制動(dòng)前期小鼠對(duì)應(yīng)激的反應(yīng)最明顯，一般不超過(guò)25 d，隨著應(yīng)激天數(shù)的增加，制動(dòng)14 d后小鼠逐漸對(duì)應(yīng)激產(chǎn)生適應(yīng)，動(dòng)情周期恢復(fù)正常，故本實(shí)驗(yàn)選擇實(shí)施制動(dòng)14 d而沒(méi)有繼續(xù)更長(zhǎng)時(shí)間。還有研究報(bào)道[11，22]通過(guò)束縛、冷熱刺激、被動(dòng)吸煙等多種慢性應(yīng)激的方法或重復(fù)制動(dòng)可導(dǎo)致大鼠卵巢功能紊亂，但只有部分大鼠出現(xiàn)POF，這些結(jié)果均與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果方向一致，提示應(yīng)激方法不能得到穩(wěn)定的POF動(dòng)物模型，但是能得到穩(wěn)定的卵巢功能紊亂動(dòng)物模型。經(jīng)本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，這種動(dòng)物模型在超排卵刺激后沒(méi)有發(fā)生卵巢低反應(yīng)，故今后若研究卵巢低反應(yīng)相關(guān)疾病，選擇化療藥物或免疫因素造成POF或許更能成功建立POR動(dòng)物模型。
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